具有过氧化氢酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸制造技术

技术编号:10573515 阅读:206 留言:0更新日期:2014-10-29 09:08
提供了具有过氧化氢酶活性的分离的多肽以及编码所述多肽的多核苷酸。还提供了包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及用于产生和使用所述多肽的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】提供了具有过氧化氢酶活性的分离的多肽以及编码所述多肽的多核苷酸。还提供了包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及用于产生和使用所述多肽的方法。【专利说明】具有过氧化氢酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸 对于在联邦资助的研究和开发下完成的专利技术的权利的声明 本专利技术是在由美国能源部授予的合作协议(Cooperative Agreement) DE-FC36-08G018080下以政府支持完成的。政府在本专利技术中具有一定权利。 涉及序列表 本申请包含计算机可读形式的序列表,其通过提述并入本文。 专利技术背景
本专利技术涉及具有过氧化氢酶活性的多肽和催化域,和编码所述多肽和催化域的多 核苷酸。本专利技术亦涉及包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及产生和使用 所述多肽和催化域的方法。
技术介绍
过氧化氢酶是催化过氧化物(H202) 至氧(〇2)和水(H 20)的转化的酶。这些广泛存在的酶已经从多种动物组织、植物和微生物 纯化(Chance 和 Maehly, 1955, Methods Enzymol. 2:764-791)。 过氧化氢酶制备物商业上用于诊断性酶试剂盒,以供从葡萄糖酶促产生葡萄糖酸 钠,供中和H 202废物,和供在食物和饮料中去除H202和/或生成0 2。 W0 92/17571公开了一种过氧化物酶,其与其它已知的过氧化物酶(来自柱 顶孢属(Scytalidium)和腐质霉属(Humicola)的菌株)相比在更高温度保留活性。 UNIPR0T:A1DJU9公开了来自Neosartorya fischeri的过氧化氢酶的推导的氨基酸序列。 UNIPR0T:P30266 公开了来自 Bacillus pseudofirmu 的过氧化氢酶。UNIPR0T:P42234 公开 了来自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的过氧化氢酶多肽。JP2007143405-A公开了来 自桔橙嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus)的过氧化氢酶 本专利技术提供了具有过氧化氢酶活性的多肽和编码所述多肽的多核苷酸。
技术实现思路
本专利技术涉及具有过氧化氢酶活性的分离的多肽,其选自下组: (a)多肽,其与SEQ ID N0:8的成熟多肽具有至少83%序列同一性,与SEQ ID N0:2 的成熟多肽具有至少76%序列同一性,与SEQ ID N0:4的成熟多肽具有至少60%序列同一 性,或与SEQ ID N0:6的成熟多肽具有至少60 %序列同一性; (b)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在低、中等、中等-高、高、或非常高严 格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID N0:7的成熟多肽编码序列,SEQ ID N0:1的成熟多肽编 码序列,SEQ ID N0:3的成熟多肽编码序列,或SEQ ID N0:5的成熟多肽编码序列,(ii)其 cDNA序列,或(iii) (i)或(ii)的全长互补物。 (c)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID N0:7的成熟多肽编码序列 具有至少83%序列同一性,与SEQ ID NO: 1的成熟多肽编码序列具有至少76%序列同一 性,与SEQ ID NO: 3的成熟多肽编码序列具有至少60%序列同一性,或与SEQ ID NO: 5的成 熟多肽编码序列具有至少60 %序列同一性;或为其cDNA序列; (d)SEQIDN0:8的成熟多肽的变体,SEQIDN0:2的成熟多肽的变体,SEQIDN0 :4 的成熟多肽的变体,或SEQ ID N0:6的成熟多肽的变体,其在一个或多个(例如几个)位置 包含取代、缺失和/或插入;和 (e) (a)、(b)、(c)或⑷的多肽的具有过氧化氢酶活性的片段。 本专利技术亦涉及分离的多肽,所述分离的多肽包含催化域,所述催化域选自下组: (a)催化域,其与SEQ ID N0:8的氨基酸20至740具有至少83%序列同一性;催 化域,其与SEQ ID N0:2的氨基酸17至723具有至少76%序列同一性;催化域,其与SEQ ID N0:4的氨基酸38至723具有至少60%序列同一性;或催化域,其与SEQ ID N0:6的氨 基酸38至711具有至少60 %序列同一性; (b)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在低、中等、中等-高、高、或非常高严 格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID N0:7的核苷酸58至2473, SEQ ID N0:1的核苷酸49至 2601,SEQIDN0:3的核苷酸112至 2687,或SEQIDN0:5的核苷酸112至 2652,(ii)其 cDNA序列,或(iii) (i)或(ii)的全长互补物; (c)催化域,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID N0:7的核苷酸58至2473 具有至少83%序列同一性;催化域,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO: 1的核 苷酸49至2601具有至少76%序列同一性;催化域,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与 SEQ ID N0:3的核苷酸112至2687具有至少60%序列同一性;或催化域,其由多核苷酸编 码,所述多核苷酸与SEQ ID N0:5的核苷酸112至2652具有至少60%序列同一性; (d)SEQ ID N0:8的氨基酸20至740的变体,SEQ ID N0:2的氨基酸17至723的 变体,SEQ ID N0:4的氨基酸38至723的变体,或SEQ ID N0:6的氨基酸38至711的变体, 其在一个或多个(例如几个)位置包含取代、缺失和/或插入;和 (e) (a)、(b)、(c)、或(d)的催化域的具有过氧化氢酶活性的变体。 