八肽胆囊收缩素在制药中的应用制造技术

本发明专利技术涉及八肽胆囊收缩素在制药领域中的新用途。该产品具有显著改善长期使用METH引起的行为变化，有利于预防和治疗METH长期使用所致神经系统并发症的发生和发展；还可以显著减少METH引起的神经细胞的死亡，预防长期使用METH引起的神经损伤；还可抑制METH引起的小胶质细胞促炎细胞因子的生成，表明CCK-8发挥中枢抗炎作用，对改善长期使用METH引起的神经系统并发症具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
八肽胆囊收缩素在制药中的应用
本专利技术涉及八肽胆囊收缩素(CCK-8)的用途，具体的说是八肽胆囊收缩素在制药中的应用。
技术介绍
胆囊收缩素(cholecystokinin，CCK, PZ)，又称缩胆囊素，是从猪小肠提取物中分离出来的、由33个氨基酸组成的多肽，于1928年、1943年被证明并提纯。CCK广泛存在于胃肠道和中枢神经系统，其通过与靶细胞膜上的特异性受体CCKR (cholecystokininreceptor，胆囊收缩素受体)结合而发挥细胞调节作用。CCKR是细胞膜上的一类糖蛋白，属于G蛋白偶联超家族。不同结构类型的CCKR组织分布不同，介导不同的细胞效应。1980 年 Sankaran 等在膜腺腺泡中发现了 CCKlR (cholecystokinin I receptor,胆囊收缩素I受体)，同年在脑中又发现了一种药理学性质完全不同的CCK2R (cholecystokinin 2receptor,胆囊收缩素2受体)。CCKlR主要分布在外周组织，但也有部分在中枢神经组织分布；CCK2R主要存在于中枢神经组织，但也有部分在外周组织分布。CCK与其受体结合后发挥多种生理功能。CCK在胃肠道的主要生理作用是刺激胰酶分泌与合成，增强胰碳酸氢盐分泌和胃排空，刺激胆囊收缩与奥狄氏括约肌松弛，还可增加肝胆汁分泌，调节小肠、结肠运动等多方面功能；在中枢神经系统发挥神经递质的作用，参与了痛觉感受、食欲调节、记忆等生理过程，亦有调节垂体激素释放的作用，与惊恐、焦虑、癫痫等病理表现有关，同时，CCK还具有控制中枢呼吸节律及调节心血管紧张的作用。用胰蛋白酶消化33肽的CCK，可使其羧基端8个氨基酸解裂出来，称为八肽胆囊收缩素(CCK-8)，CCK-8具有整个CCK分子的全部活性，是胆囊收缩素-促胰酶素分子的最小活性片段。在CCK分子羧基端第7位的酪氨酸是硫酸盐化的，其上的硫酸酯基团的存在为发挥其生物活性所必需。CCK-8的氨基酸序列为H-Asp-Tyr (SO3H)-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2，分子式为C49H62NltlO16S3，分子量为1143.27。已知可以用作胆囊收缩诊断试剂。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供八肽胆囊收缩素的新用途，即在制药中的应用。本专利技术的目的是这样实现的: 本专利技术提供了八肽胆囊收缩素在制备治疗或改善长期使用甲基苯丙胺引起的行为异常药中的应用。本专利技术提供了八肽胆囊收缩素在制备治疗或预防甲基苯丙胺引起神经损伤药中的应用。本专利技术提供了八肽胆囊收缩素在制备治疗或预防甲基苯丙胺引起的中枢炎症损伤药中的应用。本专利技术通过如下药理实验验证了八肽胆囊收缩素在制药领域中所具有的上述新用途。制备CCK-8注射液:从美国Sigma公司购买硫酸化的CCK-8，用生理盐水将33.7μ L、25%~28%氨水稀释至10 mL,得0.05 mo I/L氨水(现用现配)。将5 mg CCK-8与0.05 mol/L氨水5 mL充分振荡混匀，即得I mg/mL CCK-8溶液，50 μ L/管分装，冰浴操作，_80°C保存，有效期半年。用前用生理盐水稀释至I mg/L浓度，避免反复冻融。UCCK-8抑制甲基苯丙胺(METH)引起的C57BL/6J小鼠行为敏化 试验动物的准备: ①试验动物:C57BL/6J小鼠(SPF级)，体重18~22g，由北京维通利华实验动物有限公司提供。