一种金粟兰快速繁殖的方法技术

本发明专利技术涉及一种金粟兰的繁育方法，所述的方法包括：1)外植体的选取，2)外植体消毒，3)初始诱导培养，4)愈伤组织诱导，5)增殖培养，6)生根培养，7)炼苗和移栽。采用本方法繁育金粟兰，可以降低生产成本，提高繁殖速度和成活率。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种金粟兰的繁育方法，所述的方法包括：1)外植体的选取，2)外植体消毒，3)初始诱导培养，4)愈伤组织诱导，5)增殖培养，6)生根培养，7)炼苗和移栽。采用本方法繁育金粟兰，可以降低生产成本，提高繁殖速度和成活率。【专利说明】
本专利技术涉及植物快速繁殖
，尤其是金粟兰快速繁殖
。
技术介绍
金粟兰（Chloranthus spicatus)又名珠兰、鱼子兰、茶兰等，为金粟兰科植物，原 产我国南部，喜温暖、潮湿和通风的环境，多生于山坡、沟谷密林下。半灌木，直立或稍平卧， 高30-60厘米。金粟兰生性强健，容易栽培，用分株、扦插和压条繁殖皆可。金粟兰花和根 状茎可提取芳香油，鲜花极香，常用于熏茶叶。全株入药，治风湿疼痛、跌打损伤，根状茎捣 烂可治疗疮。 目前，金粟兰多采用分株、扦插和压条来进行生产栽培，这繁育技术提高品种的纯 度，保持了品种特性，但成活率较低及繁殖速度较慢，制约了金粟兰产业的发展。而组织培 养育苗技术既可以保持种的纯度和特性，也可以降低生产成本，提高繁殖速度和成活率。 现有技术中尚无经愈伤组织途径获得金粟兰再生植株的报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供，经愈伤组织途径 获得金粟兰丛生芽，诱导生根，可实现金粟兰组培苗的大量快速繁殖。 为了解决上述技术问题，本专利技术提出下列技术方案： -种金粟兰快速繁殖的方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤： 1)外植体的选取：取当年生直径2_5mm的金粟兰枝条为外植体，剪去叶片后剪成 l_2cm的莖段； 2)外植体消毒：将上述茎段放入盛有自来水的20-25KHZ超声波清洗中保持温度 30-35°C处理30-45min，然后以自来水冲洗10-20min ;随后在超净工作台上以70-75%的酒 精消毒25-35秒，0. 5%升汞溶液中处理6-8分钟，然后以无菌水冲洗4-5遍，置于无菌培养 皿备用； 3)初始诱导培养：将灭菌后外植体茎段各剪去2-3mm，茎段按末端向下插入初始 诱导培养基中培养，培养条件为光强2500-3500LX、光周期10-14h/d，温度25°C ±2°C ;培 养4-6d后将其中未污染的外植体茎段转接到新的初始诱导培养基中，并继续培养12-18d 至新芽长出；所述的初始诱导培养基组成为：WPM+6-BA0. 1-0. 2mg/L+NAA0. 01-0. 02mg/ L+PVP5-10mg/L ； 4)愈伤组织诱导：取初始诱导培养中的芽，放入愈伤组织诱导培养基中培养 15-20d，条件为暗培养，温度20°C ±2°C ;所述愈伤组织培养基为：WPM+6-BA0. 5-2.0mg/ L+NAA0. 02-0. 05mg/L+PVP5-10mg/L ； 5)分化和增殖培养：将透明无色的愈伤组织块放入分化培养基中培养20-25d，增 殖产生大量丛生苗，培养条件为光强1800-2500LX、光周期10-14h/d，温度25°C ±2°C ;所 述分化和增殖培养用培养基为：l/2MS+6-BA0. 1-0. 5mg/L+NAA0. 1-0. 5mg/L+PVP5-10mg/L ; 6)生根培养：将5)步骤中的丛生苗切割成单个，转移至生根培养基中培养15-20d 后生根，培养条件为光强1800-2500LX、光周期10-14h/d，温度25°C ±2°C ;所述生根用培 养基为：1/2MS+IBA0. 1-0. 