湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物制造技术

本发明专利技术公开了湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物，将荞麦蛋白、糖、水按1:1:1000～1:7:1000的质量比混合，调pH到10～12，50～70℃水浴90～120min，冰浴5～10min，-15～-25℃冷冻6-12h后进行冷冻干燥。本发明专利技术还公开了由以上方法得到的荞麦蛋白-糖接枝物及其在功能性食品的应用。本发明专利技术还提供了一种产量较高的荞麦蛋白的提取方法，经处理，得到了荞麦蛋白，是一种优质的植物蛋白。本发明专利技术制备方法简单，效果良好。测定上述荞麦蛋白-糖接枝物的抗氧化效果，并用相同量的糖类、荞麦蛋白、抗坏血酸作对照，结果显示，荞麦蛋白-糖接枝物表现出良好的抗氧化性。

【技术实现步骤摘要】
湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物
本专利技术属于植物蛋白领域，具体涉及湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物及其应用。
技术介绍
植物蛋白具有资源丰富、价格低廉、能量转化效率高、几乎不含胆固醇和饱和脂肪酸等优点，逐渐成为人类主要的蛋白质来源。荞麦属于寥科荞麦属双子叶植物，具有较高的营养价值和药用价值，被现代营养学家誉为21世纪有前途的最风行的绿色食品。荞麦蛋白是荞麦中的主要生物活性成分，它不同于谷类作物蛋白，荞麦蛋白质主要是谷蛋白、水溶性清蛋白和盐溶性球蛋白等。这类蛋白质的粘性差，无面筋性，近似于豆类植物蛋白，其蛋白质质量优于大米、小麦和玉米蛋白。从氨基酸组成来看，荞麦蛋白含有19种氨基酸，其中包括人体必需的8种氨基酸，且氨基酸配比适宜，符合或超过联合国粮农组织和世界卫生组织对食物蛋白质中必需氨基酸含量规定的指标，与鸡蛋蛋白质的营养相似。荞麦蛋白还具有降低液胆固醇、抑制脂肪蓄积、改善便秘、抗衰老、抑制有害物的吸收等生理功能。荞麦蛋白具有较高的持水性、乳化性、起泡性和咀嚼性及良好的生理生化性质。这为荞麦蛋白在食品工业的广泛应用提供了基础。这正是本专利技术的出发点。美拉德反应，又称羰氨反应，是指含有氨基的化合物和含有羰基的化合物之间经缩合、聚合，最终生成类黑精的反应。由于其产物是棕色的，也被称为褐变反应。反应物中羰基化合物包括还原糖、醛、酮；氨基化合物包括氨基酸、肽、蛋白质、胺。MRPs中含有类黑精、还原酮及一系列含1、H的杂环化合物，它们有一定的抗氧化性能。通常美拉德反应所需要的氨基化合物和羰基化合物的选择范围非常广泛，但是接枝物的抗氧化性各有差异。选择适当的氨基化合物和羰基化合物，可以显著提高接枝物的抗氧化性。湿热法是以液相为反应体系，一般用于蛋白质与单糖或双糖的接枝反应中。其反应的初始步骤与干热法类似，将蛋白质和糖按照一定的糖配比混合，并用特定PH值的缓冲溶液将其溶解，搅拌均匀后，利用水浴或者油浴进行反应，反应结束后立即冰浴。湿热法的反应时间相对于干热法来说要短，通常适用于蛋白质-单糖(或双糖)接枝物的制备。冷冻干燥是将待干燥物快速冻结后，再在高真空条件下将其中的冰升华为水蒸气而去除的干燥方法。由于冰的升华带走热量使冻干整个过程保持低温冻结状态，有利于保留一些生物样品的活性。因此用冷冻干燥法制备一种荞麦蛋白-木糖接枝物。与很多化学和酶法对蛋白质改性的方法相比，美拉德反应的方法具有很好的安全性；此外，该法还能极大的改善蛋白乳化性，改善不溶的面筋蛋白溶解性。这种以美拉德反应制备的荞麦蛋白-糖接枝物可用作乳化剂、抗氧化剂和抑菌剂，可应用于食品、药品和化妆品中。荞麦蛋白被糖类接枝后，其消化率增加，利于人体吸收，本身的很多功能性质也会有所提高。因此，本专利技术以荞麦蛋白为氨基化合物，以糖类为羰基化合物，利用湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物。以羟基自由基(.0Η)的清除率，二苯基苦基苯肼自由基(DPPH.)的清除率和超氧阴离子((V.)的清除率为考察指标，利用单因素试验，确定制备荞麦蛋白-糖接枝物各因素的最佳参数。
技术实现思路
本专利技术的目的在于由湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物，制备方法简单、效果良好、易于生产。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的:湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物，荞麦蛋白、糖、水按1:1:1000?1:7:1000的质量比混合，调pH到10?12，50?70 °C水浴90?120min，冰浴5?IOmin, -15?_25°C冷冻6?12h后冷冻干燥。优选地，所述糖为单糖。优选地，所述荞麦蛋白由荞麦粉经碱溶酸沉法的提取方法制备。