一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法，将丹参药材粉碎、乙醇提取后，经大孔吸附树脂富集得到粗提物，粗提物进行高速逆流色谱分离，以体积比为1-5:5-10:1-5:1-10的溶剂A、溶剂B、溶剂C、溶剂D组成高速逆流溶剂体系，溶剂A为甲醇、乙醇、正己烷或异己烷，溶剂B为乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸正丁酯，溶剂C为甲醇、乙醇或丙酮，溶剂D为水，上相为固定相，下相为流动相，分别制得丹酚酸B、迷迭香酸。本发明专利技术采用采用高速逆流色谱法制备，不存在不可逆吸附，避免了样品的损耗，具有分离效果好，溶剂用量少，无污染，高效、快速的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法
本专利技术属于天然药物分离领域，涉及一种分离纯化丹酚酸B和迷迭香酸的方法，尤其涉及一种利用高速逆流色谱分离纯化高纯度丹酚酸B和迷迭香酸的方法。
技术介绍
丹参为唇形科植物Salvia milt1rrhiza Bge.的干燥根,具有活血通经、祛瘀止痛、清心除烦的药效。丹参的化学成分主要为水溶性的丹酚酸类与脂溶性的丹参酮类。丹酚酸B具有强烈的抗氧化和清除氧自由基的活性。迷迭香酸是一种天然抗氧化剂，具有抗炎抗氧化等活性。丹酚酸B分子结构式如下:

【技术保护点】
一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将丹参药材粉碎成粗粉，加入体积分数10％‑95％的乙醇水溶液中，加热至回流提取数次，提取液趁热过滤，冷却，滤液减压除去溶剂，得到乙醇提取物；(2)丹酚酸B、迷迭香酸的富集：将步骤(1)得到的乙醇提取物加入填充有大孔吸附树脂的色谱柱中，用水和甲醇或乙醇的混合溶剂梯度洗脱，收集含有丹酚酸B和迷迭香酸的洗脱液，减压回收溶剂，干燥、得到丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物；(3)丹酚酸B、迷迭香酸的纯化：以体积比为1‑5:5‑10:1‑5:1‑10的溶剂A、溶剂B、溶剂C、溶剂D组成高速逆流溶剂体系，将所述高速逆流溶剂体系混合充分后静置，按上下两相分开，取上相为固定相，下相为流动相，将固定相充满高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱，设定高速逆流色谱仪，在500～1000r/min转速下，以0.5～5ml/min的流速注入流动相，取步骤(2)得到的丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物，用上相、下相体积比1：1的混合溶剂溶解后进样，分别收集丹酚酸B的流出液和迷迭香酸的流出液，浓缩、干燥，得到丹酚酸B、迷迭香酸；所述溶剂A为甲醇、乙醇、正己烷或异己烷，所述溶剂B为乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸正丁酯，所述溶剂C为甲醇、乙醇或丙酮，所述溶剂D为水。...

【技术特征摘要】
1.一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸B和迷迭香酸的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)将丹参药材粉碎成粗粉，加入体积分数10%-95%的乙醇水溶液中，加热至回流提取数次，提取液趁热过滤，冷却，滤液减压除去溶剂，得到乙醇提取物； (2)丹酚酸B、迷迭香酸的富集:将步骤(1)得到的乙醇提取物加入填充有大孔吸附树脂的色谱柱中，用水和甲醇或乙醇的混合溶剂梯度洗脱，收集含有丹酚酸B和迷迭香酸的洗脱液，减压回收溶剂，干燥、得到丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物； (3)丹酚酸B、迷迭香酸的纯化:以体积比为1-5:5-10:1-5:1-10的溶剂A、溶剂B、溶剂C、溶剂D组成高速逆流溶剂体系，将所述高速逆流溶剂体系混合充分后静置，按上下两相分开，取上相为固定相，下相为流动相，将固定相充满高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱，设定高速逆流色谱仪，在500~1000r/min转速下，以0.5~5ml/min的流速注入流动相，取步骤(2)得到的丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物，用上相、下相体积比1:1的混合溶剂溶解后进样，分别收集丹酚酸B的流出液和迷迭香酸的流出液，浓缩、干燥，得到丹酚酸B、迷迭香酸； 所述溶剂A为甲醇、乙醇、正己烷或异己烷，所述溶剂B为乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸正丁酯，所述溶剂C为甲醇、乙醇或丙酮，所述溶剂D为水。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中，乙醇溶剂的体积用量以粗粉的质量计为5~20L/kg，每次回流提取的时间为30-...

【专利技术属性】
技术研发人员：李行诺，童胜强，颜继忠，张文强，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33