本披露提供以高亲和力特异性结合CXCR4的人单克隆抗体。本披露还提供用于治疗患有CXCR4-表达的癌症，尤其是血液恶性肿瘤诸如多发性骨髓瘤、急性骨髓性白血病或非-霍奇金氏淋巴瘤的受试者的方法，包括将治疗有效量的包含本披露的抗-CXCR4抗体的药物组合物施用于受试者。本披露进一步提供用于治疗受试者中癌症的试剂盒，其包含一剂抗-CXCR4抗体和在本披露的治疗方法中使用所述抗-CXCR4抗体的说明书。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】血液恶性肿瘤用抗-CXCR4抗体的治疗贯穿本申请，通过括号中作者名字和日期，或通过专利号或公开号引用各种出版物。可在说明书结尾处权利要求之前找到这些出版物的全部引用。这些出版物的公开内容在此通过引用整体并入本申请，以更充分地描述此处所述和要求保护的本专利技术日期之前其中本领域技术人员所知的现有技术状况。然而，此处参考文献的引用将不会被认为承认所述参考文献为本专利技术的现有技术。专利
本申请涉及特异性结合至在细胞表面表达的天然人CXCR4的人单克隆抗体，和这些抗体在治疗癌症，尤其是血液恶性肿瘤，包括急性骨髓性白血病(AML)、多发性骨髓瘤(MM)和非-霍奇金氏淋巴瘤(NHL)诸如慢性淋巴性白血病(CLL)、滤泡性淋巴瘤(FL)和弥散大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的方法中的用途。专利技术背景趋化因子是约50种小蛋白质的家族，其调节细胞运输以及血管发生，并且在肿瘤微环境中也起重要的作用(Vicari等.,2002)。根据它们的结构，趋化因子被分为C-C趋化因子(包含半胱氨酸-半胱氨酸基序)或C-X-C趋化因子(包含半胱氨酸-X-半胱氨酸基序)。结合这种趋化因子的受体因而分别分为CCR家族或CXCR家族的成员。CXCR家族的一个成员是CXCR4受体(CXCR4)，亦称为CD184，一种由细胞外N端尾和三个细胞外环组成的七个-跨膜结构域G-蛋白偶联受体。CXCR4的细胞内羧基端与由β和γ亚基以及百日咳毒素-敏感的Giα亚基组成的异三聚体G蛋白偶联(Loetscher等.,1994)。至今，仅鉴定了CXCR4的一种配体，称为CXCL12的趋化因子(也已知为基质细胞-来源的因子-1或SDF-1，且本文中可互换使用)(Bleul等.,1996；Oberlin等.,1996)。结合CXCR4的CXCL12刺激磷脂酶C的活化并且随后导致胞质游离钙的上升。CXCR4的连接最终导致趋化性的诱发和迁移(Tachibana等.,1998；Zou等.,1998)。CXCR4也在胚胎形成、体内平衡和炎症中起作用。利用经工程处理的CXCR4或CXCL12缺乏的小鼠的研究提示在器官血管形成以及在免疫及造血系统中的CXCR4/CXCL12途径(Tachibana等.,1998)。此外，已显示CXCR4作为一种辅助受体针对T淋巴营养HIV-1分离物发挥作用(Feng等.,1996)。在健康成人中，CXCR4主要在造血系统细胞上表达，包括B和T细胞、单核细胞、巨噬细胞、NK和树突状细胞，以及CD34+骨髓(BM)祖细胞(Lee等.,1999)。低水平的CXCR4也在内皮和上皮细胞、星细胞和神经元上表达(Gupta等.,1998；Hesselgesser等.,1997)。已显示CXCL12诱导内皮细胞迁移和增殖，并且已显示与VEGF一起提高新血管生成(Guleng等.,2005)。也已在75％的癌症中发现CXCR4的过表达，包括白血病、淋巴瘤、胰腺、乳房、卵巢、肺、前列腺和结肠直肠肿瘤，并且与CXCL12之间的相互作用对于在BM微环境内归巢和维持造血干细胞是必不可少的(Mohle等.,1998)。普乐沙福(Plerixafor)(AMD3100；Mozobil)，CXCR4的双环拉胺类(bicyclam)拮抗剂，已显示动员干细胞进入血流中(Dar等.,2011)。AMD3100和AMD3465，另一种CXCR4拮抗剂双环拉胺类，通过阻断CXCR4/CXCL12信号提高AML肿瘤细胞的化疗增敏(Nervi等.,2009；Zeng等.,2009)。AML是血细胞骨髓系的快速生长的癌症，以积聚在BM中并且妨碍正常血细胞产生的异常白细胞的迅速生长为特征。AML中，CXCR4在BM细胞的CD34+部分上高表达。AML细胞上CXCR4的较低水平与导致更长的无复发和总存活率的更好的预后有关。较低的CXCR4受体表达减弱主要的AML细胞向在化疗-保护BM环境中表达的CXCL12迁移(Tavor等.,2004)。多发性骨髓瘤(MM)为由浆细胞的恶性增殖引起的一种癌症形式。非-霍奇金氏淋巴瘤后，其为第二种最常见的血液癌症，每年全世界大约80，000例新病例(美国20，000例)，并且大约62，000例死亡(美国10，500例死亡/年)(Jemal等.,2008；2009)。MM细胞优选在BM中生长，其中其妨碍正常血细胞安德正常抗体的产生，导致免疫缺陷、骨胳破坏、低钙血症、BM和肾衰竭。除了AML，CXCL12的血清水平在MM患者中升高，并且CXCR4表达在MM晚期阶段的表现，髓外浆细胞瘤中提高。此外，CXCL12/CXCR4轴的阻滞减弱MM细胞的迁移并且将这些细胞归巢至BM(Alsayed等.,2007)。非-霍奇金氏淋巴瘤包括除霍奇金氏淋巴瘤以外的淋巴细胞癌症不同组的任何一种。NHL可以出现在任何年龄并且常常通过淋巴结比正常更大、发烧和重量减轻为标志。许多不同类型的NHL在其严重程度上显著差异，从非常侵袭性的(生长迅速的)至懒惰的(生长迟缓的)类型，并且其可以由B细胞或T细胞的任一种组成。