一种适用于工业生产的罗汉果提取物的制备方法，包括以下步骤：（1）将罗汉果鲜果洗净，破碎；（2）加入亲水溶剂，加热，回流提取，过滤，得提取液；（3）将提取液加热，真空浓缩，冷却，静置，过滤，得浓缩液；（4）将浓缩液进行管式离心，超滤，得滤液；（5）将滤液使用≥3根大孔树脂层析柱串联上柱吸附，静置，水洗，再分别使用亲水溶剂洗脱并分别收集洗脱液；（6）将洗脱液分别使用纳滤膜进行纳滤处理，然后浓缩至百利度约25～30为止，得浓缩液；（7）将浓缩液进行喷雾干燥，即得产品。利用本发明专利技术方法可实现一次性生产多种规格罗汉果甜苷V提取物产品，高效率地利用树脂，减少能耗，保证产品质量，降低成本，适用于工业生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种罗汉果提取物的制备方法，具体涉及一种适用于工业生产的罗汉 果提取物的制备方法。
技术介绍
罗汉果，拉丁名Corvenor Momordica fruit,别名拉汗果、假苦瓜，为葫芦目葫芦 属植物，分布在中国南方的广西、广东、湖南等省，主产桂林市临桂县和永福县的山区。罗汉 果中含有苷类、多糖类、黄酮类、蛋白质与氨基酸以及维生素 C与矿质元素等物质。罗汉果 作为一种药食同源植物，可入药，也可食用，其干果常用作中药，具有良好的清热解暑、润肺 止咳的功效；另外，罗汉果可作为食品添加剂，应用各甜品糕点与饮料中。研究表明，罗汉果 中的主要甜味物质为葫芦烷类物质，其中最主要的甜味成分为甜苷V，其甜度约为蔗糖甜度 的250倍，作为一种天然的甜味物质，甜苷V相对其他甜味物质具有低热量、口感好等优势， 其逐步被广大消费者认可，市场一片广大，具有良好的开发价值。 由于罗汉果为我国特有的植物品种，具有明显地域优势，关于罗汉果提取物制 备的研究主要集中在国内，相关专利文献报道较多，但真正能够应用于生产的较少，主 要体现在以下几个方面：（1)过程繁琐，收率低下；（2)使用大量有机溶剂，对设备要求 高，投入大；（3)工艺过程能耗大，成本高；（4)工序中引入其他物质，影响产品质量。如 CN101029071B公开了从罗汉果中制备高纯度罗汉果苷V的方法，该方法是将罗汉果干果 进行醇提、浓缩、经乙酸乙酯、正丁醇萃取，然后使用硅胶柱、C18反相硅胶柱层析、干燥后 得高纯度甜苷V产品，该方法主要缺陷为工艺繁琐、溶剂损耗大、收率低，不利于规模化工 业生产；CN100572552C公开了罗汉果苷V彡40%的罗汉果提取物及其制备方法，该方法是 将罗汉果鲜果水提、浓缩、酶解、大孔树脂吸附、离子交换树脂脱色，最后经浓缩干燥得产 品，该方法由于在上柱前未进行过滤，导致树脂的后续处理成本较大，不利于连续化生产； CN101407535B公开了一种高纯度罗汉果甜甙V的制备方法，该方法是使用一定纯度的罗 汉果提取物为原料，经甲醇溶解、丙酮萃取、正相硅胶吸附、分离、结晶与重结晶获得最终产 品，该方法工艺简单，但过程中使用了大量的有机溶剂，对生产场所的要求较高，此外获得 的产品也有一定的有机溶剂残留，影响品质；CN101863946B公开了一种干罗汉果提取高含 量罗汉果甜甙V的方法，该方法是将罗汉果干果破碎后，经醇提、浓缩、离心、大孔树脂吸附 分离、离子交换树脂脱色、最后经浓缩、干燥，得成品，此方法由于未经过滤处理，使得上柱 液中大分子杂质较多，影响树脂的吸附性能，利用率低且后续处理难度相对较大，产品成本 较闻。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种适用于工业生产的罗汉果提取物的制备 方法，该方法可实现高效率的利用树脂、降低能耗、提高产品收率，最终制备出具有竞争成 本的不同规格的罗汉果提取物产品。 