一种协同增效治疗脑胶质瘤的组合药物制造技术

本发明专利技术属于医药制备技术领域，涉及一种能够协同增强抑制脑胶质瘤生长的新型组合药物；其有效药物成分为海兔素和替莫唑胺，将两者按一定质量配比混合后采用浸取、萃取和分离纯化等常规加工工艺配制成片剂、粉剂或采用胶囊包装结构；其制备工艺简单，组合成份单纯，使用安全可靠，疗效明显，医用环境友好，原料加工制备工艺成熟，无副作用。

【技术实现步骤摘要】
一种协同增效治疗脑胶质瘤的组合药物
: 本专利技术属于医药制备
，涉及一种能够协同增强抑制脑胶质瘤生长的新型组合药物。
技术介绍
: 脑胶质瘤是颅内发病率最高的恶性肿瘤，手术难以切除干净，复发率、死亡率高，其中胶质母细胞瘤平均生存期只有10-12个月，术后辅以放疗化疗，效果亦不理想，因此寻找好的治疗胶质瘤的药物成为近年来研究的热点和难点；替莫唑胺是目前治疗脑胶质瘤效果较好的化疗药，临床上广泛应用，具有较宽的抗肿瘤谱，易于透过血脑屏障，酸性环境下稳定，现已作为一线化疗药物在临床推广应用，但部分胶质瘤对其反应不敏感，治疗效果差，能否有新的药物与替莫唑胺联合用药，增强其抗瘤作用成为一个新的关注焦点；海兔素是一种天然的海洋药物，它是一种海藻溴代倍半萜，从海洋三列凹顶藻中提取的脂溶性化合物，分子式为C15H19BrO,分子量仅为295 ;海兔素已经被证实对乳腺癌、胃癌有很好的治疗作用。[天然产物研究与开发，2012 ;24:1201-1205，中国药理学通报，2010 ;26 (3):333-337];替莫唑胺与其他药物联合应用治疗脑胶质瘤是目前提高胶质瘤化疗效果的重要方法，但是目前还没有关于海兔素联合替莫唑胺治疗胶质瘤的研究报道。
技术实现思路
: 本专利技术的目的在于克服现有技术存在的缺点，寻求提供一种治疗脑胶质瘤的抗肿瘤组合药物，具体的说是一种含有海兔素和替莫唑胺的治疗脑胶质瘤的抗肿瘤组合药物。 为实现上述目的，本专利技术所述的治疗脑胶质瘤的组合药物，其有效药物成分为海兔素和替莫唑胺，其质量配比为(10-20):1 ;混合后采用常规加工工艺配制成片剂、粉剂或采用胶囊包装结构；其使用的海兔素为常规工艺制取的白色化合物，分子式为C15H19BrO,分子量为295 ;使用的替莫唑胺为市售产品药物。 本专利技术涉及的组合药物与现有技术相比，其制备工艺简单，组合成份单纯，使用安全可靠，疗效明显，医用环境友好，原料加工制备工艺成熟，无副作用。 【附图说明】 : 图1为本专利技术涉及的海兔素的化学结构式。 图2为本专利技术涉及的海兔素对胶质瘤的抑制作用的MTT结果显示。 图3为海兔素诱导U-87MG细胞及星形细胞的凋亡结果。 图4为海兔素能明显减少U87及U251细胞克隆数量。 图5为细胞侵袭实验，海兔素能明显抑制胶质瘤的侵袭。 图6(a)为海兔素和替莫唑胺及组合物对胶质瘤细胞活性影响 图6 (b)为海兔素和替莫唑胺及组合物对胶质瘤细胞凋亡的影响 图6 (C)为海兔素和替莫唑胺及组合物对胶质瘤细胞克隆数影响 图6 (d)为海兔素和替莫唑胺及组合物对胶质瘤细胞侵袭的影响 图7为海兔素和替莫唑胺及组合物对大鼠生存时间的影响 【具体实施方式】 : 下面结合附图并通过实施例对本专利技术作进一步详细说明。 实施例1: 本实施例所述的治疗脑胶质瘤的组合药物，其有效药物成分为海兔素和替莫唑胺，其质量配比为(10-20):1 ;采用常规加工工艺混合配制成片剂、粉剂或采用胶囊包装结构；其使用的海兔素为常规工艺加工制取的白色化合物，分子式为C15H19BrO,分子量为295 ；使用的替莫唑胺为市售产品的粉状药物。 本实施例所述海兔素的制备工艺包括浸取、萃取和分离纯化三个步骤: (I)浸取:先将三列凹顶藻样品在常温下风干后，称取5kg，按1:2~5的重量比例用体积分数为0.95的乙醇室温下浸泡3天，并反复浸泡提取3次，合并提取液后经减压浓缩并控制温度低于40°C，得到乙醇提取物325g ； (2)萃取:再将乙醇提取物悬浮于蒸馏水中，用乙酸乙酯萃取，有机相回收溶剂得到乙酸乙酯萃取物105g; (3)分离纯化:取上述乙酸乙酯萃取物，干法上样，进行正相硅胶柱色谱分离，用石油醚丙酮梯度洗脱，薄层色谱检查，合并相同部分，洗脱液经过反复正相硅胶、生物胶B1-beads、凝胶S印hadex LH-20柱色谱和反相HPLC分离纯化，得到白色化合物，为溴代倍半萜海兔素单体(Aplysin)，测其分子式为C15H19BrO,分子量为295。 