一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法技术

本发明专利技术研究了一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，包括一枝黄花茎尖的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽等步骤，本发明专利技术方法所制备的一枝黄花生产周期短，成活率高且完全无病毒，可以进行大规模种植和开发。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一枝黄花脱毒培养的快繁方法，属于植物

技术介绍
一枝黄花，菊科，别称野黄菊、山边半枝香、酒金花、满山黄、等，是一个多型性的种，叶形与花序式有极大变化。花期8-10月，果期10-12月。生于海拔565-2850米的山坡、阔叶林缘、林下、路旁及草丛之中。原产北美，上世纪30年代中期（1935年）作为观赏植物引入上海、南京等地后逸生为恶性杂草,成为入侵植物。喜光，喜凉爽干燥的环境，耐寒，耐热，耐瘠薄，肥力过大容易倒伏。在各类土壤中均能生长。稍能耐短期积水。对环境适应性强，宜栽种于肥沃疏松富含腐殖质排水良好的砂质土壤中。全草含槲皮苷、异斛皮苷、芸香甙、紫云英苷、山柰酚-3-芸香糖甙、一枝黄花酚甙、2，6-二甲氧基苯甲酸苄酯、当归酸-3，5-二甲氧基-4-乙酰氧基肉桂酯及2-顺、8-顺-母菊酯。咖啡酸、奎尼酸、绿元酸、矢车菊双苷。含少量挥发油及皂苷、烟酸、乙醇酸，根含挥发油。可采用种子、分株等方法繁殖。全草入药，性味辛、苦，微温，功能主治：疏风清热，抗菌消炎。用于风热感冒；头痛；咽喉肿痛；肺热咳嗽；黄疸；泄泻；热淋；痈肿疮疖；毒蛇咬伤，目前主要是自然繁殖，利用组培技术生产周期短，成活率高且完全无病毒，可以进行大规模种植和开发。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种一枝黄花的快速繁殖方法，由该方法所制备的一枝黄花生产周期短，成活率高且完全无病毒，可以进行大规模种植和开发。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的： 取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm，消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2-0.3mg/L+NAA0.1-0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃，已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率。 采用本专利技术制备的一枝黄花分化成活率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。 下面将结合具体实施方式对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 具体实施方式 实施例1 取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm，消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃，已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率，成活率90%。 实施例2 取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm，消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃，已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率，成活率89%。 实施例3 取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm，消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃，已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率，成活率87%。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，包括一枝黄花茎尖的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下：（1）取一枝黄花幼嫩的茎尖，对其进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6‑BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6‑BA0.2‑0.3mg/L+NAA0.1‑0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃；（4）取步骤（3）分化出来的丛生芽接入1/3MS培养基中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5g/L，pH5.7，光照16000lx，温度25±2℃；（5）取步骤（4）生根的试管苗进行炼苗移栽。

【技术特征摘要】
1. 一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，包括一枝黄花茎尖的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下：
（1）取一枝黄花幼嫩的茎尖，对其进行消毒处理；
（2）取步骤（1）消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%；
（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2-0.3mg/L+NAA0.1-0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃；
（4）取步骤（3）分化出来的丛生芽接入1/3MS培养基中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5g/L，pH5...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨存，
申请(专利权)人：南京通泽农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32