优选地，所述提取方法的操作步骤如下:第一步、取质量比为1:6?1:14的荞麦粉和水混合，调节pH到10?12，搅拌，离心得到上清液；调节所述上清液的pH到4.5，离心获得沉淀物；第二步、将第一步所得的沉淀物经透析、冷冻干燥得荞麦蛋白。优选地，第一步中，所述搅拌是在2(TC磁力搅拌30?120min ；所述离心是10 ?30°C下，4000 ?5000r/min 离心 10 ?20min。优选地，所述第二步具体操作为所得的沉淀物用流动水透析18?24h，用去离子水透析18?24h后，低温静置18?24h，经冷冻干燥获得荞麦蛋白粉末。本专利技术还提供所述湿热法制备的荞麦蛋白-糖接枝物。本专利技术还提供所述荞麦蛋白-糖接枝物在功能性食品中的应用。本专利技术提供了一种荞麦蛋白的制备方法，经处理，得到了荞麦蛋白，是一种优质的植物蛋白。这种蛋白与糖经过湿热法美拉德反应，制备了荞麦蛋白-糖接枝物。本专利技术制备方法简单，效果良好。测定上述荞麦蛋白-糖接枝物的抗氧化效果，并用相同量的糖、荞麦蛋白、抗坏血酸作对照，结果显示，荞麦蛋白-糖接枝物表现出良好的抗氧化性。【附图说明】本专利技术附图4幅，图1、荞麦蛋白-糖接枝物对羟自由基(.0H)的清除；图2、荞麦蛋白-糖接枝物对二苯基苦基苯肼自由基(DPPH.)的清除；图3、荞麦蛋白-糖接枝物对超氧阴离子(02_.)的清除；图4、荞麦蛋白-糖接枝物的溶解率。【具体实施方式】下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。以下结合具体的实例对本专利技术的技术方案做进一步说明:本专利技术所用荞麦粉为市售普通荞麦粉。实施例1荞麦蛋白的制备荞麦蛋白的提取方法如下:第一步、取荞麦粉与水按1:10的质量比混合，用Imol/LNaOH调pH到10后，20°C磁力搅拌30min ；20°C >5000r/min离心20min得到上清液；再用lmol/LHCl调pH到4.5,产生沉淀后2(TC、4000r/min离心15min,离心获得沉淀物；第二步、所得的沉淀物用流动水透析18?24h，用去离子水透析18?24h后，低温静置18?24h，经冷冻干燥获得米白色荞麦蛋白粉末。实施例2荞麦蛋白-木糖接枝物的制备及抗氧化性的研究—、将所得米白色荞麦蛋白粉末与木糖制备成荞麦蛋白-木糖接枝物，接枝物的的原材料是以荞麦蛋白为氨基化合物，以木糖为羰基化合物:将荞麦蛋白、木糖、水按1:5:1000的质量比混合，用Imol/LNaOH调pH到12，在温度50°C的条件下水浴120min，反应结束后立即冰浴5min，然后-20°C冷冻6?12h，冷冻干燥成粉末得到荞麦蛋白-木糖接枝物粗产品，4 V条件下保存。二、将所得荞麦蛋白和荞麦蛋白-木糖接枝物进行抗氧化性比对1、荞麦蛋白和荞麦蛋白-木糖接枝物对羟基自由基(.0H)清除率的测定取磷酸盐缓冲液(0.15mol/L，pH7.4) 1.5mL, 1.10-菲咯啉(0.75mmol/L) 1.0mL,新配制的硫酸亚铁溶液(0.75mmol/L) ImL,再加入浓度为1.2mg/mL的荞麦蛋白水溶液或荞麦蛋白-木糖接枝物水溶液lmL，最后再加入0.01 %的过氧化氢1.0mL,混匀后于37°C恒温水浴中保温30min，冷却后在530nm处测吸光度值。以蒸馏水调零，空白组以等体积去离子水代替样品溶液，对照组以等体积去离子水代替样品溶液和过氧化氢溶液，以同一浓度的抗坏血酸水溶液代替样品作对比实验。结果按下式计算:清除率(％ ) = [A对照-A样品/A对照-A空白]X 100测定荞麦蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白‑糖接枝物，其特征在于荞麦蛋白、糖、水按1:1:1000～1:7:1000的质量比混合，调pH到10～12，50～70℃水浴90～120min，冰浴5～10min，‑15～‑25℃冷冻6～12h后进行冷冻干燥。

【技术特征摘要】
1.湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物，其特征在于荞麦蛋白、糖、水按1:1:1000?1:7:1000的质量比混合，调pH到10?12，50?70°C水浴90?120min，冰浴5?lOmin，-15?_25°C冷冻6?12h后进行冷冻干燥。2.根据权利要求1所述的湿热法美拉德反应制备荞麦蛋白-糖接枝物，其特征在于所述糖为单糖。3.根据权利要求1所述的湿热法制备荞麦蛋白-糖接枝物，其特征在于所述荞麦蛋白由荞麦粉经碱溶酸沉的提取方法制备。4.根据权利要求3所述的湿热法制备荞麦蛋白-糖接枝物，其特征在于所述提取方法的操作步骤如下: 第一步、取质量比为1:6?1:14的荞麦粉和水混合，调节pH到10?12，搅拌，离心得到上清液；调节所述上清液的...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶淑红，王心宇，王际辉，
申请(专利权)人：大连工业大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21