环孢菌素A形式2的可热压性悬浮液制造技术

本文公开了环孢菌素A形式2的可热压性制剂、制备这些制剂的方法，以及用这些制剂来治疗眼睛疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】环孢菌素A形式2的可热压性悬浮液相关申请的交叉引用本专利申请要求2011年11月15日提交的美国临时专利申请号61/559,849的优先权，所述美国临时专利申请的全部内容以引用的方式并入本文中。专利技术背景药物和透明质酸都需要预先杀菌的事实使得对在透明质酸介质(用作悬浮剂的水凝胶)中的环孢菌素A悬浮液的无菌处理变复杂。预先杀菌的透明质酸是极其昂贵的，几千克的无菌原料要花费约$100万美元(每盎司约$10,000)。另外，在对环孢菌素A预先杀菌的过程中，药物在受到辐射时会降解，如下文以及图1和图2中所示：表1.辐射对环孢菌素稳定性的影响表1.辐射对环孢菌素稳定性的影响在辐射期间冷却环孢菌素不会明显改善结果，如下表2中所示：表2.在冷条件下辐射后对环孢菌素稳定性的影响降解产物的其它水平需要在临床前安全性研究中合格。此外，仅用90-95％的带标签的环孢菌素A(由于预先杀菌工艺)制备的悬浮液不能符合关于保存期限的管理指南的概率很高，这是因为管理机构通常会禁止保存期限低于标签的90％。本专利技术解决了这些问题。本文公开了环孢菌素A与肠胃外生物相容性悬浮剂组合的制剂，其为无菌的、针对热杀菌格外稳定的，并且具有优异的长期稳定性。附图简述图1和图2示出了环孢菌素A效力随晶形和杀菌方法的变化而发生的变化。图3示出了环孢菌素A形式2在热压处理之后的x射线粉末衍射图案数据。图4示出了用八种不同制剂在进行裂隙灯检查时所见的充血。图5示出了新型结晶形式(本文指定为形式2)、四方晶形(本文指定为形式1)和斜方晶形(本文指定为形式3)的CsA的特征X射线粉末衍射(XRPD)图案。图6示出了CsA结晶形式2的XRPD衍射图。图7示出了CsA形式2的水吸附/脱附型态。图8示出了从含1％PS80的0.04％制剂回收的CsA形式2的MDSC分析结果。图9示出了在向新西兰白兔结膜下施用100μl在磷酸盐缓冲盐水中的CMC、HEC、HPMC、Pluronic和PVP注射液之后总的眼部充血。对所述兔子观察七天。图10示出了图9中所述的实验中的总体眼部排泄物。图11示出了图9中所述的实验中的总体眼部肿胀度。图12示出了环孢素A形式的模拟XRPD图案。具体实施方式环孢菌素A环孢菌素A(CsA)是一种具有以下化学结构的环状肽：其化学名称是环[(E)-(2S,3R,4R)-3-羟基-4-甲基-2-(甲氨基)-6-辛酰基]-L-2-氨基丁酰基-N-甲基甘氨酰基-N-甲基-亮氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-L-丙氨酰基-D-丙氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N甲基-L-缬氨酰基]。它也被称为环孢菌素、环孢素A、环孢霉素以及环孢霉素A。它为(加利福尼亚州欧文市的爱力根公司(Allergan,Inc.,Irvine,California))，即一种包含0.05％(w/v)环孢菌素的乳液中的活性成分。在美国被批准用于增加患者的泪液产生，已推测所述患者的泪液产生因与干燥性角膜结膜炎相关的眼部发炎而受到抑制。环孢菌素A形式2已知环孢菌素A以无定形、液晶形式、四方晶形(形式1)以及斜方晶形(形式3)存在。最近已经发现了一种新型晶形，即环孢菌素A形式2。CsA形式2的XRPD图案明显不同于四方晶形和斜方晶形(图1)。当用以X射线源作为CuKα辐射、λ＝、处于30kV/15mA下的X射线衍射仪扫描时，CsA形式2的主要结晶峰出现在(2θ)：7.5、8.8、10.2、11.3、12.7、13.8、14.5、15.6和17.5(分别在约11.8、10.0、8.7、7.8、7.0、6.4、6.1、5.6和的晶格中的d间距，图2)。将这些主峰定义为相对于斜方晶形或四方晶形对形式2来说独特的那些峰；以及强度比背景大5倍的峰。在一个实施方案中，CsA的新型晶形(形式2)是环孢菌素A的非化学计量水合物。在另一实施方案中，由下式表示晶形2：其中X是水分子数目并且从0至3变化。在一个实施方案中，上式中的X是2。在水性悬浮液中，形式2似乎是CsA的动力学稳定形式。含有形式2的悬浮液在存放时未显示向其它已知的多晶形或假晶形式转化。已经发现形式1和无定形形式在水存在下会转化成形式2。已经测定了CsA形式2的水合物形式的单晶结构并且将晶体结构参数列于表2中。这些结果表明形式2与环孢素A的其它已知晶形相比是独特的。表1：CsA形式2的晶体结构解析的晶体数据和数据收集参数。