一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法技术

本发明专利技术涉及一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法。本发明专利技术采用改良MS基本培养基和温室水培快繁的方法，获得健康和健壮的脱毒种苗，满足蛭石、珍珠岩基质等无土栽培方式的需要，从而进行健康和高效的甘薯原原种生产。本发明专利技术不仅保持了组培苗原有的无病毒、无菌和无虫的特点，而且创新了传统的育苗技术，大大加快了脱毒种苗的生长速度，缩短了繁殖周期，生产成本大幅降低。水培苗生产操作程序简单，根据生产需要可于4-6月大规模生产水培壮苗，由此解决了传统育苗难以达到低成本、快速、规模化生产脱毒种苗的难题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
甘薯是无性繁殖作物，主要通过茎蔓、薯块和秧苗进行繁殖，在栽培过程中易受病毒侵染。因此利用茎尖分生组织培养脱毒甘薯种苗是目前国际上防治甘薯病毒病、提高甘薯产量和品质唯一有效的方法。脱毒甘薯原原种具有品种纯度高、无病毒，储运性能好、增产效果明显等优点，且薯块大小均匀，表面光洁，商品性能好，市场售价高，经济效益可观。甘薯原原种的生产已成为甘薯种薯快繁的主要措施，通过水培方式对脱毒苗的剪尖扦插，加快脱毒甘薯繁殖速度，提高繁殖系数，提高生产效率，缩短生产周期，降低生产成本，具有重要经济效益，同时水培生产既可减少外界不良条件的影响，又可人为控制植株生长，便于集中管理和研究利用。目前关于甘薯脱毒试管苗快繁与壮苗技术的主要状况为:将试管苗在温室炼苗5-7d，然后按株距6cm，行距6cm栽植于蛭石与珍珠岩基质中，温度控制在26±2°C左右，保持基质湿润，湿度在80-85%，待苗长到15-20cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗。此技术是在温室的基质上进行快繁和壮苗。但基质成本高，重复使用很难消毒彻底，感染病虫害的可能性很大。基质栽植密度为400株/平方米，以苗还苗周期为15-20天，繁殖系数较低，生产周 期较长。所以基质栽培不能很好的进行快繁和壮苗。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种甘薯试管苗通过水培方式低成本快繁和壮苗的方法，使甘薯脱毒苗经过一段时间的水培后，再进行无土栽培，提高甘薯脱毒苗成活率，能够大大加快脱毒种苗的生长速度，缩短繁殖周期，生产成本大幅降低。同时水培生产可减少外界不良条件的影响，又可人为控制植株生长，便于集中管理和研究利用。由此解决了传统育苗难以达到低成本、快速、规模化生产脱毒种苗的难题。本专利技术，其特征在于包括如下步骤:a.外植体处理:将选取的薯块在温室育苗，选取茎顶端长芽段，用自来水冲洗，经消毒处理；b.茎尖分生组织培养:在工作台上剥离茎尖，接种到MS加激素的培养基试管中培养，茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶MS培养基上继续培养，当幼苗长出时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测:组培茎尖苗经过病毒检测，确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养:经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将无毒苗切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，经腋芽萌发，长成苗；e.温室消毒:为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，先对整个温室进行熏蒸，再进行培养盘消毒；f.炼苗:筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，炼苗；g.诱导根原始体形成:将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，保留原有根系，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养:将栽好的水培苗置于温室中，出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；1.水培苗生长培养:将栽好的水培苗置于温室中水培苗，将生根营养液换成继代增殖生长营养液水培苗增殖扩繁:水培苗在防虫温室培养，水培苗剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽:脱毒苗移栽到蛭石或珍珠岩基质中。本专利技术，其特征在于包括如下步骤:a.外植体处理:选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗，当苗高20cm，选取茎顶端2cm长芽段，剪去肉眼可见叶片，用自来水冲洗，经70%酒精浸泡，再用0.1%升汞溶液消毒，5%次氯酸钠溶液消毒处理，无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养:在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖，接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28 °C条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测:组培茎尖苗经过病毒检测，才能确认为无毒苗，病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法，先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相，将长势弱，叶片黄化、黄脉和花叶等症状明显的带毒苗淘汰去除，再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上，15d后观察结果，如有明脉、褪绿斑、花叶等症状，即为带毒苗，淘汰去除，一般需要重复嫁接2次，未显症状者，可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养:经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗I叶I节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28°C条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30d后长成5-7片叶的成苗，不断切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒:为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗:筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成:将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养:将栽好的水培苗置于温度26±2°C温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；1.水培苗生长培养:将栽好的水培苗置于温度26±2°C温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；1.水培苗增殖扩繁:水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽:当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。本专利技术，其特征在于包括如下步骤:a.外植体处理:选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗，当苗高20cm，选取茎顶端2cm长芽段，剪去肉眼可见叶片，用自来水冲洗30min,经70%酒精浸泡2 5s,再用0.1 %升萊溶液消毒30s, 5%次氯酸钠溶液消毒处理lOmin，无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养:在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖，接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28°C，每日光照16h，光照强度1600Lx条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶中MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测:组培茎尖苗经过病毒检测，才能确认为无毒苗，病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法，先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相，将长势弱，叶片黄化、黄脉和花叶症状明显的带毒苗淘汰去除，再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上，15天后观察结果，如有明脉、褪绿斑、花叶症状，即为带毒苗，淘汰去除，一般需要重复嫁接2次，未显症状者，可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养:经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗I叶I节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28°C，每日光照16h，光照强度1600LX条件下培养，经3_5天腋芽萌发，30天后长成5-7片叶的成苗，切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒:为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤：a.外植体处理：将选取的薯块在温室育苗,选取茎顶端长芽段,用自来水冲洗，经消毒处理；b.茎尖分生组织培养：在工作台上剥离茎尖,接种到MS加激素的培养基试管中培养，茎尖愈伤组织形成,转入广口瓶MS培养基上继续培养，当幼苗长出时,进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测：组培茎尖苗经过病毒检测,确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养：经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将无毒苗切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，经腋芽萌发，长成苗；e.温室消毒：为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，先对整个温室进行熏蒸，再进行培养盘消毒；f.炼苗：筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，炼苗；g.诱导根原始体形成：将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，保留原有根系，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养：将栽好的水培苗置于温室中，出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；i.水培苗生长培养：将栽好的水培苗置于温室中水培苗，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁：水培苗在防虫温室培养，水培苗剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：脱毒苗移栽到蛭石或珍珠岩基质中。...

【技术特征摘要】