本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种适用于工业生产的罗汉果提取 物的制备方法，包括以下步骤： (1) 原料前处理：将罗汉果鲜果洗净，适当破碎，以不打碎罗汉果果籽为度； (2) 提取：向破碎后的罗汉果中加入亲水溶剂，加热至80?90°C，回流提取3?4次， 每次提取1. 〇?1. 5h，将每次回流所得溶液合并，过滤，得提取液； (3) 浓缩：将步骤（2)中所得提取液，浓缩至原体积的1/3?5/9,冷却至15?25°C，静 置后过滤，得浓缩液； (4) 离心、超滤：将步骤（3)中所得浓缩液进行离心，离心后进行超滤，得滤液； (5) 大孔树脂多级吸附与分离：使用> 3根大孔树脂层析柱以串联的方式对步骤（4)中 所得滤液进行上柱吸附，上柱流速为〇. 5?1. 0 BV/h，上柱完成后静置2?3h ;用相当于总 树脂彡2倍体积的去离子水在50?60°C下进行洗脱，洗脱流速为1. 0?2. 0 BV/h，然后分 别用亲水溶剂对> 3根大孔树脂层析柱分别进行洗脱并分别收集亲水溶剂洗脱液，得> 3 份亲水溶剂洗脱液； (6) 纳滤、浓缩：将步骤（5)中所得> 3份亲水溶剂洗脱液分别使用纳滤膜进行纳滤处 理，然后分别进行真空浓缩至百利度25?30为止，得> 3份浓缩液； (7) 干燥：将步骤（6)中所得的> 3份浓缩液分别进行干燥后，即得> 3种规格含罗汉 果甜苷V的产品。 进一步，步骤（2)中，加入的亲水溶剂为体积分数40?70%的乙醇；回流提取时每 次加入的亲水溶剂的量为破碎罗汉果重量的5倍。 进一步，步骤（3)中，所述浓缩的温度为70?80 °C，浓缩时真空压力 为-〇· 06 ?-〇· 04 Mpa。 进一步，步骤（4)中，所述离心方式为管式离心，离心速率为10000?20000 r/ min ;所述超滤所采用的膜材料为聚碳酸酯、聚砜或聚丙烯酸，截留分子量为30k?lOOkDa， 操作压力为〇· 1?〇· 5 Mpa。 进一步，步骤（5)中，所述大孔树脂可以是D-101、AB-8或HPD-300,层析柱的径高 比为1:4。其中，D-10UAB-8生产厂家为上海南开树脂有限公司，HPD-300生产厂家为山东 鲁抗立科药业有限公司。 进一步，步骤（5)中，所述大孔树脂层析柱为4根，上柱的方式为上柱液先上第1 根层析柱，待第1根层析柱开始泄漏时，第1根上柱流出液作为第2根层析柱的上柱液，待 第2根层析柱开始泄漏时，第2根上柱流出液作为第3根层析柱上柱液，待第3根层析柱开 始泄漏时，接入第4根层析柱，停止上柱，整个上柱过程完成。上柱完毕后静置，去离子水洗 脱，去离子水洗脱液不收集，此步骤洗脱的目的是去除极性较大的大分子物质等杂质；此上 柱方式利于树脂的利用与目标洗脱液的纯度提高，第1根树脂未泄漏之前的上柱流出液直 接排掉，可以减少大量的水溶性杂质流入第2根层析柱，倘若直接通入第2根层析柱，由于 流出液中杂质较多，很大一部分将被层析柱2吸附，将影响层析柱2的对活性成分的吸附， 另外，用亲水溶剂洗脱的时候被吸附的杂质也有部分被洗脱，以此类推，因此，相对于普通 上柱的方式，此上柱方式每根柱子的杂质成分逐渐减小，导致洗脱液中活性成分的纯度逐 渐提高。其中，亲水溶剂洗脱液为目标洗脱液，可洗脱目标成分甜苷V ;泄露是指使用液相 色谱及时检测流出液中的甜苷V，当检测到甜苷V>0. 01mg/mL时，即判断为泄露点，接入下 一级层析柱。 进一步，步骤（5)中，所述亲水溶剂为体积分数60?80%的乙醇，亲水溶剂的用量 为 2. 0 ?3. 0 BV。 进一步，步骤（6)中，所述纳滤膜材质可以是醋酸纤维素、三醋酸纤维素或芳族聚 酰胺，截留分子量为300?600 Da，操作压力为1. 0?1. 5 Mpa。 进一步，步骤（6)中，所述真空浓缩的温度为60?80 °C，真空压力 为-〇·08 ?-〇· 04 Mpa。 进一步，步骤（7)中，所述干燥方式为喷雾干燥。 