一种地黄多糖的制备方法技术

一种地黄多糖的制备方法。该方法包括如下步骤：(1)将地黄粉碎；(2)在粉碎的地黄中加入水、纤维素酶，调节pH，搅拌，加热下酶解；(3)酶解后进行分离，取滤液；(4)在滤液中加乙醇溶液并用碱调节溶液的pH沉淀多糖，收集沉淀；(5)对收集的沉淀进行干燥，得到地黄多糖产品。本发明专利技术方法得到的地黄多糖纯度高，工艺简单，使用的乙醇溶液能够回收利用，对环境无污染，适合工业生产。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】。该方法包括如下步骤：(1)将地黄粉碎；(2)在粉碎的地黄中加入水、纤维素酶，调节pH，搅拌，加热下酶解；(3)酶解后进行分离，取滤液；(4)在滤液中加乙醇溶液并用碱调节溶液的pH沉淀多糖，收集沉淀；(5)对收集的沉淀进行干燥，得到地黄多糖产品。本专利技术方法得到的地黄多糖纯度高，工艺简单，使用的乙醇溶液能够回收利用，对环境无污染，适合工业生产。【专利说明】
本专利技术天然药物领域，特别涉及一种用酶解法和乙醇沉淀从地黄中提取地黄多糖的方法。
技术介绍
地黄为玄参科植物地黄的干燥根茎。生地黄具有滋阴清热作用，熟地黄具有补血滋阴、益精填髓的功效，是优良的滋阴补血药，被誉为“壮水之主，补血之君”，广泛用于阴虚、血虚所致的各种疾病。地黄多糖是地黄中的有效成分之一。许多植物多糖具有免疫促进作用。抗肿瘤作用，抗衰老活性，降血糖活性，抗病毒活性，以及降血脂活性等。而且多糖因其特殊的生物活性和无毒副作用而被广泛用于临床用药、疫苗和保健食品。多糖作为提高机体免疫功能的保健品已被广泛开发，但许多多糖产品仅仅停留在保健品阶段，未能开发成药物，主要原因是多糖的分离纯化困难，技术不过关。如CN101402691A公开了一种用醇沉淀和氯化钙脱蛋白制备熟地黄多糖的方法，包括如下步骤:将熟地黄加8倍体积重量的水，在98~100°C浸提4H，过滤，药渣再加8倍原药物体积重量的水在98~100°C浸提4H，挤尽药渣水分，过滤，合并滤液，浓缩至相当于原药材0.5G/ML,加乙醇搅拌使含醇量达80 %，缓加快搅，醇沉24h，抽滤，用4倍药材体积重量的95%乙醇洗涤沉淀，挥至无醇味，加水溶解至药材体积重量的2倍，调PH至8~9，加入无水氯化钙，使W/V达7%，溶解，放置室温，离心，取上清液浓缩至稠膏，95°C减压干燥即得。但该方法的脱蛋白效率仅为50%左右，熟地黄多糖保存率70%左右，距离工业生产的要求仍有一定距离。CN101041675A公开了一种地黄提取地黄寡糖、地黄多糖的方法，是将地里收获的鲜地黄用清水洗净、磨碎或干地黄水浸I~10小时后磨碎，用离心机高速离心得地黄滤液和地黄渣，而后将滤液通过50000D (道尔顿)超滤膜、10000D超滤膜、1000D钠滤膜、500D钠滤膜的多级分离，将10000D超滤膜分离后的膜上液用真空蒸发器加热浓缩至含糖量10~50%,冷却后加I~9倍乙醇搅拌0.1~I小时，过滤弃液，滤渣在100°C以下烘干可得地黄多糖成品，将500D钠滤膜分离后的膜上液用真空蒸发器浓缩至含糖量10~50%，喷雾干燥可得含水苏糖> 80%地黄寡糖成品。该方法的地黄多糖的提取率仍然较低且工艺复杂。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种高效率、高纯度的地黄多糖的制备方法。为达上述目的，本专利技术采用如下技术方案:，包括如下步骤:(I)将地黄粉碎；(2)在粉碎的地黄中加入水、纤维素酶，调节pH，搅拌，加热下酶解； (3)酶解后进行分离，取滤液；(4)在滤液中加入乙醇溶液并用碱调节溶液的pH沉淀多糖，收集沉淀；(5)对收集的沉淀进行干燥，得到地黄多糖产品。作为优选技术方案，本专利技术所述的制备方法，步骤(2)加入的水的质量为地黄粉末质量的3-15倍，例如为5倍、9倍、13倍等，优选为6-8倍，纤维素酶的含量3_6%，例如为3.3%,3.9%,4.5%,5.2 %、5.8%等，纤维素酶的含量为纤维素酶占加入纤维素酶后的混合物总量的比例。作为优选技术方案，本专利技术所述的制备方法，步骤(2)中的pH为2-7，例如为2.5、3.4,4.1,4.9,5.2,5.8,6.6 等，优选为 4-5。