这种CsA形式2的不对称单元含有一个环孢素A分子和两个水分子。有可能的是，任何能以氢键结合于水的小分子都能起到空间填充物的作用，这将会产生一系列从斜方二水合物到畸变的单斜二水合物衍变的潜在结构。图12中示出由单晶结构计算出的XRPD图案并且所述XRPD图案与图2中示出的实验图案相匹配。这些匹配图案进一步证实了形式2是环孢素A的独特并且纯的结晶形式。不希望受理论束缚，与KF滴定和蒸气吸附脱附分析(VSA)组合的热重分析表明CsA形式2是CsA的非化学计量水合物。环孢素形式2的蒸气吸附分析表明新型晶形中的水含量会随相对湿度可逆地变化，如图7中所示。如由调制差示量热(MDSC)分析所示(图8)，类似于四方晶形，新型CsA形式在124.4℃下会相变成液晶或无定形形式，随后熔化。可以通过以下步骤获得环孢菌素A形式2：将0.05％无定形环孢菌素A(w/v)悬浮于1％聚山梨醇酯80中，将溶液加热至65℃，将它保持在所述温度下24小时，然后通过真空过滤来回收沉淀。然后可使用由此获得的环孢菌素A形式2来产生额外的量，其中使用环孢菌素A形式2作为晶种；在这种方法中，将约30g环孢菌素A悬浮于900ml水含有1％(w/v)聚山梨醇酯80的溶液中，将溶液加热至65℃，并然后在温度52℃下用0.2g环孢菌素A形式2接种。然后在约61℃与65℃之间的温度下搅拌该溶液约22小时，并然后回收所得沉淀。关于CsA形式2的更多细节可以见于美国专利申请号13/480,710，所述美国专利申请的全部内容以引用的方式并入本文中。环孢菌素A形式2的热稳定的经过热杀菌的悬浮液本专利技术的组合物是环孢菌素A形式2的眼科学上可接受的悬浮液。关于“眼科学上可接受的”，本专利技术人意指以一定方式配制悬浮液以便当施用于哺乳动物如人的眼睛时无刺激性。本专利技术的悬浮液包含环孢菌素A形式2，和包含悬浮剂的媒介物，所述悬浮剂如为透明质酸、纤维素、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、基于环氧乙烷和环氧丙烷的共聚物，以及聚合物。在一个实施方案中，悬浮液包含浓度为约0.001％至约10％(w/v)的环孢菌素A形式2。在一个实施方案中，悬浮液包含浓度为约0.001％(w/v)至约0.01％、约0.001％(w/v)至约0.04％(w/v)、约0.001％(w/v)至约0.03％(w/v)、约0.001％(w/v)至约0.02％(w/v)，或约0.001％(w/v)至约0.01％(w/v)的环孢菌素A形式2。在另一实施方案中，悬浮液包含浓度为约0.01％(w/v)至约0.05％、约0.01％(w/v)至约0.04％(w/v)、约0.01％(w/v)至约0.03％(w/v)、约0.01％(w/v)至约0.02％(w/v)，或约0.01％(w/v)至约0.01％(w/v)的环孢菌素A本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制剂，其包含环孢菌素A形式2，和选自羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、透明质酸、聚乙烯吡咯烷酮、Carbopol Ultrez10NF和Pluronic F127的媒介物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.11.15 US 61/559,8491.一种悬浮液，其包含环孢菌素A形式2，和选自羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、透明质酸、聚乙烯吡咯烷酮、CarbopolUltrez10NF和PluronicF127的媒介物；其中环孢菌素A形式2在X射线粉末衍射图案中的主要结晶峰出现在2θ：7.5、8.8、10.2、11.3、12.7、13.8、14.5、15.6和17.5；其中所述环孢菌素A形式2的浓度是0.01％(w/v)至0.5％(w/v)、0.55％(w/v)、0.6％(w/v)、0.65％(w/v)、0.7％(w/v)、0.75％(w/v)、0.8％(w/v)、0.85％(w/v)、0.9％(w/v)或0.95％(w/v)。2.一种制备环孢菌素A的悬浮液的方法，所述方法包括以下步骤：a)将环孢菌素A形式2溶解在溶液中；b)对所述溶液进行热压处理；c)添加选自羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤...

【专利技术属性】
技术研发人员：W·M·布兰达，H·M·里弗斯，D·A·马什，M·卢，
申请(专利权)人：阿勒根公司，
类型：发明
国别省市：美国;US