明日叶茎段组织培养快繁技术制造技术

本发明专利技术公开了一种明日叶茎段组织培养快繁技术，选取明日叶茎段，用流水冲洗,75％酒精溶液浸泡，无菌水冲洗，放入0.1％升汞溶液中消毒，之后再用无菌水冲洗；切段；种于愈伤组织诱导培养基中培养20-30天茎段切口处长出愈伤组织团；再将愈伤组织团切块,转接至愈伤组织增殖培养基上培养20-30天对愈伤组织增殖；将增殖的愈伤组织切块，转接于丛生芽诱导培养基中进行培养30天分化产生丛生芽；将丛生芽基部的愈伤组织切除，分割为单个丛芽，将芽接种于生根培养基中培养20天得到再生植株幼苗；驯化练苗一周后移栽入灭菌处理的椰壳土中直至幼苗成活。本发明专利技术的有益效果是明日叶茎段做繁殖材料，成本低。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种明日叶茎段组织培养快繁技术，选取明日叶茎段，用流水冲洗,75％酒精溶液浸泡，无菌水冲洗，放入0.1％升汞溶液中消毒，之后再用无菌水冲洗；切段；种于愈伤组织诱导培养基中培养20-30天茎段切口处长出愈伤组织团；再将愈伤组织团切块,转接至愈伤组织增殖培养基上培养20-30天对愈伤组织增殖；将增殖的愈伤组织切块，转接于丛生芽诱导培养基中进行培养30天分化产生丛生芽；将丛生芽基部的愈伤组织切除，分割为单个丛芽，将芽接种于生根培养基中培养20天得到再生植株幼苗；驯化练苗一周后移栽入灭菌处理的椰壳土中直至幼苗成活。本专利技术的有益效果是明日叶茎段做繁殖材料，成本低。【专利说明】明日叶茎段组织培养快繁技术
本专利技术属于植物培育
，涉及一种明日叶茎段组织培养快繁技术。
技术介绍
明日叶药食两用，尤其在药用方面的价值更是被各界公认为极具发展潜力的新兴蔬菜。我国20多年前从日本引进明日叶，目前国内仅有少数几家公司刚引种，栽培面积很小，原料在国际市场价格很高，需求量大。在生产过程中，明日叶植株通常在种植后1-2年即进入繁殖期，开花结实后立即死亡。明日叶花期持续较长，果实结实率较低，在采收时种子成熟度不一，并且其果实为双悬果，造成明日叶的种子发芽率极低，不易大规模栽培。如今明日叶种苗的繁育及栽培技术已成为制约明日叶及其加工品发展的瓶颈，而文献中关于明日叶的种苗繁育及栽培报道甚少，导致市场上明日叶及其产品的价格居高不下。 鉴于以上因素，本研究旨在通过对明日叶茎段进行离体培养的方法，获得一套关于明日叶种子萌发及组织培养的方案，构建明日叶的繁育体系。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种明日叶茎段组织培养快繁技术，解决了明日叶种子发芽率低，市场上原材料不足、价格昂贵的问题。 本专利技术所采用的技术方案是按照以下步骤进行: (I)选取明日叶的茎，用流水冲洗，放入无菌操作台上备用； (2)用75%酒精溶液浸泡，无菌水冲洗，放入0.1 %升汞溶液中消毒,之后再用无菌水冲洗； (3)用无菌滤纸吸干茎的水，然后切为茎段； (4)将茎段接种于愈伤组织诱导培养基中，置于24°C培养箱中20001x光强下培养，光照条件为每天16小时光照，8小时黑暗，培养20-30天茎段切口处长出愈伤组织团； (5)再将愈伤组织团切块，转接至愈伤组织增殖培养基上，培养温度25°C，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20-30天对愈伤组织增殖； (6)将增殖的愈伤组织切块，转接于丛生芽诱导培养基中进行培养，培养温度25°C，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养30天分化产生丛生芽； (7)将丛生芽基部的愈伤组织切除，分割为单个芽，将芽接种于生根培养基中，培养温度25°C，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20天得到再生植株幼苗； (8)选取健壮幼苗于组培瓶中，移至自然环境条件下3天，打开组培瓶盖3天驯化练苗，经过驯化炼苗一周后移栽入灭菌处理的椰壳土中，上覆薄膜，浇水，保持空气湿度，I周后逐渐打开薄膜，直至幼苗成活。 进一步，所述步骤3中切成的茎段长度为Icm ;所述步骤5、步骤6切块为1cm2。 进一步,所述愈伤组织诱导培养基为MS+lmg/L6-BA+lmg/L2, 4-D+3mg/LNAA ;所述愈伤组织增殖培养基为MS+6-BA2mg/L+2，4-D1.5L ;所述丛生芽诱导培养基为MS+6-BAlmg/L+NAA0.2/L ;所述生根培养基为 1/2MS+0.02mg/LNAA。 本专利技术的有益效果是采用明日叶茎段作为繁殖材料成本低。 【具体实施方式】 下面结合【具体实施方式】对本专利技术进行详细说明。 本专利技术采用MS为基础培养基，配置不同植物生长物质的组合: 愈伤组织诱导培养基:MS+lmg/L6-BA+lmg/L2，4_D+3mg/LNAA； 愈伤组织增殖培养基:MS+6-BA2mg/L+2，4-D1.5L ； 丛生芽诱导培养基:MS+6-BAlmg/L+NAA0.2/L ； 生根诱导:l/2MS+0.02mg/LNAA。 