1.一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤:a.外植体处理:将选取的薯块在温室育苗，选取茎顶端长芽段，用自来水冲洗，经消毒处理；b.茎尖分生组织培养:在工作台上剥离茎尖，接种到MS加激素的培养基试管中培养，茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶MS培养基上继续培养，当幼苗长出时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测:组培茎尖苗经过病毒检测，确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养:经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将无毒苗切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，经腋芽萌发，长成苗；e.温室消毒:为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，先对整个温室进行熏蒸，再进行培养盘消毒；f.炼苗:筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，炼苗；g.诱导根原始体形成:将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，保留原有根系，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液；h.水培苗生根培养:将栽好的水培苗置于温室中，出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液水培苗生长培养:将栽好的水培苗置于温室中水培苗，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁:水培苗在防虫温室培养，水培苗剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽:脱毒苗移栽到蛭石或珍珠岩基质中。2.按照权利要求1所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤:a.外植体处理:选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗，当苗高20cm，选取茎顶端2cm长芽段，剪去肉眼可见叶片，用自来水冲洗，经70%酒精浸泡，再用0.1 %升汞溶液消毒,5%次氯酸钠溶液消毒处理，无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养:在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖，接种 到MS加激素的培养基试管中，在温度28°C条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测:组培茎尖苗经过病毒检测，才能确认为无毒苗，病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法，先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相，将长势弱，叶片黄化、黄脉和花叶等症状明显的带毒苗淘汰去除，再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上，15d后观察结果，如有明脉、褪绿斑、花叶等症状，即为带毒苗，淘汰去除，一般需要重复嫁接2次，未显症状者，可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养:经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5-7叶的无毒苗I叶I节切段，移入装有MS培养基的广口瓶中培养，在温度28°C条件下培养，经3-5天腋芽萌发，30d后长成5-7片叶的成苗，不断切段增殖培养，繁殖系数为3-5倍；e.温室消毒--为防甘薯水培苗在生产过程中被病毒再浸染，温室经过消毒，产品选用二氧化氯消毒剂，先对整个温室进行熏蒸，熏蒸一个星期后，再进行培养盘消毒；f.炼苗:筛选生根好、生长健壮的甘薯脱毒组培苗放在经过消毒的防虫温室，于室温、自然光下炼苗2-3天；g.诱导根原始体形成:将炼苗后的脱毒组培苗从组培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用纯净水冲洗掉残留培养基，再将组培苗栽于水培盘中的泡沫板上，水培盘中加入诱导根原始体形成的营养液出.水培苗生根培养:将栽好的水培苗置于温度26±2°C温室中，自然光散射，5-7天出现根原始体后，将诱导根原始体的营养液换成生根营养液；1.水培苗生长培养:将栽好的水培苗置于温度26±2°C温室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系长度达到2-3cm时，将生根营养液换成继代增殖生长营养液；j.水培苗增殖扩繁:水培苗在防虫温室培养11-13天，水培苗长到15-18cm时，可以剪成2叶节扦插，以苗繁苗；k.水培移栽:当脱毒苗长到12-15cm时，移栽到蛭石或珍珠岩基质中。3.按照权利要求1所述的一种水培方式生产甘薯脱毒种苗的方法，其特征在于包括如下步骤:a.外植体处理:选择适宜本地区大面积推广的高产优质或有特殊用途的优良甘薯品种，将选取的薯块在温室育苗，当苗高20cm，选取茎顶端2cm长芽段，剪去肉眼可见叶片，用自来水冲洗30min，经70%酒精浸泡25s，再用0.1 %升汞溶液消毒30s，5%次氯酸钠溶液消毒处理lOmin，无菌水冲洗3遍；b.茎尖分生组织培养:在超净工作台上体视显微镜下剥离0.2-0.4mm的茎尖，接种到MS加激素的培养基试管中，在温度28°C，每日光照16h，光照强度1600Lx条件下培养，25天后茎尖愈伤组织形成，转入广口瓶中MS培养基上继续培养50-60天，当幼苗长出5-7片叶时，进行病毒检测；c.组培茎尖苗病毒检测:组培茎尖苗经过病毒检测，才能确认为无毒苗，病毒检测用症状学诊断法和指示植物检测法，先用症状学诊断法全面观察组培茎尖苗的长势长相，将长势弱，叶片黄化、黄脉和花叶症状明显的带毒苗淘汰去除，再用指示植物检测法将生长可疑的茎尖苗嫁接在巴西牵牛上，15天后观察结果，如有明脉、褪绿斑、花叶症状，即为带毒苗，淘汰去除，一般需要重复嫁接2次，未显症状者，可确认为无毒苗；d.试管苗继代增殖培养:经过病毒检测确信无病毒的试管苗，在无菌条件下将5...

【专利技术属性】
技术研发人员：程群，徐怡，瞿勇，李卫东，沈艳芬，向极钎，郭光耀，陈家吉，陈巧玲，朱云芬，
申请(专利权)人：恩施土家族苗族自治州农业科学院，
类型：发明
国别省市：湖北;42