本实用新型专利技术公开了一种A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，旨在提供一种检测方法简单、快速，灵敏度高，检测结果可靠的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡；该检测试剂卡包括带盒盖的盒体(6)，盒体(6)内设有检测试纸，所述的盒体(6)的盒盖(61)上设有加样孔(71)和结果观察窗口(72)；所述的检测试纸包括底板(1)，底板(1)上依次衔接有样品垫(2)、抗A族链球菌抗体量子点标记垫(3)、包被膜(4)和吸水垫(5)，所述的包被膜(4)上设有一条A族链球菌抗体检测区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线，两条线平行排列；属于荧光免疫检测领域。
【技术实现步骤摘要】
A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡
[〇〇〇1] 本技术公开了一种检测试剂卡，具体地说，是一种测定咽部拭子中A族链球 菌的检测试剂卡，本技术还公开了该检测试剂卡的制备方法，属于荧光免疫检测领域。
技术介绍
小儿上呼吸道感染的常见病原体之一，在呼吸道感染患儿中A族链球菌阳性率约 为23. 2%。如不及时接受抗感染治疗，包括急性咽炎、脓胞病、中毒性休克综合征、侵袭性筋 膜炎、猩红热、肺炎、丹毒和A族链球菌感染后引起的变态反应性疾病，如急性风湿热、风湿 性心脏病、急性肾小球肾炎。目前普遍的A族链球菌鉴定方法主要有临床经验甄别、细菌培 养法。 根据临床经验诊断A族链球菌的准确率偏低，据资料统计，即使经验丰富的医生 诊断的准确率也只有45% -75%。细菌培养法是A族链球菌诊断的金标准，该方法是将 采取的咽拭子接种于血琼脂平板上孵育24?48h，10% C02或厌氧条件下可增加 A族链球 菌的分离率，最终采取血清学方法鉴别A族链球菌与其他β溶血性链球菌，特别是C族和 G族，但是需要的时间较长。
技术实现思路
针对上述不足，本技术的目的在于提供一种操作简单，诊断迅速，检测结果可 靠的Α族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡。 为解决上述技术问题，本技术提供的技术方案是这样的：该A族链球菌量子 点免疫层析检测试剂卡，包括带盒盖的盒体，盒体内设有检测试纸，所述的盒体的盒盖上设 有加样孔和结果观察窗口；所述的检测试纸包括底板，底板上依次衔接有样品垫、抗A族链 球菌抗体量子点标记垫、包被膜和吸水垫，所述的包被膜上设有一条A族链球菌抗体检测 区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线，两条线平行排列。 上述的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，所述的包被膜两端分别与吸水垫 和抗A族链球菌抗体量子点标记垫相互交叠连接，在抗A族链球菌抗体量子点标记垫上压 贴有样品垫。 进一步的，上述的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，所述的样品垫为玻璃 纤维样品垫。 进一步的，上述的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，所述的包被膜为硝酸 纤维素膜。 进一步的，上述的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，所述的抗A族链球菌抗 体量子点标记垫为包被量子点标记A族链球菌抗体聚酯纤维素膜。[〇〇1〇] 更进一步的，上述的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，样品垫压在抗A族链 球菌抗体量子点标记垫的1/3?1/4处，抗A族链球菌抗体量子点标记垫压在包被膜的1_ 处，吸水垫压在包被膜1?2. 5_处，A族链球菌抗体检测区T线距离包被膜左端10_，羊 抗兔多克隆抗体质控区C线距离包被膜右端10mm，C、T线间距4?7mm。 与现有技术相比，本技术所提供的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡具 有如下优点： 本技术提供的技术方案，利用两种抗体的特异结合反应，形成特异的三明 治结构，即抗体-抗原-抗体免疫复合物，结合免疫层析技术，应用荧光免疫层析法检 测A族链球菌抗原，并与手持式紫外灯相配合，大幅度提高A族链球菌的检出率。 本方法操作简单，诊断迅速，特异性强，灵敏度高，易储存，无须专门的计时操作人 员，配合简单的仪器设备，即可得出结果。这样有利于医护人员抓住最佳治疗时间，避免抗 生素的滥用，同时降低A族链球菌变态反应的几率。 【附图说明】 图1是本技术提供的检测试剂卡结构示意图； 图2是本技术提供的检测试剂卡的盒盖俯视图； 图3是本技术提供的检测试纸结构示意图；[〇〇17] 图4是本技术提供的检测试纸俯视图； 图5是本技术提供的检测卡判定结果为阴性时示意图；[〇〇19] 图6是本技术提供的检测卡判定结果为阳性时示意图。 其中：底板1，样品垫2,抗A族链球菌抗体量子点标记垫3,包被膜4,吸水垫5, A 族链球菌抗体检测区T线，羊抗兔多克隆抗体质控区C线，盒体6,盒盖61，加样孔71，结果 观察窗口 72。 【具体实施方式】 下面结合具体实施例的方式对本技术的权利要求做进一步的详细说明，但并 不构成对本技术的任何限制，任何人在本技术权利要求范围内所做的有限次的修 改，仍在本技术的权利要求范围之内。 