【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种基于“睡美人”转座子系统制作高效转染各类细胞的方法,其特征在于:(1)利用 BglⅡ和NotⅠ酶切位点以及NotⅠ和EcoRⅠ酶切位点在pT/HB转座子载体上加入长度为589bp的CMV启动子和长度为720bp的EGFP(增强型绿色荧光蛋白)基因,构建全长为4849bp的pT‑CMV‑EGFP重组载体;(2)利用脂质体转染pT‑CMV‑EGFP转座子及辅助转座酶SB11,脂质体的用量为总DNA质量的3‑4倍,转座酶SB11与转座子pT‑CMV‑EGFP质量比1:4体系转染贴壁细胞3T3,悬浮细胞H22和原代培养细胞DC。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:杨柳,苏晓三,王翼寅,陈睿,张蕾,
申请(专利权)人:昆明市第一人民医院,
类型:发明
国别省市:云南;53
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