治疗性人抗-IL-1R1单克隆抗体制造技术

本发明专利技术涉及治疗性人抗-IL-1R1单克隆抗体。描述了与白介素-1受体型1(IL-1R1)相互作用的抗体。还描述了通过施用药学有效量的针对IL-1R1的抗体治疗IL-1介导的疾病的方法。另外还描述了使用针对IL-1R1的抗体检测样品中IL-1R1的量的方法。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
治疗性人抗-IL-1R1单克隆抗体本申请是申请日为2003年9月5日，申请号为200910009932.1的、专利技术名称和本专利技术相同的专利技术专利申请的分案申请。本专利技术涉及并要求2002年9月6日提交的美国临时申请序号60/408,719的优先权，其公开在此次被并入作为参考。专利
本专利技术涉及结合白介素-1受体型1(IL-1R1)蛋白的抗体。还提供了用于治疗IL-1介导的疾病，如类风湿性关节炎、骨关节炎和其他炎性病症的组合物，特别是药物组合物和方法。专利技术背景抗体开发炎症是身体对机械损伤、感染或抗原刺激导致的损伤的应答。炎症反应通常出现病理性地表达。当炎症以夸张方式表达，被不适当地刺激或者有害剂被除去后仍然持续时，出现这些病症。炎症应答由细胞因子介导。目前发现的最有效的炎症细胞因子之一是白介素-1(IL-1)。IL-1信号增加导致与一些疾病有关的持续炎症，并且认为IL-1是许多疾病和医学病症的关键介导剂。该细胞因子主要(尽管不是专门地)由巨噬细胞/单核细胞谱系的细胞产生并且可以以两种形式产生：IL-1alpha(IL-1α)和IL-1beta(IL-1β)。IL-1通过与异二聚体受体复合体相互作用刺激细胞应答，该异二聚体受体复合体由两种跨膜蛋白：IL-1受体型1(IL-1R1)和IL-1受体辅助蛋白(IL-1RAcP)组成。IL-1首先结合IL-1R1；然后IL-1RAcP被募集到该复合体(Greenfeder等人，1995，J.Biol.Chem.270：13757-13765；Yoon和Dinarello，1998，J.Immunology160：3170-3179；Cullinan等人，1998，JImmunology161：5614-5620)，接着是信号转导，从而诱导细胞应答。基于细胞的结合研究表明IL-1RAcP通过延缓配体离开速度来稳定IL-1R信号复合体(Wesche等人，1998，FEBSLetters429：303-306)。尽管已经完全表征了IL-1和IL-1R的相互作用，但是IL-1RAcP与配体-结合的受体之间的相互作用仍然没有被较好地限定。因为IL-1RAcP与单独的IL-1或者IL-1R1都没有显著亲和性，但是与其复合体却有高亲和性，因此推断通过IL-1/IL-1R结合事件产生了IL-1RAcP的新的结合位点，该结合事件甚至包括IL-1残基的贡献(Ettorre等人，1997，Eur.CytokineNetw.8：161-171)。另一种分子——IL-1受体拮抗剂(IL-1ra)与IL-1α和IL-1β竞争受体结合但是不能募集IL-1RAcP，导致一种被占据但是无信号的受体。IL-1活性还可以被II型IL-1R均衡，II型IL-1R是一种引诱受体，其结合配体但是由于截断的细胞内结构域而不参与信号化。IL-1ra和II型IL-1R降低IL-1介导的炎症事件的严重性和持续时间(Wesche等人，1998，FEBSLetters429：303-306；Dripps等人，1991，J.Biol.Chem.266：10331-10336；Dripps等人，1991，J.Biol.Chem.266：20331-20335)。可以从能够特异防止IL-1的细胞受体活化的任一种蛋白质产生白介素-1抑制剂，该活化的防止可以来自许多机理。这些机理包括下调IL-1产生、结合游离的IL-1、干扰IL-1结合IL-1R、干扰IL-1R-IL-1RAcP复合体的形成或者干扰IL-1与其受体结合后IL-1信号化的调节。