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抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸秆分解菌剂及其制备方法技术

技术编号:10420723 阅读:201 留言:0更新日期:2014-09-12 11:41
本发明专利技术公开了一种抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸秆分解菌剂及其制备方法,利用纤维素酶活性高、同时能够抑制芦蒿连作土壤中丝核菌、镰刀菌等土传病原菌的枯草芽孢杆菌菌株和里氏木霉菌株,生产芦蒿秸秆分解菌剂。该菌剂能够加速芦蒿连作土壤中芦蒿秸秆残茬的分解速度,同时抑制秸秆残茬上病原微生物的繁殖增生,降低芦蒿连作障碍的危害。菌剂中功能微生物数量≧2×108cfug-1,含水量小于15%,有机质含量大于35%。试验表明,芦蒿连作障碍发病严重地块,施用芦蒿秸秆残茬分解菌剂后,相较于不使用分解菌剂土壤,芦蒿秸秆分解失重率提高80.9%,下茬芦蒿发病率降低75%,芦蒿产量增116%;该秸秆分解菌剂能够很好的抑制芦蒿的连作病害。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种,利用纤维素酶活性高、同时能够抑制芦蒿连作土壤中丝核菌、镰刀菌等土传病原菌的枯草芽孢杆菌菌株和里氏木霉菌株,生产芦蒿秸秆分解菌剂。该菌剂能够加速芦蒿连作土壤中芦蒿秸秆残茬的分解速度,同时抑制秸秆残茬上病原微生物的繁殖增生,降低芦蒿连作障碍的危害。菌剂中功能微生物数量≧2×108cfug-1,含水量小于15%,有机质含量大于35%。试验表明,芦蒿连作障碍发病严重地块,施用芦蒿秸秆残茬分解菌剂后,相较于不使用分解菌剂土壤,芦蒿秸秆分解失重率提高80.9%,下茬芦蒿发病率降低75%,芦蒿产量增116%;该秸秆分解菌剂能够很好的抑制芦蒿的连作病害。【专利说明】
本专利技术涉及一种抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂及其制备方法,属于微生物

技术介绍
芦蒿(Jrtemisia selengens Turcz.)又名萎蒿、藜蒿、水蒿、柳蒿、香艾、狭叶艾,为菊科蒿属多年生草本植物。芦蒿以鲜嫩茎杆供食用,是广受喜爱的蔬菜之一,是我国冬春蔬菜市场供应的主要野菜品种之一。随着芦蒿集约化生产的发展,种植一亩芦蒿可为农民增收数万元,部分乡镇为单位的蔬菜种植基地,芦蒿种植面积占当地耕地面积的60%左右。土壤长期种植一种作物容易造成连作障碍,表现为作物生长缓慢、病虫害严重、作物产质量下降等,尤其是土壤传播的病害,随着土壤中病原菌的一茬一茬的积累,病害会越来越严重,最终造成作物的绝收,给种植户造成很大的损失。随着种植年限和种植强度的增加,不少芦蒿种植基地已经出现很严重的连作障碍现象。刚开始是三五株芦蒿发病,接下来就是成片的芦蒿植株死亡,发病的田块即使停种或者轮作一季,第二年种植芦蒿还会出现类似的植株发病症状。作物的残茬(落叶、土壤中根茎和秸杆等)是土传病原菌的主要附着物,而且据报道,残茬腐解物能够促进病原微生物的生长,病原菌随着植物残茬在土壤中的分解腐烂,进一步在土壤中增生和定殖,威胁到下茬植物的生产。因此,加速作物连作系统中残茬的分解速度、同时抑制分解过程中病原微生物的生长,是有效地减少土传病害的治本方法。随着社会发展,对食品安全的要求越来越高,来源于土壤的微生物菌株生产的微生物菌剂,高效无公害,具有十分广阔的应用前景。迄今为止,没有发现涉及本专利技术主题的文献报道。
技术实现思路
目的:为了克服现有技术中存在的不足,本专利技术提供一种抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂,能够抑制芦蒿连作土壤病原微生物繁殖和增生,该菌剂中的功能微生物能够在土壤中大量存活和定殖,在分解芦蒿秸杆等残茬的过程中抑制土壤病原微生物的生长和繁殖,有效缓解芦蒿连作障碍对芦蒿产业的危害。技术方案:为解决上述技术问题,本专利技术采用的技术方案为: 一种抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂,其特征在于:所述芦蒿秸杆分解菌剂为枯草芽抱杆菌D9 {Bacillus subtilis D9)和里氏木霉ressi )菌株通过发酵工艺生产,产品有效菌落形成单位(cfu) ^ 2X 18Cfu g4,含水量〈15%。所述枯草芽抱杆菌D9 QBacillus subtilis W) 20]Λ年'?只16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路I号院3号,菌株保藏号为CGMCC N0.9170,简称为枯草芽孢杆菌CGMCC N0.9170。所述的枯草芽孢杆菌CGMCC N0.9170的主要生物学特性为:菌落为白色、边缘不整齐、表面干燥不透明,革兰氏染色阳性,具运动性,通过电镜观察,杆状,芽孢中生,两端钝圆。