本专利技术提取的海兔素(C15H19BrO)的特征如下:无色针晶(石油醚)，mp96~98 0C ；IR vKBrmax cm-1:2952,2864,1577,1487, 1460,1375, 1308, 1267，1234，1192，1007,904,881862 ;E1-MS m/z ( % ):296 [M (81Br)] + (100),294[M(79Br)] + (100),281[M(81Br) -CH3] + (95), 279 [M(79Br) -CH3] + (95), 239 (45), 237 (45), 200 [M—Br] + (35)，160(16),115(12),109(10),69(5) ;1H_NMR(CD3C0CD3，500MHz) δ:1.06 (3H, d, J = 6.5Hz,H-9)，1.04 ~1.08 (1H, m, H_2a)，1.27 (3H, s’ H-10)，1.33 (3H, s’ H-12)，1.60 ~1.68 (2H,m, H-2b, la)，1.81 ~1.86 (2H, m, H_lb，3)，2.26 (3H, s’ H-1I) ,6.60 (1H, s’ H_5)，7.2(1H，s’ H-8) ;13C-NMR(CD3C0CD3，125MHz) δ:43.0 (C_l)，31.9 (C_2)，46.6(C_3)，100.4(C_3a)，159.4 (C-4a) , 110.5 (C_5) , 137.5 (C_6) , 114.3 (C_7) , 127.3 (C_8) , 137.4 (C_8a)，55.l(C-8b)，13.3(C-9)，23.1 (C-1O), 23.4 (C-1l), 20.1 (C-12);上述数据与现有文献报道的海兔素一致，因此确定所提取到的化合物为海兔素，见图1。 实施例2: 本实施例所制得的海兔素应用效果检测，其涉及的材料来源是: 人胶质瘤细胞系:现71^，似5謹6川3731^ and M059J购买于美国模式培养物集存库； U87MG-TR细胞:每两周将U87MG细胞用含替莫唑胺培养基培养，共4个月，获得对替莫唑胺耐药的U87MG细胞； 星形胶质细胞:采用原代培养方法，将脑组织剪成碎块，去除脑膜组织，胰酶消化，金属滤网过滤后培养在含15%胎牛血清的DMEM培养基中，用GFAP免疫荧光染色进行鉴定; 海兔素作用胶质瘤细胞活性测定:将U87MG、U251MG、U373MG、M059J和星形胶质细胞分别植入96孔板中，每孔植入5X 103个细胞，不同浓度的海兔素(OdOdOμg/ml)分别加入96孔板中，作用48小时，MTT法测定细胞活性，海兔素对胶质瘤的抑制作用随剂量的增高而增强，成剂量依赖性，海兔素对正常星形胶质细胞无抑制作用，说明海兔素能选择性抑制胶质瘤细胞的增值，见图2 ； 海兔素诱导胶质瘤细胞凋亡的测定:取对数生长期的胶质瘤细胞，以I X 107ml密度接种，用不同浓度海兔素(0、5、10、20、40μ8/πι1)共同培本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种协同增效治疗脑胶质瘤的组合药物，其特征在于有效药物成分为海兔素和替莫唑胺，其质量配比为(10‑20)：1；混合后采用常规加工工艺配制成片剂、粉剂或采用胶囊包装结构；其使用的海兔素为常规工艺制取的白色化合物，分子式为C15H19BrO，分子量为295；使用的替莫唑胺为市售产品药物。

【技术特征摘要】
1.一种协同增效治疗脑胶质瘤的组合药物，其特征在于有效药物成分为海兔素和替莫唑胺，其质量配比为(10-20):1 ;混合后采用常规加工工艺配制成片剂、粉剂或采用胶囊包装结构；其使用的海兔素为常规工艺制取的白色化合物，分子式为C15H19BrO,分子量为295 ；使用的替莫唑胺为市售产品药物。2.根据权利要求1所述的协同增效治疗脑胶质瘤的组合药物，其特征在于制备工艺包括浸取、萃取和分离纯化三个步骤: (1)浸取:先将三列凹顶藻样品在常温下风干后，称取5kg，按1:2~5的重量比例用体积分数为0.95的乙醇室温下浸泡3天，并反复...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫安静，窦梅，梁惠，贺娟，
申请(专利权)人：青岛大学附属医院，
类型：发明
国别省市：山东;37