IL-1抑制剂的类别包括：●白介素-1受体拮抗剂如IL-1ra，如下面描述的；●抗-IL-1R单克隆抗体(例如，如在公布的欧洲专利申请号EP623674中公开的，其公开在此处被并入作为参考)；●IL-1结合蛋白，如可溶性IL-1受体(例如，如在美国专利号5,492,888；5,488,032、5,464,937、5,319,071和5,180,812中公开的，它们的公开在此处被并入作为参考)；●抗-IL-1单克隆抗体(例如，如在国际专利申请公布号WO9501997、WO9402627、WO9006371、美国专利号4,935,343、EP364778、EP267611和EP220063中公开的，它们的公开在此处被并入作为参考)；●IL-1受体辅助蛋白和其抗体(例如，如在国际专利申请公布号WO96/23067和WO99/37773中公开的，它们的公开在此处被并入作为参考)；和●白介素-1β转换酶抑制剂(ICE)或半胱天冬酶I(例如，如在国际专利申请公布号WO99/46248、WO99/47545和WO99/47154中公开的，它们的公开在此处被并入作为参考)；它们可用于抑制IL-1β产生和分泌；●白介素-1β蛋白酶抑制剂；和●其他化合物和蛋白质，它们阻断IL-1的体内合成或胞外释放。示例性IL-1抑制剂在下面的参考文献中公开：美国专利号5,747,444、5,359,032、5,608,035、5,843,905、5,359,032、5,866,576、5,869,660、5,869,315、5,872,095、5,955,480、和5,965,564、国际专利申请公布号WO98/21957、WO96/09323、WO91/17184、WO96/40907、WO98/32733、WO98/42325、WO98/44940、WO98/47892、WO98/56377、WO99/03837、WO99/06426、WO99/06042、WO91/17249、WO98/32733、WO98/17661、WO97/08174、WO95/34326、WO99/36426、和WO99/36415、欧洲专利申请公布号EP534978和EP89479、和法国专利申请号FR2762514。所有上述参考文献的公开在此处被并入作为参考。白介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)是作为白介素-1的天然抑制剂的一种人体蛋白并且是IL-1家族的一员，IL-1家族包括IL-1α和IL-1β。优选的受体拮抗剂(包括IL-1ra和其变体与衍生物)，以及其产生和使用方法在美国专利号5,075,222、国际专利申请公布号WO91/08285、WO91/17184、WO92/16221、WO93/21946、WO94/06457、WO94/21275、WO94/21235、DE4219626，WO94/20517、WO96/22793、WO97/28828、和WO99/36541、澳大利亚专利申请号AU9173636，和法国专利申请号FR2706772中公开，它们的公开在此处被并入作为参考。蛋白质包括IL-1受体拮抗剂的糖基化和非糖基化形式。特别地，在美国专利号5,075,222(’222专利)中公开和描述了IL-1ra的3个有用的形式及其变体。IL-1raα通过SDS-PAGE被表征为一种22-23kD的分子，等电点约为4.8，在Tris缓冲液(pH7.6)中约52mMNaCl处从MonoQFPLC中洗脱出来。IL-1raβ被表征为22-23kD蛋白，在48mMNaCl处从MonoQ柱洗脱出来。IL-1raα和IL-1raβ都被本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的核酸分子，其包含：(a) 编码人重链框架区的核苷酸序列、编码包含SEQ ID NO: 63的重链CDR1区的核苷酸序列、编码包含SEQ ID NO: 66的重链CDR2区的核苷酸序列、和编码包含SEQ ID NO: 69的重链CDR3区的核苷酸序列；和(b) 编码人轻链框架区的核苷酸序列、编码包含SEQ ID NO: 71的轻链CDR1区的核苷酸序列、编码包含SEQ ID NO: 73的轻链CDR2区的核苷酸序列、和编码包含SEQ ID NO: 75的轻链CDR3区的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