按照本专利技术方法所得到的罗汉果提取物的四种不同规格的产品，经高效液相色谱 法检测，其甜苷V含量分别为15%?17%、24%?27%、35%?37%、50%?53%，罗汉本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种适用于工业生产的罗汉果提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）原料前处理：将罗汉果鲜果洗净，适当破碎，以不打碎罗汉果果籽为度；（2）提取：向破碎后的罗汉果中加入亲水溶剂，加热至80～90℃，回流提取3～4次，每次提取1.0～1.5h，将每次回流所得溶液合并，过滤，得提取液；（3）浓缩：将步骤（2）中所得提取液，浓缩至原体积的1/3～5/9，冷却至15～25℃，静置后过滤，得浓缩液；（4）离心、超滤：将步骤（3）中所得浓缩液进行离心，离心后进行超滤，得滤液；（5）大孔树脂多级吸附与分离：使用≥3根大孔树脂层析柱以串联的方式对步骤（4）中所得滤液进行上柱吸附，上柱流速为0.5～1.0 BV/h，上柱完成后静置2～3h；用相当于总树脂≥2倍体积的去离子水在50～60℃下进行洗脱，洗脱流速为1.0～2.0 BV/h，然后分别用亲水溶剂对≥3根大孔树脂层析柱分别进行洗脱并分别收集亲水溶剂洗脱液，得≥3份亲水溶剂洗脱液；（6）纳滤、浓缩：将步骤（5）中所得≥3份亲水溶剂洗脱液分别使用纳滤膜进行纳滤处理，然后分别进行真空浓缩至百利度25～30为止，得≥3份浓缩液；（7）干燥：将步骤（6）中所得的≥3份浓缩液分别进行干燥后，即得≥3种规格含罗汉果甜苷V的产品。...
【技术特征摘要】
1. 一种适用于工业生产的罗汉果提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤： (1) 原料前处理：将罗汉果鲜果洗净，适当破碎，以不打碎罗汉果果籽为度； (2) 提取：向破碎后的罗汉果中加入亲水溶剂，加热至80?90°C，回流提取3?4次， 每次提取1. 〇?1. 5h，将每次回流所得溶液合并，过滤，得提取液； (3) 浓缩：将步骤（2)中所得提取液，浓缩至原体积的1/3?5/9,冷却至15?25°C，静 置后过滤，得浓缩液； (4) 离心、超滤：将步骤（3)中所得浓缩液进行离心，离心后进行超滤，得滤液； (5) 大孔树脂多级吸附与分离：使用> 3根大孔树脂层析柱以串联的方式对步骤（4)中 所得滤液进行上柱吸附，上柱流速为〇. 5?1. 0 BV/h，上柱完成后静置2?3h ;用相当于总 树脂彡2倍体积的去离子水在50?60°C下进行洗脱，洗脱流速为1. 0?2. 0 BV/h，然后分 别用亲水溶剂对> 3根大孔树脂层析柱分别进行洗脱并分别收集亲水溶剂洗脱液，得> 3 份亲水溶剂洗脱液； (6) 纳滤、浓缩：将步骤（5)中所得> 3份亲水溶剂洗脱液分别使用纳滤膜进行纳滤处 理，然后分别进行真空浓缩至百利度25?30为止，得> 3份浓缩液； (7) 干燥：将步骤（6)中所得的> 3份浓缩液分别进行干燥后，即得> 3种规格含罗汉 果甜苷V的产品。2. 根据权利要求1所述一种适用于工业生产的罗汉果提取物的制备方法，其特征在 于：步骤（2)中，加入的亲水溶剂为体积分数40?70%的乙醇；回流提取时每次加入的亲水 溶剂的量为破碎罗汉果重量的5倍。3. 根据权利要求1或2所述一种适用于工业生产的罗汉果提取物的制备方法，其特征 在于：步骤（3)中，所述浓缩的温度为70?80°C，浓缩时真空压力为-0· 06?-0· 04 Mpa。4...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐方华，
申请(专利权)人：湖南华诚生物资源有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43
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