5mg/L+PVP5-10mg/L ; 7)炼苗和移栽：将有生根的金粟兰幼苗的培养基瓶盖打开，室温下炼苗3-5d 后，取出幼苗，洗去根部培养基，移栽装有河沙基质的苗床上，保持温度20-25 °C，湿度 85% -95%，适当遮荫即可； 所述的WPM培养基配方为：大量元素：硝酸铵NH4N03400mg/L，硫酸钾K 2S04900mg/ L，磷酸二氢钾 KH2P03170mg/L，硫酸镁 MgS04 · 7H20370mg/L ;钙盐：氯化钙 CaCl2 · 2H2096mg/ L ;四水合硝酸钙Ca(N03)2 · 4H20556mg/L ;微量元素：硼酸Η3Β036· 2mg/L，硫酸锰 MnS04 · 4Η2022· 5mg/L，硫酸锌 ZnS04 · 7Η208· 6mg/L，钥酸钠 Na2Mo04 · 2Η200· 25mg/L， 硫酸铜CuS04 · 5Η200· 25mg/L ;铁盐：乙二胺四乙酸二钠 Na2-EDTA37. 3mg/L，硫酸亚铁 FeS04 · 7Η2027· 8mg/L ;有机酸：肌醇100mg/L，甘氨酸2mg/L，盐酸硫胺素 lmg/L，盐酸批口多 醇 0· 5mg/L，烟酸 0· 5mg/L ; 所述的MS培养基配方为：大量元素：硝酸钾KN031900mg/L，硝酸铵NH 4N031650mg/ L，磷酸二氢钾 KH2P03170mg/L，硫酸镁MgS04 ·7Η20370π^/1 ;钙盐：氯化钙 CaCl2 ·2Η20440π^/ L ;微量元素：碘化钾 ΚΙ(λ 83mg/L，硼酸 Η3Β036· 2mg/L，硫酸锰 MnS04 · 4Η2022· 3mg/L，硫酸 锌 ZnS04 · 7Η208· 6mg/L，钥酸钠 Na2Mo04 · 2Η200· 25mg/L，硫酸铜 CuS04 · 5Η200· 025mg/L， 氯化钴CoCl2 · 6H200. 025mg/L ;铁盐：乙二胺四乙酸二钠 Na2-EDTA37. 25mg/L，硫酸亚铁 FeS04 · 7Η2027· 85mg/L ;有机酸：肌醇100mg/L，甘氨酸2mg/L，盐酸硫胺素0· 5mg/L，盐酸吡 哆醇 0· 5mg/L，烟酸 0· 5mg/L ;蔗糖 30g/L，琼脂粉 7g/L，pH 为 5. 7 ; 所述的1/2MS培养基配方为：大量元素：硝酸钾KN039 50mg/L，硝酸铵NH4N038 2 5mg/ L，磷酸二氢钾KH2P0385mg/L，硫酸镁MgS04 · 7H20185mg/L ;余同上述MS培养基； 所述的6-BA为6-苄氨基嘌呤； 所述的NAA为α -萘乙酸； 所述的ΙΒΑ为吲哚-3- 丁酸； 所述的PVP为聚乙烯吡咯烷酮。 优选的，步骤3)中初始诱导培养基组成为：WPM+6-BA0. 15mg/L+NAA0. 015mg/ L+PVP6mg/L〇 优选的，步骤 4)中愈伤组织培养基为：WPM+6-BAl. Omg/L+NAAO. 04mg/L+PVP8mg/ L〇 优选的，步骤5)中分化和增殖培养用培养基为：l/2MS+6-BA0. 3mg/L+NAA0. 3mg/ L+PVP8mg/L〇 优选的，步骤6)中生根用培养基为：1/2MS+IBA0. 3mg/L+PVP8mg/L。 采用本专利技术繁殖金粟兰，可实现金粟兰组培苗的大量快速繁殖，为金粟兰生产栽 培和品种改良奠定基础。 为了更好的阐述技术方案，下面结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步的说明，但 本专利技术所要求的保护范围不限于下列实施例。 【具体实施方式】本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金粟兰快速繁殖的方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤：1)外植体的选取：取当年生直径2‑5mm的金粟兰枝条为外植体，剪去叶片后剪成1‑2cm的茎段；2)外植体消毒：将上述茎段放入盛有自来水的20‑25KHz超声波清洗机中保持温度30‑35℃处理30‑45min，然后以自来水冲洗10‑20min；随后在超净工作台上以70‑75％的酒精消毒25‑35秒，0.5％升汞溶液中处理6‑8分钟，然后以无菌水冲洗4‑5遍，置于无菌培养皿备用；3)初始诱导培养：将灭菌后外植体茎段各剪去2‑3mm，茎段按末端向下插入初