一种血瘀证勃起功能障碍动物模型的制作方法技术

本发明专利技术涉及一种血瘀证勃起功能障碍动物模型的制作方法，包括如下步骤：S1：将大鼠置于电击设备中，给予持续电刺激；S2：将大鼠置于噪声设备中，给予高频噪声刺激；S3：将大鼠放入冰水混合的游泳设备中，使其冰泳。本发明专利技术通过采用电击、噪音和冰泳的复合因素成功地建立了血瘀证ED大鼠模型，避免了采用一种刺激强度较弱，成模时间延长，成模率低等情况，同时避免了单一较弱刺激动物容易出现适应现象的问题。另外，本发明专利技术的复合因素实施较为方便，容易定量，将电流和噪音控制在合适的范围内，成模率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学和动物行为学领域，涉及一种血瘀证勃起功能障碍动物模型的建 立方法。
技术介绍
勃起功能障碍（erectile dysfunction, ED，中医称为阳痿）是一种常见的男 性疾病，一直以来是泌尿外科及男科的研究热点。在中医病因病机理论中，多认为因情志刺 激影响肝的疏泄功能而使肝郁气滞，或因纵欲房劳、久病体虚而精血亏虚、耗伤肾气，致瘀 血阻络，宗筋气血循行不畅，而发阳痿，其中肝郁和肾虚是最重要的两个基础病机，血瘀则 是阳痿的重要病理因素[李柳骥，严季澜。阳痿病因病机述略。吉林中医药，2011,31(9): 819-821.]。由上病机阐述可见，阳痿病人，尤其是病情严重或久治不愈的病人，多存在血瘀 证候表现。 血瘀证动物模型的相关研究已有多年历史，但这些模型多以血液循环障碍与微循 环障碍为特征，仅从机体某一局限性生化、病理等指标变化来反映血瘀这一中医证候，并非 从整体出发，不能反映机体整体情况，模型判断标准也存在一些问题。一个理想的中医证候 模型，应该体现中医学有诸内必行诸于外的整体观念，利用动物的生物体表特征来模拟 人体证候的特征[田金洲，王永炎，时晶，等。证候模型研究的思路。北京中医药大学学报， 2005,28(6) :18-21.]。血瘀证在人身上主要以舌暗、有瘀点或瘀斑、舌下静脉曲张、唇痿舌 青、口燥但欲漱水不欲咽、疼痛夜甚或痛处不移、脉微大来迟或涩等为表现特征[时晶，田 金洲，王永炎，等。血瘀证的生物学基础研究。中华中医药杂志，2006,21(6) :363-364.]，在 动物模型上，则体现在动物的舌象、唇象、耳廓、尾尖、眼球、毛皮以及动物行为等方面，主要 表现为舌质色泽紫暗，舌下脉络色泽紫暗，脉络明显增长、增粗，耳廓等部位脉络亦出现相 似改变；进食、饮水及活动减少等。此类能够模拟人体证候特征的动物模型目前有一种报道 [尹军祥，田金洲，王永炎，等。寒凝血瘀证表征模型的建立。北京中医药大学学报，2006， 29 (10) :682-685.]，但无该造模方法导致ED的报道。 目前用于ED研究的中医证候动物模型多为肝郁型ED模型[刘林锡，赵秀珍，刘煜 德。勃起功能障碍的中医研究概况。亚太传统医药，2010,6(6) :170-171.]及肾阳虚型ED 模型[樊金卿，孙一鸣，赵兵，等。鹿仲温肾水丸对肾阳虚型勃起功能障碍的研究。中医药 信息，2013 (4) :36-37.]，其它证候ED模型建立较少，至今为止未见血瘀型ED动物模型相关 报道。 ED的西医治疗主要使用磷酸二酯酶-5抑制剂，总体而言能使65% -70%的患者 成功完成性交[McMahon C G. Erectile dysfunction. Internal medicine journal, 2014, 44(1) :18-26.]。但该类药物的使用存在一些禁忌症，同时也有不同程度的副作用，甚至可 能导致严重的心血管事件发生，且对重度ED合并其它性功能障碍者疗效欠佳。而中医药对 于久病成瘀、久病入络的慢性疾病治疗存在优势，并能从整体上提高性功能，改善全身 健康状况[刘保兴，陈斌，王琦。论西地那非与中医药治疗勃起功能障碍的优势与不足。北 京中医药大学学报（中医临床版），2004, 2 :004.]，能弥补西药的不足。因此，建立一个合 适、可靠的血瘀证ED模型对于筛选用于血瘀证ED治疗的中药、研究其作用机制及评估其治 疗效果有重要意义 相应地，动物模型的制作方法千差万别，动物模型的不同势必导致制作方法的不 同，而且其间通常不具备借鉴意义。现有的肝郁型ED模型的制作方法，通常使用束缚筒束 缚大鼠进行造模，需时50天，并且需要逐步改变束缚时间及束缚强度，操作较为复杂，且存 在束缚强度难以定量，造模时间较长等问题[张立侠，王慧.肝郁证勃起功能障碍大鼠模 型建立的实验研究.中国男科学杂志，2007, 20(11) :29-31.]。虽然有血瘀证的动物模型报 道，但尚未有报道血瘀证ED动物模型。现有的外伤血瘀、热毒血瘀、血虚血瘀等模型多采用 急性造模刺激因素，与ED的慢性发病过程不相符合；气虚血瘀、寒凝血瘀、痰浊血瘀等慢性 刺激模型存在仅在局部刺激、模型仅有生化指标改变而不能产生动物的血瘀证生物表征、 模型不稳定，易逆转等缺点[颜琳琳，周利红，李琦.中医血瘀证动物模型研究概况.中 医杂志，2014, 55 (3) : 255-258.]。
