一种藏羊血中抗氧化多肽的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种藏羊血中抗氧化多肽的制备方法，该方法包括以下步骤：⑴在藏羊检疫合格后屠宰得到的血液中加入柠檬酸钠或三聚磷酸钠，混合均匀后过滤，得到澄清液，该澄清液经真空冷冻干燥后得到藏羊血清粉；⑵将藏羊血清粉配成底物浓度为5%~8%的藏羊血清液，经消化处理、过滤，得到藏羊血水溶液，该水溶液升温至80~85℃时恒温10~15min，即得预处理后的藏羊血水溶液；⑶预处理后的藏羊血水溶液加氢氧化钠溶液调pH值后加复合酶水解，得到酶解液；⑷酶解液经灭酶处理后离心，得到上清液A；⑸上清液A中加活性炭脱色后离心，得到上清液B；⑹上清液B经干燥，即得水分小于5%的粉末状藏羊抗氧化血肽。本发明专利技术工艺简单，所得产品水解度和抗氧化活性显著提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，尤其涉及。
技术介绍
现代科学研究表明，生物体的衰老过程是机体的组织细胞不断产生的自由基积累 结果，自由基可以引起DNA损伤从而导致突变，诱发肿瘤形成。自由基是正常代谢的中间产 物，其反应能力很强，可使细胞中的多种物质发生氧化，损害生物膜，能够使蛋白质、核酸等 大分子交联，影响其正常功能；破坏蛋白质，破坏体内的酶，导致炎症和衰老；破坏脂肪，使 脂质过氧化，导致动脉粥样硬化，发生心脑血管疾病；破坏碳水化合物，使透明质酸降解，导 致关节炎等。要降低自由基对人体的危害，除了依靠体内自由基清除系统外，还要寻找和发 掘具有抗氧化作用的物质，其途径一种是利用化学合成抗氧化剂(如BHA、BHT等)，但在体内 有一定的蓄积性而引起安全问题，应用受到限制；另一个途径天然抗氧化剂，如VE能有效 保持食品中油脂的稳定性，但不利于食品的保存。为此，从动植物资源中开发天然、安全的 抗氧化剂成为当今社会的研究热点。 人体的免疫系统是机体抵御外来细菌、病毒、化学毒物侵犯的一个重要防御系统。 它由两部分组成：细胞免疫与体液免疫。蛋白肽对机体免疫系统最敏感、最直接的表现是： 蛋白肽是维持免疫细胞功能的核心物质，以细胞免疫中最重要的淋巴细胞为例，当受抗原 细胞的活化后，能迅速增殖并合成大量的抗体，对蛋白肽的需求能迅速增加，但是体内储存 的蛋白肽是有限的，不能满足需求。而在这时补充外源性蛋白肽能及时提供细胞活化后所 需的能量和原料物质，从而产生大量的免疫细胞和抗体，使机体的免疫力迅速得到提高。外 源性蛋白肽可促进淋巴细胞的增生，增强巨噬细胞的吞噬活性和杀伤能力。在年老体弱及 营养不良致使机体免疫功能受到抑制时，补充蛋白肽可恢复正常的免疫功能。人体在特定 的生理条件下（如外科手术、败血症、烧伤等）补充外源性蛋白肽，不仅可增强机体的免疫 功能，更有助于维持细胞和体液的免疫应答，还能解除免疫抑制。 藏羊是青藏高原的优势动物，藏羊血中含有丰富的蛋白质，是一种理想的蛋白质 资源，具有很高的营养价值，素有液态肉之称。从藏羊血液中制备生物活性肽，可用于制 造适合特定人群的保健食品以及各种药用产品。 目前利用猪血为原料进行抗氧化多肽提取、加工的专利报道较多，其方法多用酸、 碱法水解，此类方法制备的产品存在参入化学反应的化学试剂残余是否有害、改性蛋白在 人体中能否被吸收、水解产物是否安全等问题，而这些在短期内很难诊断，同时生产费用较 高、产品营养价值较低。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、产品水解度和抗氧化活性显著 提高的藏羊血中抗氧化多肽的制备方法。 为解决上述问题，本专利技术所述的，包括以下 步骤： ⑴在藏羊检疫合格后屠宰得到的血液中加入其体积0. 3°/Γ〇. 7%的柠檬酸钠或 三聚磷酸钠，混合均匀后过滤，得到澄清液，该澄清液先在-45 °C预冷，然后在温度 为-40°C?+25°C、真空度为110千帕?15帕的条件下干燥34?36小时，即得藏羊血清粉； ⑵将所述藏羊血清粉加入蒸馏水震荡、溶解后定容至l〇〇mL，配成底物浓度为59Γ8%的 藏羊血清液；然后取2mL的所述藏羊血清液于水解瓶中，加 l(Tl5mL 6M的盐酸放入恒温干 燥箱中，在温度为9(Γ100?的条件下消化处理20~28h ;取出，冷却至室温后过滤，得到藏羊 血水溶液，该水溶液升温至8(T85°C时恒温l(Tl5min，即得预处理后的藏羊血水溶液； ⑶所述预处理后的藏羊血水溶液中加质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，调节pH值至 6. 8(Γ8. 00 ;然后按所述预处理后的藏羊血水溶液体积的0. 809Γ1. 30%加入复合酶，在温度 为58~70°C的条件下恒温水解2. 8~3. 