本实用新型专利技术公开了一种快速定量检测IGFBP-7和TIMP-2的胶体金试纸，所述胶体金试纸包括支撑垫片，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的一端连接吸水垫，另一端连接偶合物垫片，所述偶合物垫片连接样本垫片，所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件，上方设有第二固定部件，其特征在于，所述硝酸纤维素膜中间部位第一检测线和第二检测线分别包被有抗IGFBP-7或抗TIMP-2的单克隆或多克隆抗体，在所述第一检测线和第二检测线的两边分别设有控制线，所述偶合物垫片上涂布有金标记的IGFBP-7和TIMP-2抗体以及控制线偶合物。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本技术公开了一种快速定量检测IGFBP-7和TIMP-2的胶体金试纸，所述胶体金试纸包括支撑垫片，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的一端连接吸水垫，另一端连接偶合物垫片，所述偶合物垫片连接样本垫片，所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件，上方设有第二固定部件，其特征在于，所述硝酸纤维素膜中间部位第一检测线和第二检测线分别包被有抗IGFBP-7或抗TIMP-2的单克隆或多克隆抗体，在所述第一检测线和第二检测线的两边分别设有控制线，所述偶合物垫片上涂布有金标记的IGFBP-7和TIMP-2抗体以及控制线偶合物。【专利说明】-种快速定量检测IGFBP-7和TIMP-2的胶体金试纸
本技术属于临床医学诊断领域，具体涉及一种快速定量检测IGFBP-7和 --ΜΡ-2的胶体金试纸。
技术介绍
急性肾衰竭（AKI)是一个由多种病因引起的临床综合征，是因肾循环衰竭或肾小 管的变化而引起的一种突发性肾功能丧失，因此肾脏无法排除身体的代谢废物。当肾脏无 法行使正常功能时，会导致毒素，废物和水分在体内堆积，而引起急性肾衰竭。 与急性肾衰竭（AKI)检测相关的标志物有许多种，如KIM-UL-FABP都最引人注目 的作为AKI诊断生物标志物。研究表明，在AKI中，岛素样生长因子结合蛋白（insulin-like growth factor-binding protein-7，IGFBP-7)和组织金属蛋白酶抑制剂-2 (tissue inhibitor of metalloproteinases-2，TIMP-2)是细胞周期阻滞是一个关键的机制，可用 于检测AKI。而且IGFBP7和HMP-2AUC(曲线下面积)分别为0. 76和0. 79,两者联合IGFBP-7 和HMP-2AUC为0. 80。而其它标志物AUC彡0. 72。因此两者联合比现有检测标志物可早 12-36小时检测到AKI。 免疫胶体金技术（Immune colloidal gold technique)是以胶体金作为示踪标志 物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸（HAuC14)在还原剂如 白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成 为一种稳定的胶体状态，称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正 电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。胶体 金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合。根据胶体金的一些物理性 状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶 体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 鉴于目前尚无快速定量检测IGFBP7和--ΜΡ-2方法，本技术的目的是提供 一种可用于快速定量检测IGFBP7和TIMP-2的胶体金试纸以及一种可用于快速定量检测 IGFBP7和TIMP-2的胶体金试纸盒，所述胶体金试纸和胶体金试纸盒具有方便快捷、操作简 单、结果准确等优点。
技术实现思路