2002.09.06 US 60/408,7191.分离的核酸分子，其编码特异结合白介素-1受体型1，IL-1R1，的人抗体或其抗原结合片段，并且包含：(a)编码人重链框架区的核苷酸序列、编码由SEQIDNO:63组成的重链CDR1区的核苷酸序列、编码由SEQIDNO:66组成的重链CDR2区的核苷酸序列、和编码由SEQIDNO:69组成的重链CDR3区的核苷酸序列；和(b)编码人轻链框架区的核苷酸序列、编码由SEQIDNO:71组成的轻链CDR1区的核苷酸序列、编码由SEQIDNO:73组成的轻链CDR2区的核苷酸序列、和编码由SEQIDNO:75组成的轻链CDR3区的核苷酸序列。2.分离的核酸分子，其包含编码特异结合白介素-1受体型1，IL-1R1，的人抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列，其中所述抗体或其片段包含：(a)由SEQIDNO:15编码的氨基酸序列的重链可变区，或分别为SEQIDNO:63、SEQIDNO:66和SEQIDNO:69的氨基酸序列的重链CDR1、CDR2和CDR3；和(b)由SEQIDNO:17编码的氨基酸序列的轻链可变区，或分别为SEQIDNO:71、SEQIDNO:73和SEQIDNO:75的氨基酸序列的轻链CDR1、CDR2和CDR3。3.权利要求2所述的分离的核酸分子，其中所述分离的核酸分子包含编码特异结合IL-1R1的抗体的重链可变区和轻链可变区的核酸序列的组合，所述组合分别包含：SEQIDNO:85和SEQIDNO:86的核苷酸序列。4.分离的核酸分子，其包含编码特异结合IL-1R1的人抗体的核苷酸序列，其中所述抗体包含具有重链可变区或其抗原结合片段的重链，其中所述重链可变区与由SEQIDNO:85编码的氨基酸序列一致，并且其中所述抗原结合片段包含分别为SEQIDNO:63、SEQIDNO:66和SEQIDNO:69的氨基酸序列的重链CDR1、CDR2和CDR3，并且其中所述抗体包含具有轻链可变区或其抗原结合片段的轻链，其中所述轻链可变区与由SEQIDNO:86编码的氨基酸序列一致，并且其中所述抗原结合片段包含分别为SEQIDNO:71、SEQIDNO:73和SEQIDNO:75的氨基酸序列的轻链CDR1、CDR2和CDR3。5.权利要求1－4中任一项所述的分离的核酸分子，其中所述核酸分子编码的抗体为IgG2抗体。6.权利要求1－4中任一项所述的分离的核酸分子，其中所述核酸分子编码的抗体为全人抗体。7.表达载体，其包含权利要求1－6中任一项所述的核酸分子。8.分离的宿主细胞，其包含权利要求7所述的表达载体。9.权利要求8所述的宿主细胞，其为真核细胞。10.权利要求8所述的宿主细胞，其为原核细胞。11.细胞系，其包含权利要求8所述的表达载体。12.制备特异结合IL-1R1的抗体的方法，包括在宿主细胞中表达权利要求1－6中任一项所述的核酸。13.制备特异结合IL-1R1的抗体的方法，包括培养权利要求9或10所述的宿主细胞。14.制备特异结合IL-1R1的抗体的方法，包括培养权利要求11所述的细胞系。15.一组核酸分子，其编码特异结合IL-1R1的人抗体或其抗原结合片段并且包含：(a)第一核酸分子，其编码人重链框架区、编码SEQIDNO:6...

【专利技术属性】
技术研发人员：B瓦纳姆，C韦兹纳，A维特，X钱，F马丁，H黄，G埃利奥特，
申请(专利权)人：安姆根有限公司，梅达雷克斯有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US