本发明专利技术公开了属于生物防治领域的一种用于防治韭菜迟眼蕈蚊的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株JQ23，该菌株已于2014年6月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9375。本发明专利技术还公开了一种含有JQ23的微生物杀虫剂及其制备方法。本发明专利技术苏云金芽孢杆菌JQ23对韭菜迟眼蕈蚊幼虫具有很高的毒力，为韭菜迟眼蕈蚊的防治提供了一种有效的方法；其次，本发明专利技术苏云金芽孢杆菌属于天然产物，对人畜无毒，对环境无污染；此外，本发明专利技术微生物杀虫剂制备方法简单，使用方便。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了属于生物防治领域的一种用于防治韭菜迟眼蕈蚊的苏云金芽孢杆菌(Bacillus?thuringiensis)菌株JQ23，该菌株已于2014年6月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC?No.9375。本专利技术还公开了一种含有JQ23的微生物杀虫剂及其制备方法。本专利技术苏云金芽孢杆菌JQ23对韭菜迟眼蕈蚊幼虫具有很高的毒力，为韭菜迟眼蕈蚊的防治提供了一种有效的方法；其次，本专利技术苏云金芽孢杆菌属于天然产物，对人畜无毒，对环境无污染；此外，本专利技术微生物杀虫剂制备方法简单，使用方便。【专利说明】一种用于防治韭菜迟眼蕈蚊的苏云金芽孢杆菌及其应用
本专利技术属于生物防治领域，具体涉及一种用于防治韭菜迟眼蕈蚊的苏云金芽孢杆 菌，以及该苏云金芽孢杆菌在蔬菜害虫防治中的应用。
技术介绍
韭菜迟眼蕈蚊（Bradysia odoriphaga)又名韭蛆、黄脚蕈蚊，属双翅目，眼蕈蚊科， 主要危害韭菜、大葱、洋葱、小葱、大蒜等百合科蔬菜，偶尔也危害莴苣、青菜、芹菜等，是葱 蒜类蔬菜的主要害虫之一，在全国各地均有分布。韭菜迟眼蕈蚊的幼虫生活在土壤表层，群 集在韭菜地下部的鳞茎和柔嫩的茎部蛀食为害。初孵幼虫先为害韭菜叶鞘基部和鳞茎的上 端；春、秋季主要为害嫩茎，导致根茎腐烂。受害韭菜地上部分生长细弱，叶片发黄萎蔫下 垂，最后韭叶枯黄死亡。夏季气温高时，幼虫向下移动，为害韭菜鳞茎，致使整个鳞茎腐烂， 严重时整墩韭菜枯死。对于韭菜迟眼蕈蚊的防治方法主要有物理防治（糖醋液、臭氧等） 和化学防治。由于物理防治方法存在操作繁琐、防治效果受环境影响大等缺点，生产上主要 采用农药灌根等化学手段进行防治，但是由于韭蛆繁殖快、隐蔽性强、防治难度大，导致菜 农不规范或过量、甚至违规使用禁用的高毒农药进行防治，导致农药残留超标、污染环境、 危害人类健康以及杀害有益鸟类等问题，另一方面，长期大量使用化学农药增强害虫抗药 性、污染环境、杀伤鸟类、造成害虫再度猖獗的恶性循环，不能达到对害虫种群的有效控制， 同时造成韭菜农残超标，使消费者健康受到威胁。近年来毒韭菜事件频发，如：2004年4月 "香河毒韭菜进京事件"、2010年4月"青岛毒韭菜"和2011年3月河南南阳"毒韭菜事件"， 连续的毒韭菜曝光事件，使得消费者"谈韭色变"，严重影响了菜农的经济利益和消费者的 食品安全。 生物防治由于具有专一性强、对人畜无毒害、不存在产生抗药性以及环境污染等 问题，日益受到人们的青睐。为了减少化学农药对环境的污染及对人民健康的威胁，筛 选对韭蛆有高致病性的生防微生物是防治韭蛆的有效方法和重要措施。苏云金芽孢杆 菌（Bacillus thuringiensis，简称Bt)是一种从土壤或死亡昆虫体内分离出来的革兰 氏阳性细菌，此类菌在芽孢形成时期能产生一种或多种对鳞翅目、鞘翅目、双翅目、同翅 目、膜翅目、直翅目、等翅目、毛翅目或缨翅目等多种害虫具有杀虫活性的伴孢晶体蛋白 (Insecticidal Crystal Proteins,简称ICPs)。这种杀虫晶体蛋白对目标害虫高效专一、 对人畜无害、不污染环境，因而苏云金芽孢杆菌在害虫的生物防治中得到了广泛的应用。 利用苏云金芽孢杆菌防治韭蛆的研究相对较少，如苏云金芽孢杆菌防治韭蛆的效 果可达75%左右（成学美等.植保技术与推广。1998年04期）或84.85% (解维星.2006， 华中农业大学硕士论文）。 从上述可知，利用苏云金芽孢杆菌防治韭菜迟眼蕈蚊具有良好应用前景。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种用于防治韭菜迟眼蕈蚊的苏云金芽孢杆菌。