5h，得到酶解液； ⑷所述酶解液升温至95~100°C后保持15~20min进行灭酶处理；然后冷却至室温，再以 7500?8000r/min的速率离心15?20min，得到上清液A ; (5) 所述上清液A中加入其体积89Γ10%的活性炭在80?85°C搅拌25?30min进行脱色，然 后以750(T8000r/min的速率离心5min，过滤除去活性炭，得到上清液B ; (6) 所述上清液B在温度为-45°C ~+25°C、真空度为7. 5~10. 6帕的条件下进行真空冷冻 干燥，即得水分小于5%的粉末状藏羊抗氧化血肽。 所述步骤⑶中复合酶是指风味蛋白酶与木瓜蛋白酶按0. 75g~l. 00g : 0. 90g?1. 30g的比例混合而成。 本专利技术与现有技术相比具有以下优点： 1、本专利技术所得藏羊血抗氧化血肽为白色粉末状物质，是平均肽链长度为2~10的短 肽（以2~3的低分子肽为主）及含有少量的游离氨基酸、糖类和无机盐成分、相对分子质 量以低于1000的为主体，主要溶出峰位置在相对分子质量33(Γ820范围内。其蛋白质含 量为85%左右，通常是由:Γ6个氨基酸组成；在浓度为1. 00g/50mL时起泡性最好，浓度为 0. 75g/50mL时起泡稳定性最好；pH=5时起泡性最差但起泡稳定性最好；起泡性及起泡稳定 性受到CaCl2浓度的影响均不显著；蛋白质浓度为0. 05g/50mL时乳化性最好，乳化稳定性 受蛋白质浓度影响不显著；pH=5时乳化性及乳化稳定性表现出最低值；CaCl 2浓度的升高 使乳化性上升而乳化稳定性下降(参见表广6,其中FA为起泡性，FS为泡沫稳定性，EAI为 乳化活力指数，ESI为乳化稳定指数)。 表1蛋白质浓度对起泡特性的影响本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种藏羊血中抗氧化多肽的制备方法，包括以下步骤：⑴在藏羊检疫合格后屠宰得到的血液中加入其体积0.3%~0.7%的柠檬酸钠或三聚磷酸钠，混合均匀后过滤，得到澄清液，该澄清液先在‑45℃预冷，然后在温度为‑40℃~+25℃、真空度为110千帕~15帕的条件下干燥34~36小时，即得藏羊血清粉；⑵将所述藏羊血清粉加入蒸馏水震荡、溶解后定容至100mL，配成底物浓度为5%~8%的藏羊血清液；然后取2mL的所述藏羊血清液于水解瓶中，加10~15mL 6M的盐酸放入恒温干燥箱中，在温度为90~100℃的条件下消化处理20~28h；取出，冷却至室温后过滤，得到藏羊血水溶液，该水溶液升温至80~85℃时恒温10~15min，即得预处理后的藏羊血水溶液；⑶所述预处理后的藏羊血水溶液中加质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，调节pH值至6.80~8.00；然后按所述预处理后的藏羊血水溶液体积的0.80%~1.30%加入复合酶，在温度为58~70℃的条件下恒温水解2.8~3.5h，得到酶解液；⑷所述酶解液升温至95~100℃后保持15~20min进行灭酶处理；然后冷却至室温，再以7500~8000r/min的速率离心15~20min，得到上清液A；⑸所述上清液A中加入其体积8%~10%的活性炭在80~85℃搅拌25~30min进行脱色，然后以7500~8000r/min的速率离心5min，过滤除去活性炭，得到上清液B；⑹所述上清液B在温度为‑45℃~+25℃、真空度为7.5~10.6帕的条件下进行真空冷冻干燥，即得水分小于5%的粉末状藏羊抗氧化血肽。...

【技术特征摘要】
1. 一种藏羊血中抗氧化多肽的制备方法，包括以下步骤： ⑴在藏羊检疫合格后屠宰得到的血液中加入其体积0. 39ΓΟ. 7%的柠檬酸钠或 三聚磷酸钠，混合均匀后过滤，得到澄清液，该澄清液先在-45 °C预冷，然后在温度 为-40°C?+25°C、真空度为110千帕?15帕的条件下干燥34?36小时，即得藏羊血清粉； ⑵将所述藏羊血清粉加入蒸馏水震荡、溶解后定容至l〇〇mL，配成底物浓度为59Γ8%的 藏羊血清液；然后取2mL的所述藏羊血清液于水解瓶中，加 l(Tl5mL 6M的盐酸放入恒温干 燥箱中，在温度为9(Γ100?的条件下消化处理20~28h ;取出，冷却至室温后过滤，得到藏羊 血水溶液，该水溶液升温至8(T85°C时恒温l(Tl5min，即得预处理后的藏羊血水溶液； ⑶所述预处理后的藏羊血水溶液中加质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，调节pH值至 6. 8(Γ8. 00 ;然后按所述预处理后的藏羊血水...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹竑，王爱国，武海晶，时国明，高丹丹，叶永丽，蒲莹，
申请(专利权)人：西北民族大学，青海湖源牧业开发有限公司，
类型：发明
国别省市：甘肃;62