②饲养条件:小鼠随机分笼饲养，6只/笼,室温22±1°C,湿度50%±10%，光照时间7:00-19:00，食水不限。③40mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠后，将其固定在小鼠脑立体定位仪上，进行侧脑室埋管手术。手术后适应性饲养(单笼饲养)I周，然后随机分组，每组12只。所有小鼠在实验开始前先预适应3d，并观察记录30min内自发行为活动数据，以作为基础值以及筛除离群个体的依据。1.1、建立行为敏化模型 行为敏化模型的建立过程分为3个阶段:行为敏化诱导期、行为敏化戒断期与行为敏化检测期。取准备好的试验动物72只，随机分为6组，每组12只，第I组为对照组，第2飞组为实验组，具体如下: 第I组:生理盐水组(Saline组)； 第 2 组:METH (lmg/kg)组； 第 3 组:METH (2mg/kg)组； 第 4 组:CCK-8 (0.1yg)组; 第 5 组:CCK-8 (0.01yg)组； 第 6 组:CCK-8 (0.0Olyg)组。其中，第广3组小鼠采用腹腔注射(ip)方式给药，每天早上同一时间测体重，实验中按10mL/kg给药体积计算给药量；第4飞组小鼠采用微量加样器侧脑室给药，给药体积为2 μ L/只。1.1.1行为敏化诱导期(dl-d7): 第I组小鼠按I次/d腹腔注射给予生理盐水，dl、d3、d5天给予生理盐水后，立即将小鼠放入自发活动箱中，记录30min内小鼠的自发行为活动数据。第2组小鼠按lmg/kg、I次/d腹腔注射给予METH，dl、d3、d5天给予METH后，立即将小鼠放入自发活动箱中，记录30min内小鼠的自发行为活动数据。第3组小鼠按2mg/kg、l次/d腹腔注射给予METH，dl、d3、d5天给予METH后，立即将小鼠放入自发活动箱中，记录30min内小鼠的自发行为活动数据。第4、5、6 组小鼠分别按 0.1 μ g/2 μ L、0.01 μ g/2 μ L、0.001 μ g/2 μ L 的量侧脑室注射给予CCK-8，dl、d3、d5天给予CCK-8后15min将小鼠放入自发活动箱中，记录30min内小鼠的自发行为活动数据。 1.1.2行为敏化戒断期(d8_dl3):第I飞组小鼠正常条件下饲养6天，不进行任何处理。1.1.3行为敏化检测期(dl4): 第I组小鼠按I次/d腹腔注射给予生理盐水，给予生理盐水后立即将小鼠放入自发活动箱中，记录30min内小鼠的自发行为活动数据。第2组小鼠按lmg/kg、I次/d腹腔注射给予METH，给予METH后立即将小鼠放入自发活动箱中，记录30min内小鼠的自发行为活动数据。第3组小鼠按2mg/kg、I次/d腹腔注射给予METH，给予METH后立即将小鼠放入自发活动箱中，记录30min内小鼠的自发行为活动数据。第4、5、6 组小鼠分别按 0.1 μ g/2 μ L、0.01 μ g/2 μ L、0.001 μ g/2 μ L 的量侧脑室注射CCK-8，注射CCK-8后15min后将小鼠放入自发活动箱中，记录30min内小鼠的自发行为活动数据。对小鼠的自发行为活动进行记录的数据包括:总距离、活动速度、活动范围。对第f 3组小鼠自发行为活动的数据进行统计整理，结果如图1所示。由图1可以看出，dl4天给予METH后，第2组、第3组小鼠的自发活动距离明显增高，另外通过比较第2组与第3组数据可以知道，METH时间、剂量依赖性的增高动物的活动距离，综合以上分析，行为敏化模型制备成功。对第1、4、5组小鼠自发行为活动的数据进行统计整理，结果如图2所示。由图2可以看出，CCK-8侧脑室给药对动物自发活动无显著影响，CCK-8本身不能诱导动物形成行为敏化。1.2、METH (lmg/kg组)诱导的行为敏化本文档来自技高网...

【技术保护点】
八肽胆囊收缩素在制备治疗或改善长期使用甲基苯丙胺引起的行为异常药中的应用。

【技术特征摘要】
1.八肽胆囊收缩素在制备治疗或改善长期使用甲基苯丙胺引起的行为异常药中的应用。2.八肽胆囊收缩素在制备治疗或预...

【专利技术属性】
技术研发人员：丛斌，马春玲，文迪，苟红艳，安美玲，
申请(专利权)人：河北医科大学，
类型：发明
国别省市：河北;13