一种厚皮香悬浮细胞再生植株的快速繁殖方法技术

技术编号:10736983 阅读:154 留言:0更新日期:2014-12-10 12:31
本发明专利技术涉及一种厚皮香悬浮细胞再生植株的快速繁殖方法,包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽等步骤。采用本发明专利技术的厚皮香生长周期短,再生成活率高,品质优良,为厚皮香的开发利用提供研究基础。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及,包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽等步骤。采用本专利技术的厚皮香生长周期短,再生成活率高,品质优良,为厚皮香的开发利用提供研究基础。【专利说明】一种厚皮香悬淳细胞再生植株的快速繁殖方法
本专利技术涉及厚皮香组织培养的快繁方法,属于植物

技术介绍
鲁皮香,Ternstroemia gymnanthera (Wight et Arn_ ) Beddome,条琴{,灌 小乔木,又名白花果,称杆红,莫红砍,山茶树,猪血柴,气血藤。分布于湖北、湖南、贵州、云 南、广西、福建、广东、台湾等省。日本、柬埔寨、印度也有分布。多生于酸性黄壤、黄棕壤的常 绿阔叶林中或林缘,垂直分布海拔700?3500m之间。厚皮香适应性强,又耐阴,树冠浑圆, 枝叶层次感强,叶肥厚入冬转绯红,是较优良的下木,适宜种植在林下、林缘等处,为基础栽 植材料。喜阴湿环境,在常绿阔叶树下生长旺盛。也喜光,较耐寒,能忍受-l〇°C低温。喜 酸性土,也能适应中性土和微碱性土。根系发达,抗风力强,萌芽力弱,生长缓慢,不耐强度 修剪,但仍可进行轻度修剪,抗污染力强厚皮香生长较慢,原皮香为半阳性树种,抗有害气 体性强,又是厂矿区的绿化树种,也是一种中药材,花可入药,可清热解毒,散瘀消肿,主治 疥癣瘙痒,感冒等症。目前主要的繁殖方法是播种和扦插繁殖,发芽率较低,只有509Γ60%。 利用组培方法可以有效的提高厚皮香的繁殖效率,但目前国内外尚无研究。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种厚皮香的快速繁殖方法,采用本专利技术方法 繁殖的厚皮香生长周期短,再生成活率高,品质优良,为厚皮香的开发利用提供研究基础。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的: 取厚皮香的叶片,在〇. 1%抑菌型洗洁精中浸泡5min,流水冲洗lOmin,超净工作台上 2. 5%次氯酸钠处理6min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的厚皮香叶片接入培养基配方为 White+NAAO. 25mg/L+6-BA2. 5mg/l+2,4-D3. Omg/L+ 聚乙烯砒咯烷酮(PVP)诱导培养基中进 行愈伤组织诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂5. 5g/L,PH5. 8,光照ΙΟΟΟΙχ,光期6h,暗期18h, 诱导出来的愈伤组织放入液体培养基White (硝酸铵含量减半)+2. Omg/Lpiclorram进行 悬浮细胞培养,附加蔗糖30g/L,PH5. 8,光照ΙΟΟΟΙχ,光期12h,暗期12h,培养出来的愈伤 组织放入分化培养基 White+NAAO. 08mg/L+6-BA(X 8mg/l+CH400-500mg/L,附加蔗糖 50g/L, PH5. 8,光照20001χ,光期14h,暗期10h,分化后接入生根培养基White (硝酸铵含量减半) +ΙΒΑ0. 01-0. lmg/L 中,附加蔗糖 20g/L,PH5. 8,光照 50001x,光期 16h,暗期 8h。 采用本专利技术制备的厚皮香成活率高,周期短,产量大,能耗少,利于大规模种植。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述,但本专利技术要求保护的范围并不 局限于下列实施方式。 【具体实施方式】 实施例1 取厚皮香的叶片,在〇. 1%抑菌型洗洁精中浸泡5min,流水冲洗10min,超净工作台上 2. 5%次氯酸钠处理6min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的厚皮香叶片接入培养基配方为 White+NAAO. 25mg/L+6-BA2. 5mg/l+2,4-D3. Omg/L+ 聚乙烯砒咯烷酮(PVP)诱导培养基中 进行愈伤组织诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂5. 5g/L,PH5. 8,光照ΙΟΟΟΙχ,光期6h,暗期 18h,诱导出来的愈伤组织放入液体培养基White (硝酸铵含量减半)+2. Omg/Lpiclorram 进行悬浮细胞培养,附加蔗糖30g/L,PH5. 8,光照ΙΟΟΟΙχ,光期12h,暗期12h,培养出来的 愈伤组织放入分化培养基 White+NAAO. 08mg/L+6-BA0. 8mg/l+CH400mg/L,附加蔗糖 50g/L, PH5. 