该菌株对双 翅目眼蕈蚊科害虫韭菜迟眼蕈蚊具有高毒杀能力。 本专利技术另一目的在于提供一种微生物杀虫剂。 本专利技术第三目的在于提供上述微生物杀虫剂的制备方法。 本专利技术第四目的在于提供上述苏云金芽孢杆菌的用途。 实现本专利技术的技术方案如下： 本专利技术一种苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis)菌株JQ23,该菌株已于 2014年6月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京 市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No. 9375。 -种微生物杀虫剂，含有上述苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis)菌株 JQ23。 上述微生物杀虫剂，其剂型为液体剂型。 上述微生物杀虫剂，其所述的液体剂型中含有上述苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis)菌株 JQ23 的芽孢浓度为 107 ?108cfu/ml。 上述微生物杀虫剂的制备方法，包括如下步骤： (1)、菌种活化：将保存的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis)菌株JQ23 在LB平板培养基上、在29?31°C下活化12?16h ;挑取单菌落在LB斜面培养基上、在 29?31°C下培养3?5天，得活化的菌株； (2)、种子液制备：用无菌接种环刮取一小环步骤（1)中活化的菌株接种到LB液体 培养基50ml中，在29?31°C、转速为200?220rpm/min条件下培养10?14h，得种子液； (3)、发酵培养：按照体积比为1?2%的比例将步骤（2)所得的种子液接入到黄 豆饼淀粉粉培养基中，在29?31°C、转速为200?220rpm/min条件下培养48?60h，得到 发酵液； (4)、用水稀释步骤（3)所得的发酵液，调节pH值至6. 6?6. 8,添加0.02?0· 1% 的苯甲酸钠，即得微生物杀虫剂；或者将步骤（3)所得的发酵液在4°C、转速为5000rpm/ min条件下离心30min，取沉淀，得沉淀物，再用水稀释沉淀物，调节pH值至6. 6?6. 8,添加 0. 02 %?0. 1 %的苯甲酸钠，即得微生物杀虫剂。 上述制备方法步骤（1)中所述的LB平板培养基或LB斜面培养基为本领域技术人 员所熟知的常用培养基，其组成成分及其重量比例为：胰蛋白胨l〇g，酵母提取物5g，氯化 钠 l〇g，琼脂粉 15g，水 1L，ρΗ7· 2。 上述制备方法步骤（2)中所述的LB液体培养基为本领域技术人员熟知的常用培 养基，其组成成分及其重量比例为：胰蛋白胨l〇g，酵母提取物5g，氯化钠10g，水lL，pH7. 2。 上述制备方法步骤（3)中所述的黄豆饼粉培养基的组成成分及其重量百分 比为：黄豆饼粉2. 5 %、棉籽饼粉1.2 %、玉米淀粉1.5 %、酵母粉0.5 %、ΚΗ2Ρ040 . 03%、 MgS040 . 05%，水 1L。 上述苏云金芽孢杆菌JQ23在防治蔬菜害虫上的应用。 所述的蔬菜害虫是指双翅目眼蕈蚊科害虫。 所述的眼蕈蚊科害虫是指亜菜迟眼蕈蚊（Bradysia odoriphaga)。 本专利技术菌株JQ23采集筛选的过程及其分类鉴定： (一）采集筛选的过程及形态分类鉴定： 本专利技术菌株JQ23是河北省农林科学院植物保护研究所将2013年4月在河南省 采集的土样中分离到的菌株接种在LB固体培养基（胰蛋白胨10本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株JQ23，该菌株已于2014年6月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9375。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杜立新，宋健，曹伟平，冯书亮，王金耀，
申请(专利权)人：河北省农林科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：河北;13
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