B细胞NHL包括伯基特氏淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病/小淋巴淋巴瘤(CLL/SLL)、弥散大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、成免疫细胞大细胞淋巴瘤、前体B-成淋巴细胞性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。T细胞NHL包括蕈样真菌病、间变性大细胞淋巴瘤和前体T-成淋巴细胞性淋巴瘤。据估计在2012美国将有大约70，000例新的NHL病例，其将导致约19，000例死亡。已经证实在检测的19种主要的NHL细胞系中的18种中高水平的CXCR4表达(Bertolini等.,2002)。也已表明CXCL12提高滤泡NHL细胞的迁移(Corcione等.,2000)，并且所述CXCR4-CXCL12回路似乎对于CLL细胞的迁移是至关紧要的(Burger等.,1999)。表现出许多合乎需要性质的人抗-CXCR4单克隆抗体之前已在PCT国际公开WO2008/060367(申请号PCT/US2007/021152)中描述，其要求2006年10月2日提交的美国临时申请No.60/827，851的优先权。这两个申请的公开内容在此通过引用整体并入本申请中。如WO2008/060367中公开的，体外试验证实这些单克隆抗体以低纳摩尔亲和力结合CXCR4-表达细胞，阻断CXCL12结合CXCR4-表达细胞，并且以低纳摩尔EC50值抑制CXCL12-诱导的迁移和钙流动。一种完全人单克隆抗体，BMS-936564，(WO2008/060367中命名为F7，并且之前也命名为MDX-1338，本文的所有三种命名可互换使用)，其在临床前研究中呈现出乎意料有益的抗-实体瘤特性，已选择用于进一步的调查以确定其体内抗血液癌症的活性并且进一步阐明其抗-癌症活性下的机理。BMS-936564抗体也已进入患有复发的/难治的AML、MM和NHL患者中的I期临床研究。专利技术概要本披露提供了分离的单克隆抗体，特别是结合人类CXCR4并且表现出多种治疗抗体所希望的性质的人类单克隆抗体。这些特性包括以低nM亲和力结合在细胞表面表达的天然人CXCR4、以50nM或更小的用于抑制的EC50抑制SDF-1结合人CXCR4、以3nM或更小的用于本文档来自技高网...
【技术保护点】
用于治疗患有CXCR4‑表达癌症的受试者的方法，包括将治疗有效量的特异性结合癌细胞表面表达的CXCR4受体的抗体或其片段给予所述受试者。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.11.09 US 61/557,815;2011.12.09 US 61/569,1131.特异性结合患有多发性骨髓瘤的受试者中多发性骨髓瘤细胞表面表达的CXCR4受体的抗体或其片段在制备用于直接抑制多发性骨髓瘤细胞的生长和/或抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖和/或诱导受试者中的多发性骨髓瘤细胞凋亡的药物组合物中的用途。2.权利要求1的用途，其中所述受试者是人并且所述抗体或其片段结合人CXCR4受体。3.权利要求1的用途，其中所述多发性骨髓瘤是复发的或难治的多发性骨髓瘤。4.权利要求1-3中任一项的用途，其中所述药物组合物中的所述抗体或其片段供用于作为单一疗法施用于所述受试者。5.权利要求1-3中任一项的用途，其中所述抗体或其片段抑制CXCR4受体的活性并且提高多发性骨髓瘤细胞对化疗剂的敏感性。6.权利要求1-3中任一项的用途，其中所述药物组合物中的所述抗体或其片段供用于与外科手术、放射和/或一种或多种治疗剂联合施用于受试者。7.权利要求1-3中任一项的用途，其中所述药物组合物中的所述抗体或其片段供用于与至少一种化疗剂联合施用于受试者。8.权利要求7的用途，其中所述至少一种化疗剂是：(a)雷利度胺和/或地塞米松；和/或(b)硼替佐米和/或地塞米松。9.权利要求1-3中任一项的用途，其中所述抗体或其片段是嵌合的、人源化的、或人抗体或其片段。10.权利要求1-3任一项的用途，其中所述抗体或其片段包括重链可变区中的CDR1、CDR2和CDR3结构域，所述重链可变区包括SEQIDNO：25中所述序列的连续相连氨基酸，和轻链可变区中的CDR1、CDR2和CDR3结构域，所述轻链可变区包括SEQIDNO：29中所述序列的连续相连氨基酸。11.权利要求1-3任一项的用途，其中所述抗体或其片段包括包含具有SEQIDNO：1所述序列的连续相连氨基酸的重链可变区CDR1，具有SEQIDNO：5所述序列的连续相连氨基酸的重链可变区CDR2，具有SEQIDNO：9所述序列的连续相连氨基酸的重链可变区CDR3，具有SEQIDNO：13所述序列的连续相连氨基酸的轻链可变区CDR1，具有SEQIDNO：17所述序列的连续相连氨基酸的轻链可变区CDR2，和具有SEQIDNO：21所述序列的连续相连氨基酸的轻链可变区CDR3。12.权利要求1-3中任一项的用途，其中所述抗体或其片段包含：包含具有SEQIDNO:25所述序列的连续相连氨基酸的重链可变区；和包含具有SEQIDNO:29所述序列的连续相连氨基酸的重链可变区。13.权利要求1-3中任...
【专利技术属性】
技术研发人员：MR库恩，C潘，JM卡德雷利，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。