8,光照20001χ,光期14h,暗期10h,分化后接入生根培养基White (硝酸铵含量减半) +IBA0. Olmg/L中,附加蔗糖20g/L,PH5. 8,光照50001x,光期16h,暗期8h,再生植株生根率 93%。 实施例2 取厚皮香的叶片,在〇. 1%抑菌型洗洁精中浸泡5min,流水冲洗lOmin,超净工作台上 2. 5%次氯酸钠处理6min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的厚皮香叶片接入培养基配方为 White+NAAO. 25mg/L+6-BA2. 5mg/l+2,4-D3. 0mg/L+ 聚乙烯砒咯烷酮(PVP)诱导培养基中 进行愈伤组织诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂5. 5g/L,PH5. 8,光照ΙΟΟΟΙχ,光期6h,暗期 18h,诱导出来的愈伤组织放入液体培养基White (硝酸铵含量减半)+2. Omg/Lpiclorram 进行悬浮细胞培养,附加蔗糖30g/L,PH5. 8,光照ΙΟΟΟΙχ,光期12h,暗期12h,培养出来的 愈伤组织放入分化培养基 White+NAAO. 08mg/L+6-BA0. 8mg/l+CH500mg/L,附加蔗糖 50g/L, PH5. 8,光照20001χ,光期14h,暗期10h,分化后接入生根培养基White (硝酸铵含量减半) +ΙΒΑ0. 05mg/L中,附加蔗糖20g/L,PH5. 8,光照50001x,光期16h,暗期8h,再生植株生根率 91%。 实施例3 取厚皮香的叶片,在〇. 1%抑菌型洗洁精中浸泡5min,流水冲洗10min,超净工作台上 2. 5%次氯酸钠处理6min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的厚皮香叶片接入培养基配方为 White+NAAO. 25mg/L+6-BA2. 5mg/l+2,4-D3. 0mg/L+ 聚乙烯砒咯烷酮(PVP)诱导培养基中进 行愈伤组织诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂5. 5g/L,PH5. 8,光照ΙΟΟΟΙχ,光期6h,暗期18h, 诱导出来的愈伤组织放入液体培养基White (硝酸铵含量减半)+2. Omg/Lpiclorram进行悬 浮细胞培养,附加蔗糖30g/L,PH5. 8,光照ΙΟΟΟΙχ,光期12h,暗期12h,培养出来的愈伤组织 放入分化培养基 White+NAAO. 08mg/L+6-BA0· 8mg/l+CH500mg/L,附加蔗糖 50g/L,PH5. 8,光 照20001x,光期14h,暗期10h,分化后接入生根培养基White(硝酸铵含量减半)+IBA0. lmg/ L中,附加蔗糖20g/L,PH5. 8,光照50001x,光期16h,暗期8h,再生植株生根率90%。【权利要求】1. ,包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、 愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽,其主要步骤如下: (1) 取厚皮香的叶片,对其进行灭菌处理; (2) 将步骤(1)灭菌处理过的厚皮香叶片接入培养基配方为W本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种厚皮香悬浮细胞再生植株的快速繁殖方法,包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽,其主要步骤如下:(1)取厚皮香的叶片,对其进行灭菌处理;(2)将步骤(1)灭菌处理过的厚皮香叶片接入培养基配方为White+NAA0.25mg/L+6‑BA2.5mg/l+2,4‑D3.0mg/L+聚乙烯砒咯烷酮(PVP)诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH5.8,光照1000lx,光期6h,暗期18h;(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入液体培养基White(硝酸铵含量减半)+2.0mg/Lpiclorram进行悬浮细胞培养,附加蔗糖30g/L,PH5.8,光照1000lx,光期12h,暗期12h;(4)取步骤(3)培养出来的愈伤组织放入分化培养基White+NAA0.08mg/L+6‑BA0.8mg/l+CH400‑500mg/L,附加蔗糖50g/L,PH5.8,光照2000lx,光期14h,暗期10h;(5)步骤(4)分化后接入生根培养基White(硝酸铵含量减半)+IBA0.01‑0.1mg/L中,附加蔗糖20g/L,PH5.8,光照5000lx,光期16h,暗期8h。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:杨存
申请(专利权)人:南京通泽农业科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏;32

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