始诱导培养基中培养，培养条件为光强2500‑3500Lx、光周期10‑14h/d,温度25℃±2℃；培养4‑6d后将其中未污染的外植体茎段转接到新的初始诱导培养基中，并继续培养12‑18d至新芽长出；所述的初始诱导培养基组成为：WPM+6‑BA0.1‑0.2mg/L+NAA0.01‑0.02mg/L+PVP5‑10mg/L；4)愈伤组织诱导：取初始诱导培养中的芽，放入愈伤组织诱导培养基中培养15‑20d，条件为暗培养，温度20℃±2℃；所述愈伤组织培养基为：WPM+6‑BA0.5‑2.0mg/L+NAA0.02‑0.05mg/L+PVP5‑10mg/L；5)分化和增殖培养：将透明无色的愈伤组织块放入分化培养基中培养20‑25d，增殖产生大量丛生苗，培养条件为光强1800‑2500Lx、光周期10‑14h/d,温度25℃±2℃；所述分化和增殖培养用培养基为：1/2MS+6‑BA0.1‑0.5mg/L+NAA0.1‑0.5mg/L+PVP5‑10mg/L；6)生根培养：将5)步骤中的丛生苗切割成单个，转移至生根培养基中培养15‑20d后生根，培养条件为光强1800‑2500Lx、光周期10‑14h/d,温度25℃±2℃；所述生根用培养基为：1/2MS+IBA0.1‑0.5mg/L+PVP5‑10mg/L；7)炼苗和移栽：将有生根的金粟兰幼苗的培养基瓶盖打开，室温下炼苗3‑5d后，取出幼苗，洗去根部培养基，移栽装有河沙基质的苗床上，保持温度20‑25℃，湿度85％‑95％，适当遮荫即可；所述的WPM培养基配方为：大量元素：硝酸铵NH4NO3400mg/L，硫酸钾K2SO4900mg/L，磷酸二氢钾KH2PO3170mg/L，硫酸镁MgSO4·7H2O370mg/L；钙盐：氯化钙CaCl2·2H2O96mg/L；四水合硝酸钙Ca(NO3)2·4H2O556mg/L；微量元素：硼酸H3BO36.2mg/L，硫酸锰MnSO4·4H2O22.5mg/L，硫酸锌ZnSO4·7H2O8.6mg/L，钼酸钠Na2MoO4·2H2O0.25mg/L，硫酸铜CuSO4·5H2O0.25mg/L；铁盐：乙二胺四乙酸二钠Na2‑EDTA37.3mg/L，硫酸亚铁FeSO4·7H2O27.8mg/L；有机酸：肌醇100mg/L，甘氨酸2mg/L，盐酸硫胺素1mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，烟酸0.5mg/L；所述的MS培养基配方为：大量元素：硝酸钾KNO31900mg/L，硝酸铵NH4NO31650mg/L，磷酸二氢钾KH2PO3170mg/L，硫酸镁MgSO4·7H2O370mg/L；钙盐：氯化钙CaCl2·2H2O440mg/L；微量元素：碘化钾KI0.83mg/L，硼酸H3BO36.2mg/L，硫酸锰MnSO4·4H2O22.3mg/L，硫酸锌ZnSO4·7H2O8.6mg/L，钼酸钠Na2MoO4·2H2O0.25mg/L，硫酸铜CuSO4·5H2O0.025mg/L，氯化钴CoCl2·6H2O0.025mg/L；铁盐：乙二胺四乙酸二钠Na2‑EDTA37.25mg/L,硫酸亚铁FeSO4·7H2O27.85mg/L；有机酸：肌醇100mg/L，甘氨酸2mg/L，盐酸硫胺素0.5mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，烟酸0.5mg/L；蔗糖30g/L，琼脂粉7g/L，pH为5.7；所述的1/2MS培养基配方为：大量元素：硝酸钾KNO3950mg/L，硝酸铵NH4NO3825mg/L，磷酸二氢钾KH2PO385mg/L，硫酸镁MgSO4·7H2O185mg/L；余同上述MS培养基；所述的6‑BA为6‑苄氨基嘌呤；所述的NAA为α‑萘乙酸；所述的IBA为吲哚‑3‑丁酸；所述的PVP为聚乙烯吡咯烷酮。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：戴勤，王冬梅，李慧珍，
申请(专利权)人：芜湖欧标农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34