技术实现思路
为了解决上述现有技术存在的问题，本专利技术旨在提供一种血瘀证勃起功能障碍动 物模型的制作方法。 本专利技术所述的血瘀证勃起功能障碍动物模型的制作方法，包括如下步骤：S1 :将 大鼠置于电击设备中，给予持续电刺激；S2 :将大鼠置于噪声设备中，给予高频噪声刺激； S3 :将大鼠放入冰水混合的游泳设备中，使其冰泳。 所述步骤S1中的每次电刺激的电流为0. 8-1. 2mA，刺激时间为60-lOOs。 所述步骤S1包括每间隔10-20min重复一次电刺激，共刺激6-10次。 所述步骤S1包括分别在4-6周的造模周期内的每天的上下午分别进行所述6-10 次电刺激。 所述步骤S2中的噪声频率为10000-20000HZ，强度为100-150dB，持续时间为 80-160s〇 所述步骤S2包括每间隔10-20min重复一次噪声刺激，共刺激6-10次。 所述步骤S2包括分别在4-6周的造模周期内的每天的上下午分别进行所述6-10 次噪声刺激。 所述步骤S3中的冰泳时间为5-10min。 所述步骤S3包括分别在4-6周的造模周期内的每天的上下午各进行一次冰泳。 在所述步骤S3之前和/或之后，给大鼠注射肾上腺素。 本专利技术通过属于强烈的情志刺激的电击，令动物因电击痛楚产生恐惧、抑郁的情 绪；通过属于较弱的情志刺激的噪音，令动物因声音干扰产生烦躁、焦虑的情绪；通过属于 寒凝刺激的冰泳,使动物气血行运不畅，同时亦使动物产生恐惧、抑郁的情绪。通过评价，本 专利技术提供的方法能够成功地建立了血瘀证ED大鼠模型，通过采用电击、噪音和冰泳的复合 因素，避免了采用单一刺激强度较弱，成模时间延长，成模率低等情况，同时避免了单一较 弱刺激动物容易出现适应现象的问题。另外，本专利技术的复合因素实施较为方便，容易定量， 例如将电流和噪音控制在合适的范围内，成模率高。而且，肾上腺素属于血管活性药物，具 有缩血管作用，在冰泳前后应用可使血管收缩，加强寒凝刺激产生的脉络瘀阻作用。 【具体实施方式】 下面给出本专利技术的较佳实施例，并予以详细描述。 材料与方法 实验动物：Sprague Dawley(SD)大鼠，清洁级，由上海交通大学医学院实验动物中 心提供。 实验器材：电刺激设备（电击箱：Coulbourn Precision Animal Shocker ;型 号：H13-15 ;通电网：Coulbourn Instruments Habitest Operant Cage, Modular Shock Floor ;型号：H10-11R-TC-SF ;美国），噪声刺激设备（Pyl印rol PT600A Integrate本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种血瘀证勃起功能障碍动物模型的制作方法，其特征在于，所述制作方法包括如下步骤：S1：将大鼠置于电击设备中，给予持续电刺激；S2：将大鼠置于噪声设备中，给予高频噪声刺激；S3：将大鼠放入冰水混合的游泳设备中，使其冰泳。

【技术特征摘要】
1. 一种血瘀证勃起功能障碍动物模型的制作方法，其特征在于，所述制作方法包括如 下步骤： 51 :将大鼠置于电击设备中，给予持续电刺激； 52 :将大鼠置于噪声设备中，给予高频噪声刺激； 53 :将大鼠放入冰水混合的游泳设备中，使其冰泳。2. 根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述步骤S1中的每次电刺激的电流 为0. 8-1. 2mA，刺激时间为60-100s。3. 根据权利要求2所述的制作方法，其特征在于，所述步骤S1包括每间隔10-20min重 复一次电刺激，共刺激6-10次。4. 根据权利要求3所述的制作方法，其特征在于，所述步骤S1包括分别在4-6周的造 模周期内的每天的上下午分别进行所述6-10次电刺激。5. 根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴继灿，陈翔，胡超，崔杰峰，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属仁济医院，
类型：发明
国别省市：上海;31