本专利技术亦涉及编码本专利技术的多肽的分离的多核苷酸,包含所述多核苷酸的核酸构 建体、重组表达载体、和重组宿主细胞;和产生所述多肽的方法。 本专利技术亦涉及降解或转化纤维素材料的工艺(process),其包括:在本专利技术的具 有过氧化氢酶活性的多肽的存在下用酶组合物处理纤维素材料。在一个方面,所述工艺还 包括回收经降解或转化的纤维素材料。 本专利技术亦涉及产生发酵产物的工艺,其包括:(a)在本专利技术的具有过氧化氢酶活 性的多肽的存在下用酶组合物糖化纤维素材料;(b)用一种或多种(例如几种)发酵微生 物发酵经糖化的纤维素材料以产生发酵产物;和(c)从发酵回收该发酵产物。 本专利技术亦涉及发酵纤维素材料的工艺,其包括用一种或多种(例如几种)发酵微 生物发酵所述纤维素材料,其中所述纤维素材料在本专利技术具有过氧化氢酶活性的多肽的存 在下用酶组合物糖化。在一个方面,所述纤维素材料的发酵产生发酵产物。在另一个方面, 上述工艺进一步包括从发酵回收发酵产物。 本专利技术亦涉及编码信号肽的多核苷酸,所述信号肽包含或组成为(consist of) SEQ ID NO: 8的氨基酸1至19, SEQ ID NO: 2的氨基酸1至16, SEQ ID NO: 4的氨基酸1至 20,或SEQ ID N0:6的氨基酸1至24,其可操作地连接于编码蛋白的基因;包含所述多核苷 酸的核酸构建体、表达载体和重组宿主细胞;和产生蛋白的方法。 本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种具有过氧化氢酶活性的分离的多肽,其选自下组:(a)多肽,其与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少83%,例如至少84%,至少85%,至少86%,至少87%,至少88%,至少89%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;多肽,其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少76%,例如至少77%,至少78%,至少79%,至少80%,至少81%,至少82%,至少83%,至少84%,至少85%,至少86%,至少87%,至少88%,至少89%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;多肽,其与SEQ ID NO:4的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%,至少70%,至少75%,至少78%,至少80%,至少81%,至少82%,至少83%,至少84%,至少85%,至少86%,至少87%,至少88%,至少89%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;或多肽,其与SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%,至少70%,至少75%,至少78%,至少80%,至少81%,至少82%,至少83%,至少84%,至少85%,至少86%,至少87%,至少88%,至少89%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;(b)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在低严格条件,中等严格条件,中等‑高严格条件,高严格条件,或非常高严格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID NO:7的成熟多肽编码序列,SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列,或SEQ ID NO:5的成熟多肽编码序列,(ii)其cDNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补物;(c)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:7的成熟多肽编码序列具有至少83%,例如至少84%,至少85%,至少86%,至少87%,至少88%,至少89%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少76%,例如至少77%,至少78%,至少79%,至少80%,至少81%,至少82%,至少83%,至少84%,至少85%,至少86%,至少87%,至少88%,至少89%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列具有至少60%,例如至少65%,至少70%,至少75%,至少78%,至少80%,至少81%,至少82%,至少83%,至少84%,至少85%,至少86%,至少87%,至少88%,至少89%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;或多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:5或其cDNA序列的成熟多肽编码序列具有至少60%,例如至少65%,至少70%,至少75%,至少78%,至少80%,至少81%,至少82%,至少83%,至少84%,至少85%,至少86%,至少87%,至少88%,至少89%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;(d)SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体,SEQ ID NO:4的成熟多肽的变体,或SEQ ID NO:6的成熟多肽的变体,其在一个或多个(例如几个)位置包含取代、缺失和/或插入;和(e)(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的具有过氧化氢酶活性的片段。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘晔段俊欣张羽汤岚
申请(专利权)人:诺维信股份有限公司
类型:发明
国别省市:美国;US

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