作为优选技术方案，本专利技术所述的制备方法，步骤(2)中酶解的温度为30-70°C，例如为33°C、39°C、45°C、53°C、61°C、69°C等，优选为40-60°C ;酶解的时间为Ih以上，例如为 1.5h、2.3h、2.9h、4.0h,5.5h、6.6h 等，优选为 2h。本专利技术的分离可以不作具体限定，只要能达到有效分离的方法均可用于本专利技术。但是作为优选技术方案，本专利技术所述的制备方法，步骤(3)所述的分离采用离心分离。优选的离心的条件为:离心的转速为5000g，离心的时间为30min。作为优选技术方案，本专利技术所述的制备方法，步骤(4)中乙醇溶液的质量浓度为70% 以上，例如为 75%、81%、85%、89%、92%、96%等，优选为 85-95% ;pH 为 7.5 以上，优选为8-9。作为优选技术方案，本专利技术所述的制备方法，步骤(4)中的碱为可挥发性碱性盐，优选为碳酸氢铵。作为优选技术方案，本专利技术所述的制备方法，步骤(5)中的干燥通过减压蒸馏进行。本专利技术的使用酶解技术提高多糖的提取率，同时在醇沉淀的时候使用碱性条件达到脱除蛋白的目的，得到的地黄多糖提取率高于90%，脱蛋白效率可达85%左右，更易实现扩大生产的目的。【具体实施方式】为更好地说明本专利技术，便于理解本专利技术的技术方案，本专利技术的典型但非限制性的实施例如下:实施例1:(I)粉碎，取地黄20g粉碎；(2)酶解，在粉碎的地黄中加入水120ml、纤维素酶3%，调节pH为4.0，充分搅拌，在40°C下酶解2小时；(3)离心分离，酶解后转速5000g，离心30分钟，取滤液；(4)醇沉淀，在滤液中加入85%乙醇溶液，并用碳酸氢铵调节pH为8.0，沉淀多糖，收集沉淀；(5)干燥，对收集的沉淀进行减压蒸馏，得到地黄多糖产品，其多糖提取率91.3%，脱蛋白效率85.1%0实施例2:(I)粉碎，取地黄20g粉碎；(2)酶解，在粉碎的地黄中加入水160ml、纤维素酶6%，调节pH为5.0，充分搅拌，在60°C下酶解2小时；(3)离心分离，酶解后转速5000g，离心30分钟，取滤液；(4)醇沉淀，在滤液中加入95%乙醇溶液，并用碳酸氢铵调节pH为9.0，沉淀多糖，收集沉淀；(5)干燥，对收集的沉淀进行减压蒸馏，得到地黄多糖产品，其多糖提取率93.5%，脱蛋白效率86.3%。实施例3:(I)粉碎，取地黄20g粉碎；(2)酶解，在粉碎的地黄中加入水300ml、纤维素酶5%，调节pH为3.0，充分搅拌，在30°C下酶解4小时；(3)离心分离，酶解后转速5000g，离心30分钟，取滤液； (4)醇沉淀，在滤液中加入70%乙醇溶液，并用碳酸氢铵调节pH为7.6，沉淀多糖，收集沉淀；(5)干燥，对收集的沉淀进行减压蒸馏，得到地黄多糖产品，其多糖提取率92.4%，脱蛋白效率83.1%。实施例4:(I)粉碎，取地黄20g粉碎；(2)酶解，在粉碎的地黄中加入水80ml、纤维素酶4%，调节pH为6.5，充分搅拌，在50°C下酶解I小时；(3)离心分离，酶解后转速5000g，离心30分钟，取滤液；(4)醇沉淀，在滤液中加入80%乙醇溶液，并用碳酸氢铵调节pH为10.5，沉淀多糖，收集沉淀；(5)干燥，对收集的沉淀进行减压蒸馏，得到地黄多糖产品，其多糖提取率91.7%，脱蛋白效率84.9% ο 申请人:声明，本专利技术通过上述实施例来说明本专利技术的详细方法，但本专利技术并不局限于上述详细方法，即不意味着本专利技术必须依赖上述详细方法才能实施。所属
的技术人员应该明了，对本专利技术的任何改进，对本专利技术产品各原料本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种地黄多糖的制备方法，包括如下步骤：(1)将地黄粉碎；(2)在粉碎的地黄中加入水、纤维素酶，调节pH，搅拌，加热下酶解；(3)酶解后进行分离，取滤液；(4)在滤液中加入乙醇溶液并用碱调节溶液的pH沉淀多糖，收集沉淀；(5)对收集的沉淀进行干燥，得到地黄多糖产品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孔英俊，张贵锋，苏志国，康跻耀，
申请(专利权)人：中国科学院过程工程研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11