实施例1 本技术提供的一种A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，参阅图1至图4， 所述的检测试剂卡包括带盒盖61的盒体6,为了方便加样和观察检测结果，所述的盒盖61 上设有加样孔71和结果观察窗口 72。 盒体6内设有检测试纸，所述的检测试纸包括底板1，所述的底板1为PVC板，在底 板1上依次衔接有样品垫2、抗A族链球菌抗体量子点标记垫3、包被膜4和吸水垫5,在包 被膜4上设有一条A族链球菌抗体检测区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线，两条 线平行排列。为了达到快速、准确的检测结果，所述的样品垫2优选玻璃纤维样品垫；所述 的包被膜4优选硝酸纤维素膜；所述的抗A族链球菌抗体量子点标记垫3为包被量子点标 记A族链球菌抗体聚酯纤维素膜。 更具体的说，所述的包被膜4压贴在底板1中间部位，包被膜4的两端分别与吸水 垫5和抗A族链球菌抗体量子点标记垫3相互交叠连接，在抗A族链球菌抗体量子点标记 垫3上压贴有样品垫2。 样品垫2压在抗A族链球菌抗体量子点标记垫3的1/3?1/4左右，抗A族链球 菌抗体量子点标记垫3压在包被膜4的1mm处，A族链球菌抗体检测区T线距离包被膜4左 端10mm，羊抗兔多克隆抗体质控区C线距离包被膜4右端10mm，C、T线间距4?7mm(优选 5mm)，吸水垫压在包被膜4的1?2. 5mm (优选2mm)处。 该A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡的制备方法： 1)样品垫的制备方法是：将样品垫用含0· 5?5wt% BSA、0. 5?5wt%聚乙烯吡 咯烧酮、〇· 5?5wt%聚乙二醇、0· 1?5wt%吐温-20、1?5wt%曲拉通-100的0· 01M憐酸 盐缓冲液（〇. 01M磷酸氢二钠：0. 01M磷酸二氢钠=81:19(V :V)) (pH7. 4)浸泡完全后，37°C 烘干或在相对湿度< 35%的环境下干燥。 缓冲液优选为0. 01M磷酸盐缓冲液中0. 5wt % BSA、0. 5wt %聚乙烯吡咯烷酮、 0· 5wt%聚乙二醇、0· 25wt%吐温-20、lwt% 曲拉通-100。 2)抗A族链球菌抗体量子点标记垫的制备方法是： ①用10mM pH8. 4的硼酸缓冲液（2. 5mM硼砂：10mM硼酸=4. 5:5. 5(V:V))将水溶 性羧基量子点8 μ Μ的QD525稀释至1 μ M。 ②取lmLlyM的量子点，加入30μ L10mg/mL的1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳 二亚胺盐酸溶液，室温反应1?2小时。用30kDa的超滤管超滤，除去未反应的1-(3-二甲 氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸，吸取超滤管内剩余液体，加入10mM的硼酸缓冲液恢复为 体积至lmL。 ③将抗A族链球菌抗体加入lOOkDa的超滤管中，用10mM硼酸缓冲液调整抗体含 量为4mg/mL的。 ④按200 μ g/lmL的量，将步骤②制备的抗体加入到步骤①量子点溶液中，室温反 应1?2小时。 ⑤按10 μ L/lmL的量，向步骤③中加入10mg/mL的甘氨酸，封闭未偶联抗体的本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，包括带盒盖的盒体(6)，盒体(6)内设有检测试纸，其特征在于，所述的盒体(6)的盒盖(61)上设有加样孔(71)和结果观察窗口(72)；所述的检测试纸包括底板(1)，底板(1)上依次衔接有样品垫(2)、抗A族链球菌抗体量子点标记垫(3)、包被膜(4)和吸水垫(5)，所述的包被膜(4)上设有一条A族链球菌抗体检测区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线，两条线平行排列。
【技术特征摘要】
1. 一种A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，包括带盒盖的盒体￠)，盒体￠)内设 有检测试纸，其特征在于，所述的盒体￠)的盒盖￠1)上设有加样孔（71)和结果观察窗口 (72);所述的检测试纸包括底板（1)，底板（1)上依次衔接有样品垫（2)、抗A族链球菌抗体 量子点标记垫（3)、包被膜（4)和吸水垫（5)，所述的包被膜（4)上设有一条A族链球菌抗 体检测区T线和一条羊抗兔多克隆抗体质控区C线，两条线平行排列。2. 根据权利要求1所述的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，其特征在于，所述的 包被膜（4)两端分别与吸水垫（5)和抗A族链球菌抗体量子点标记垫（3)相互交叠连接， 在抗A族链球菌抗体量子点标记垫（3)上压贴有样品垫（2)。3. 根据权利要求1所述的A族链球菌量子点免疫层析检测试剂卡，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：汤永平，张晓丽，潘秀华，
申请(专利权)人：广州市微米生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：广东;44
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