一种双酶合成L-叔亮氨酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种双酶合成L-叔亮氨酸的方法，利用亮氨酸脱氢酶与异丙醇脱氢酶偶联介导辅酶NADH，且在反应液中有终浓度10%左右的异丙醇作用下，异丙醇脱氢酶能迅速将NAD+还原为NADH，使反应速度加快，反应时间缩短，提高反应效率，增加了时空产率，同时双酶的用量也较低，不超过底物质量的3%，反应成本下降，反应产物纯度达到99%ee以上，不需在再重结晶拆分。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种双酶合成L‑叔亮氨酸的方法，其特征在于步骤如下：a、配置反应液A：将0.25～1.0g三甲基丙酮酸、质量百分浓度为30%体积为0.47mL的氨水、0.5mL异丙醇加入至摩尔浓度为0.63M体积为2mL的甲酸铵溶液中，搅拌均匀，调节pH值为8.0～9.5；b、配置反应液B：将7.5mg亮氨酸脱氢酶、7.5mg异丙醇脱氢酶和2.5mg辅酶NADH溶于水中，搅拌均匀，配成2.03mL酶溶液；c、将反应液A加入到反应液B中，在反应温度25～40℃，搅拌速率每分钟400转下反应4～12小时，反应完毕，过滤，得到L‑叔亮氨酸固体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄勇开，托马斯道斯曼，纪摇摇，徐青，张城孝，
申请(专利权)人：宁波酶赛生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33