本专利技术按照以下步骤进行: (I)以明日叶茎为外植体，用流水冲洗15_20min后，放入无菌操作台上备用。 (2)在接种室，超净工作台上用75%酒精浸泡外植体30s后取出，无菌水冲洗3次，放入0.1 %升汞溶液中消毒7min，无菌水冲洗7次。 (3)用无菌滤纸吸干茎的水份，然后切成Icm长的茎段。 (4)将茎段接种于愈伤组织诱导培养基中，置于24°C培养箱中20001x光强下培养，光照条件为每天16小时光照，8小时黑暗，培养20-30天至茎段切口处长出愈伤组织团并增大。 (5)再将愈伤组织团均匀切割为Icm2，转接至愈伤组织增殖培养基上，培养温度25°C左右，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20-30天愈伤组织可增殖至6cm2左右。 (6)将增殖的愈伤组织切割为Icm2大小，转接于丛生芽诱导培养基中进行培养，培养温度25°C左右，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养15-20天后愈伤组织再分化产生丛生芽，30天后丛生芽生长良好。 (7)将丛生芽基部的愈伤组织切除，分割为单个芽，将芽接种于生根培养基中，培养温度25°C左右，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20天后芽基部分化产生根，生长良好，得到再生植株幼苗。 (8)选取健壮幼苗于组培瓶中，移至自然环境条件下3天，打开组培瓶盖3天驯化练苗，经过驯化炼苗一周后移栽入灭菌处理的椰壳土中，上覆薄膜，注意浇水，保持空气湿度，I周后逐渐打开薄膜，并减少浇水频率，成活率可达94%以上。 本专利技术构建了明日叶的新型繁育体系，打破了由于种子发芽率低而造成的生产瓶颈，为规模化生产提供了条件。 以上所述仅是对本专利技术的较佳实施方式而已，并非对本专利技术作任何形式上的限制，凡是依据本专利技术的技术实质对以上实施方式所做的任何简单修改，等同变化与修饰，均属于本专利技术技术方案的范围内。【权利要求】1.明日叶茎段组织培养快繁技术，其特征在于按照以下步骤进行: (1)选取明日叶的茎，用流水冲洗，放入无菌操作台上备用； (2)用75%酒精与水溶液浸泡，无菌水冲洗，放入0.1 %升汞溶液中消毒，之后再用无菌水冲洗； (3)用无菌滤纸吸干茎的水，然后切为茎段； (4)将茎段接种于愈伤组织诱导培养基中，置于24°C培养箱中20001x光强下培养，光照条件为每天16小时光照，8小时黑暗，培养20-30天茎段切口处长出愈伤组织团； (5)再将愈伤组织团切块，转接至愈伤组织增殖培养基上，培养温度25°C，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20-30天对愈伤组织增殖； (6)将增殖的愈伤组织切块，转接于丛生芽诱导培养基中进行培养，培养温度25°C，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养30天分化产生丛生芽； (7)将丛生芽基部的愈伤组织切除，分割为单个芽，将芽接种于生根培养基中，培养温度2本文档来自技高网...

【技术保护点】
明日叶茎段组织培养快繁技术，其特征在于按照以下步骤进行：(1)选取明日叶的茎，用流水冲洗,放入无菌操作台上备用；(2)用75％酒精与水溶液浸泡，无菌水冲洗，放入0.1％升汞溶液中消毒，之后再用无菌水冲洗；(3)用无菌滤纸吸干茎的水，然后切为茎段；(4)将茎段接种于愈伤组织诱导培养基中，置于24℃培养箱中2000lx光强下培养，光照条件为每天16小时光照，8小时黑暗，培养20‑30天茎段切口处长出愈伤组织团；(5)再将愈伤组织团切块,转接至愈伤组织增殖培养基上，培养温度25℃，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20‑30天对愈伤组织增殖；(6)将增殖的愈伤组织切块，转接于丛生芽诱导培养基中进行培养，培养温度25℃，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养30天分化产生丛生芽；(7)将丛生芽基部的愈伤组织切除，分割为单个芽，将芽接种于生根培养基中，培养温度25℃，光照条件为16小时光照，8小时黑暗，光照强度3000Lx，培养20天得到再生植株幼苗；(8)选取健壮幼苗于组培瓶中，移至自然环境条件下3天，打开组培瓶盖3天驯化练苗，经过驯化炼苗一周后移栽入灭菌处理的椰壳土中，上覆薄膜，浇水，保持空气湿度，1周后逐渐打开薄膜，直至幼苗成活。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：罗充，辛柯，姚红艳，冯晓英，陈显刚，吴涛，罗开源，赵敏，
申请(专利权)人：贵州师范大学，
类型：发明
国别省市：贵州;52