药物中五味子醇甲含量的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种药物中五味子醇甲含量的测定方法，具体步骤如下：供试样品溶液的制备、对照品溶液的制备、UPLC检测、标准曲线的制定及计算结果。本发明专利技术检测时间短、分离度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物分析领域，具体涉及药物成分含量的测定方法。
技术介绍
护肝片具有疏肝理气，健脾消食，降低转氨酶作用。用于慢性肝炎及早期肝硬化 等。10版药典中护肝片使用HPLC进行检验，其中五味子乙素用HPLC需要用大约40min? 60min，而且难分离。UPLC相对于传统的HPLC，具有检测时间短，分离度高等优点，用于护肝 片中五味子醇甲的检测能够克服其用时长，难分离的缺点。
技术实现思路
本专利技术需要解决的技术问题是提供一种检测时间短、分离度高的测定药物中五味 子醇甲含量的测定方法。 本专利技术所采用的技术方案是： 一种，由以下步骤组成： A、 供试样品溶液的制备：称取该药物，研细，加正己烷浸泡12-24小时，于80?85°C回 流提取6小时，提取液低温蒸干，然后再加甲醇微热使溶解，摇匀，即得； B、 对照品溶液的制备：称取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每lml含0. 02mg、0. 05mg、 0· lmg、0. 2mg、0. 5mg 的溶液，即得； C、 UPLC检测：色谱柱为C18,流动相为甲醇-水； D、 标准曲线的制定及计算结果：将浓度不同的对照品溶液注入步骤C中超高效色谱 仪中分析，以色谱峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得到对照样品溶液的标准曲线；然后将 供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析，将峰面积带入标准曲线中，得到五味子醇甲的含 量。 作为优选，所述步骤C中甲醇-水的比例为72 :28,流速为0. 30ml · mirT1，进样量 为2μ 1，检测波长为254nm。 由于采用了上述技术方案，本专利技术取得的技术进步是： 本专利技术采用UPLC测定护肝片中五味子醇甲的含量，检测时间大大缩短，提高了工作效 率，减少流动相的使用量，降低了分析成本；解决了 HPLC对部分中药成分分离度差的问题， 使得测量结果更加快速，准确；进一步拓展了液相色谱的应用范围，特别是对于基质复杂的 混合组分的分析，通过UPLC方法研究可获得更高的分析通道。 为了验证该方法的精密度，做了如下实验： 1.仪器与试药 1. 1 仪器 UltiMate_3000,色谱柱：Waters C18,1. 7 μ m，2. 1*50臟。 1. 2试药对照品：五味子醇甲（中检所：110765-200710),供试品：护肝片（批号： 100501，石家庄以岭药业)，所用试剂均为色谱纯。 2.实验方法与结果 2. 1用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水（72 :28)为流动相，流速为： 0. 30ml ，进样量为2 μ 1，检测波长为254nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于 6000。 2. 2溶液的制备 2. 2. 1对照品溶液的制备 取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含0. 05mg的溶液，即得。 2. 2. 2供试品溶液的制备 取本品研细，取2. 5g，精密称定，置索氏提取器中，加正己烷适量，浸泡过夜，于80? 85°C回流提取6小时，提取液低温蒸干，残渣加甲醇微热使溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇 至刻度，摇匀，即得。 2. 3线性关系的观察 按照对照品的制备，精密制定对照品溶液每lml含0. 02mg、0. 05mg、0. lmg、0. 2mg、 0. 5mg的对照品溶液，各精密量取2 μ 1，注入色谱仪，以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐 标，绘制标准曲线。回归方程：7= 45. 019Χ+0. 0653, r = 0.9999,表明五味子醇甲在0.02 mg?0. 5mg范围内线性关系良好。 2. 4精密度试验 取处理好的供试品测定，精密吸取样品2 μ 1，连续进样5次，峰面积依次为：4. 5623、 4· 5682、4· 5663、4· 5572、4· 5591，计算 RSD 为 0· 10%。 2. 5供试品溶液稳定性试验 按含量测定项下的，在室温条件下，对同一样品溶液每隔〇、4、8、12、2处进样，记录色 谱图，所得峰面积依次为：4· 5555、4· 5582、4· 5693、4· 5482、4· 5691，按峰面积计算RSD为 0. 33%，样品在24小时内基本稳定。 2. 6重现性实验： 照护肝片含量(五味子醇甲）测定项下的方法，由不同人员分别测定同批次含量，结果 见表1 表1.重现性实验测定结果本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物中五味子醇甲含量的测定方法，其特征在于由以下步骤组成：A、供试样品溶液的制备：称取该药物，研细，加正己烷浸泡12‑24小时，于80～85℃回流提取6小时，提取液低温蒸干，然后再加甲醇微热使溶解，摇匀，即得；B、对照品溶液的制备：称取五味子醇甲对照品，加甲醇分别制成每1ml含0.02mg、0.05mg、0.1mg、0.2mg、0.5mg的溶液，即得；C、UPLC检测：色谱柱为C18，流动相为甲醇‑水；D、标准曲线的制定及计算结果: 将浓度不同的对照品溶液注入步骤C中超高效色谱仪中分析，以色谱峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得到对照样品溶液的标准曲线；然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析，将峰面积带入标准曲线中，得到五味子醇甲的含量。

【技术特征摘要】
1. 一种药物中五味子醇甲含量的测定方法，其特征在于由以下步骤组成： A、 供试样品溶液的制备：称取该药物，研细，加正己烷浸泡12-24小时，于80?85°C回 流提取6小时，提取液低温蒸干，然后再加甲醇微热使溶解，摇匀，即得； B、 对照品溶液的制备：称取五味子醇甲对照品，加甲醇分别制成每lml含0. 02mg、 0· 05mg、0. lmg、0. 2mg、0. 5mg 的溶液，即得； C、 UPLC检测：色谱柱为C18,流动...

【专利技术属性】
技术研发人员：霍际伟，于国江，李净，祁星星，柴振平，
申请(专利权)人：石家庄以岭药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13