所述的抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 1)将里氏木霉接种到木霉液体培养基,进行液体发酵生产里氏木霉发酵液,其发酵生产的条件为:培养温度25-30°C,溶氧通气量范围为30~100%,110-170rpm,发酵后期菌丝球全部打碎成菌丝片段,里氏木霉发酵液菌株的菌落形成单位> 0.5 X 18Cfu ml-1 ; 2)将稻壳、秸杆粉和麦麸按照30:40:30比例混合,按照1:1.2-1.5的比例添加水,121°C灭菌30min,制成木霉固体发酵培养基,冷却到室温后按照10%的接种量接种里氏木霉发酵液,20-25°C培养30天,每3-5天翻动固体发酵培养基,发酵结束形成里氏木霉固体发酵菌种; 3)将枯草芽孢杆菌D9接种到液体发酵培养基制得枯草芽孢杆菌发酵液,其发酵生产的条件为:初始pH范围为6.5-7.2,培养温度35-37°C,溶氧通气量范围为30~100%,120-180rpm,发酵18h,枯草芽孢杆菌发酵液中芽孢数量> 2 X 108cfu ml—1 ; 4)将制得的枯草芽孢杆菌发酵液按照10%比例接种到固体发酵培养基,发酵温度为37°C,发酵培养时间为 5天,发酵过程中每10-20小时翻动一次,发酵结束获得枯草芽孢杆菌D9固体发酵菌种; 5)将里氏木霉固体发酵菌种和枯草芽孢杆菌D9菌固体发酵菌种按照1:1质量比彻底的混合,用粉碎机粉碎,按照30%质量比添加粉碎碳酸钙粉,彻底混匀,基质含水量低于15%,包装即得抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂。所述的抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂的制备方法,其特征在于:所述木霉液体培养基配制方法为:土豆淀粉5g,玉米淀粉20g,鹿糖10g, pH值自然,自来水1000ml, 115。。灭菌 30min。所述的抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂的制备方法,其特征在于:枯草芽孢杆菌D9的液体发酵培养基配制方法为:葡萄糖3.5g、玉米淀粉8.5g、黄豆柏25g、碳酸钙3g、硫酸铵lg、硫酸锰0.2g、磷酸二氢钾0.35g、硫酸镁0.2g,自来水1000ml, 115°C灭菌0.5h0所述的抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂的制备方法,其特征在于:枯草芽孢杆菌D9的固体发酵培养基的配置方法为:将麸皮80g、稻壳10g、玉米粉5g、豆饼粉5g、硫酸铵0.8g、硫酸镁0.3g、硫酸锰0.1g彻底混合,按照1:1.2的比例添加自来水,121°C灭菌 30min。有益效果:本专利技术提供的抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸杆分解菌剂,通过具有高效分解芦蒿秸杆能力和抑制芦蒿土传病原菌能力的微生物固体发酵,采用一定的工艺生产,本专利技术的微生物菌剂与目前市场上的产品相比具有如下优点:1)该微生物菌剂能够快速的分解芦蒿收获后土壤中的芦蒿残茬,在分解残茬的过程中能够有效的抑制芦蒿土传病原微生物生长和繁殖。2)芦蒿连作土壤施用本品2-5kg/亩,芦蒿秸杆残茬分解速度增加19.2-80.9%,土壤病原微生物在秸杆残茬分解过程中,数量减少10.3-52.1%。3)由于菌剂是生物菌株通过一定的工艺生产,完全没有化学杀菌剂使用所带来的一系列问题,安全环保,有利于蔬菜安全生产。【专利附图】【附图说明】图1为枯草芽孢杆菌D9对镰刀菌的拮抗作用; 图2为枯草芽孢杆菌D9对立枯丝核菌的拮抗作用; 图3为芦蒿连作土壤微生物菌剂抑制连作障碍效果的盆钵实验; 图4为不同处理对芦蒿连作地秸杆分解效果; 图5为不同处理对芦蒿发病率的影响; 图6为不同处理对芦蒿产量的影响。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术作更进一步的说明。(一本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸秆分解菌剂,其特征在于:所述芦蒿秸秆分解菌剂为枯草芽孢杆菌D9(Bacillus subtilis D9)和里氏木霉(Trichoderma ressi)菌株通过发酵工艺生产,产品有效菌落形成单位(cfu)≧2×108 cfu g‑1,含水量<15%。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈立华常义军王长春张营唐丹翟亚明谈俊益
申请(专利权)人:河海大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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