本技术的一个目的是提供一种快速定量检测IGFBP-7和--ΜΡ-2的胶体金试 纸，本技术所述快速定量检测IGFBP-7和TIMP-2的胶体金试纸具有方便快捷、操作简 单、结果准确等优点，适于临床快速诊断。 本技术的技术方案是： -种快速定量检测IGFBP-7和TIMP-2的胶体金试纸，包括支撑垫片5,位于所述支 撑垫片上的硝酸纤维素膜1，所述硝酸纤维素膜的一端连接吸水垫4,另一端连接偶合物垫 片2,所述偶合物垫片连接样本垫片3,所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件7， 上方设有第二固定部件6,其特征在于，所述硝酸纤维素膜1中间部位第一检测线8和第二 检测线11分别包被有抗IGFBP-7和抗TIMP-2的单克隆或多克隆抗体，在所述第一检测线 和第二检测线的两边分别设有控制线9,所述偶合物垫片2上涂布有金标记的IGFBP-7和 TIMP-2抗体以及控制线偶合物。 优选地，所述控制线9包被有抗DNP抗体，所述控制线偶合物为DNP-BSA标记的胶 体金。 其中所述BSA是指牛血清白蛋白。 优选地，所述第一固定部件7为双面胶，第二固定部件6为单面胶。 优选地，所述两条控制线9与第一检测线8和第二检测线11为平行设置。 本技术的另一个目的是提供了一种快速定量检测IGFBP-7和TIMP-2抗体的 胶体金试纸盒，在本技术所述的定量检测IGFBP-7和TIMP-2抗体的胶体金试纸的基础 上还包括一外壳10。 所述外壳优选塑料外壳。 所述外壳包裹所述试纸，露出样本垫片3、硝酸纤维素膜1上的第一检测线8和第 二检测线11和两条控制线9、以及吸水垫4。 本技术所述的试纸盒具有方便携带和贮存的优点。 本技术所述的快速定量检测IGFBP-7和TIMP-2抗体的胶体金试纸或试纸盒 的工作原理是：采用免疫反应原理，通过双抗体夹心法制备而成。检验时样本中的IGFBP-7 和--ΜΡ-2抗原首先分别与偶合垫上的IGFBP-7和--ΜΡ-2抗体偶合物发生免疫反应，形成 免疫复合物。其后免疫复合物随着样本在硝基纤维素膜上层析流动，当免疫复合物层析至 硝基纤维素膜上的检测区（IGFBP-7和--ΜΡ-2检测线)时，分别与预先包被在硝基纤维素膜 上的抗IGFBP-7和--ΜΡ-2抗体发生反应从而被固定在硝基纤维素膜的检测线上。样本中 的IGFBP-7和TIMP-2越多，检测线上的复合物越多，条带上的光密度值就越高。同时，在检 测过程中，控制线偶合物（即DNP-BSA标记的胶体金)，也会随样本在硝基纤维素膜上层析， 当层析至硝基纤维素膜的控制线时，DNP-BSA胶体金会与预先包被在硝基纤维素膜上的抗 DNP抗体发生反应从而被固定在对照区(控制线）上。由于胶体金为红色，因而固定在硝基 纤维素膜控制线上的抗DNP中的DNP-BSA胶体金免疫复合物将显示红色。当样本中不含 IGFBP-7和--ΜΡ-2时，则只显示两条控制线。当样本含IGFBP-7和--ΜΡ-2时，检测线就会 分别清晰的显示出来。 当反应结束后，利用多功能免疫检测仪（瑞莱生物工程(深圳）有限公司）将控制 线和检测线的光密度进行分析，并将所分析得到的结果进行运算，从而得到相对光密度值 (RI)。然后检测仪根据已预先设置在检测仪内的标准曲线对IGFBP-7和--ΜΡ-2的浓度进 行计算并显示结果，以ng/mL为单位表示。 【专利附图】【附图说明】 图1是本技术所述快速定量检测IGFBP-7和--ΜΡ-2的胶体金试纸的一种优 选实施方式的结构示意图。 其中，1:硝酸纤维素膜，2 :偶合物垫片，3:样本垫片，4:吸水垫，5:支撑垫片，6: 单面胶，7:双面胶，8:第一检测线，9:控制线，11 :是第二检测线。 图2是本技术所述快速定量检测IGFBP-7和--ΜΡ-2的胶体金试纸盒的一种 优选实施方式的示图。 其中，3:样本垫片，8:检测线，9:控制线，4:吸水垫，10 :外壳。 【具本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种快速定量检测IGFBP‑7和TIMP‑2的胶体金试纸，包括支撑垫片(5)，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜(1)，所述硝酸纤维素膜的一端连接吸水垫(4)，另一端连接偶合物垫片(2)，所述偶合物垫片连接样本垫片(3)，所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件(7)，上方设有第二固定部件(6)，其特征在于，所述硝酸纤维素膜(1)中间部位第一检测线(8)和第二检测线(11)分别包被有抗IGFBP‑7或抗TIMP‑2的单克隆或多克隆抗体，在所述第一检测线和第二检测线的两边分别设有控制线(9)，所述偶合物垫片(2)上涂布有金标记的IGFBP‑7和TIMP‑2抗体以及控制线偶合物，所述控制线(9)包被有抗DNP抗体，所述控制线偶合物为DNP‑BSA标记的胶体金。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：赵俊平，刘红剑，黄华都，刘春莉，
申请(专利权)人：瑞莱生物工程深圳有限公司，
类型：新型
国别省市：广东;44
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