一种杨桃根中野樱苷的提取、分离方法技术

本发明专利技术公开了一种杨桃根野樱苷提取、分离方法。该方法以酢浆草科植物杨桃Averrhoa carambola L.的干燥根为原料，经一定浓度乙醇或水提取、浓缩后；浓缩液用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，取正丁醇萃取液依次用三氯甲烷-甲醇、石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇溶液洗脱；再经葡聚糖LH-20柱纯化，即得野樱苷；本发明专利技术优点是：本发明专利技术将杨桃根乙醇或水提取液分别采用三氯甲烷-甲醇、石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇溶液为洗脱液，用硅胶柱、葡聚糖凝胶LH-20柱层析的方法纯化，使野樱苷快速分离。该方法操作简便，所提取的野樱苷纯度高，成本低。本发明专利技术可用于实验室或大生产中的杨桃根野樱苷的提取、分离。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种杨桃根野樱苷提取、分离方法。该方法以酢浆草科植物杨桃Averrhoa?carambola?L.的干燥根为原料，经一定浓度乙醇或水提取、浓缩后；浓缩液用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，取正丁醇萃取液依次用三氯甲烷-甲醇、石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇溶液洗脱；再经葡聚糖LH-20柱纯化，即得野樱苷；本专利技术优点是：本专利技术将杨桃根乙醇或水提取液分别采用三氯甲烷-甲醇、石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇溶液为洗脱液，用硅胶柱、葡聚糖凝胶LH-20柱层析的方法纯化，使野樱苷快速分离。该方法操作简便，所提取的野樱苷纯度高，成本低。本专利技术可用于实验室或大生产中的杨桃根野樱苷的提取、分离。【专利说明】本专利技术属一种提取、分离、制备方法，具体是一种杨桃根野樱苷(Prunasin)的提取、分离方法。
技术介绍
杨桃根是酢衆草科植物杨桃Averrhoa carambola L.的干燥根,杨桃根的别名有:三廉根、阳桃根、五敛子根、五棱子根、三念根、山敛根、三敛子根、羊桃根、洋桃根等；生于路旁、疏林或庭院中；广东、广西、福建、台湾、云南有栽培；原产马来西亚、印度尼西亚；现广植于热带各地。杨桃植物为乔木，高可达12m，分枝甚多；树皮暗灰色，内皮淡黄色，干后茶褐色，味微甜而涩。奇数羽状复叶，互生，长10~20cm ;小叶5~13片，全缘，卵形或椭圆形，长3~7cm,宽2~3.5cm,顶端渐尖,基部圆,一侧歪斜,表面深绿色,背面淡绿色,疏被柔毛或无毛，小叶柄甚短；花小、微香，数朵至多朵组成聚伞花序或圆锥花序，自叶腋出或着生于枝干上，花枝和花蕾深红色；萼片5，长约5_，覆瓦状排列，基部合成细杯状，花瓣略向背面弯卷，长8~IOmm,宽3~4mm,背面淡紫红色,边缘色较淡,有时为粉红色或白色；雄蕊5~10枚；子房5室，每室有多数胚珠，花柱5枚。浆果肉质，下垂，有5棱，很少6或3棱，横切面呈星芒状，长5~8mm，淡绿色或蜡黄色，有时带暗红色，种子黑褐色。花期4~12月，果期7~12月。其对疾病对有多种功效:《广西本草选编》“固涩燥湿，行气消滞。主治消化不良，风湿痹痛，遗精，白 带”；《中药大辞典》“治头风，关节痛”；《中华本草》“祛风除湿，行气止痛，涩精止带。主治风湿痹痛，骨节风，瘫缓不逐，慢性头风，心胃气痛，遗精，白带”。现代研究表明，杨桃根含β-谷甾醇(β-sitosterol),羽扇豆醇(Iupeol)和I,5- 二羟基-6, 7- 二甲氧基-2-甲基蒽醌-3-0-β -批喃葡萄糖式(I, 5-dihydroxy-6, 7-dimethoxy-2-methylanthraquinone3-0- β -glucopyranoside)等多种化学成份。杨桃根的醇提取物、水提取物的多糖及其醇提液的三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取液等部位具有明显降低动物血糖水平的作用。药理学试验表明:在给药第14天后，杨桃根醇提物高、低剂量组降糖率分别达35.3%和33.16%，格列本脲组降糖率为34.57% ;各给药组小鼠血糖值与以链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)所致糖尿病小鼠模型组比较，均有显著性差异(P < 0.01)，说明杨桃根醇提物高、低剂量对糖尿病小鼠有良好的降血糖作用。而杨桃根醇提物高剂量组小鼠肝脏SOD值与模型组比较有差异(P<0.05)，高、低剂量组与模型组比较也均能显著降低小鼠肝脏MDA含量(P < 0.01)，说明杨桃根醇提物高剂量组能明显提高糖尿病小鼠机体的抗氧化能力，同时减少过氧化脂质体在机体中的沉积，从而防止过氧化脂质体对机体的损害。在杨桃根水提物的多糖研究方面，与以链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)所致糖尿病小鼠模型组比较，高、低剂量组有明显的降血糖作用(P <0.01)，其血糖下降百分率分别达到35.35%和33.39% ;高、低剂量组小鼠的空腹血清胰岛素明显低于糖尿病模型组小鼠(P <0.01);而高、低剂量组小鼠的胰岛素敏感指数明显高于糖尿病模型组小鼠(P<0.01);高、低剂量组小鼠的胸腺、脾脏重量明显高于模型组小鼠的重量(P <0.01);其胸腺指数及脾脏指数也明显高于模型组(P < 0.01)。其水提物的降血糖机制可能为增强机体对胰岛素的敏感性以及改善胰岛β细胞的分泌有关。以上研究说明杨桃根提取物具有预防糖尿病及其并发症的发生和发展的功效。
技术实现思路
为了进一步研究杨桃根内在化学成份的类型、性质及相关的提取、分离技术工艺，本专利技术提供一种杨桃根野樱苷(Prunasin)的提取、分离方法。本专利技术的技术方案是:一种杨桃根野樱苷(Prunasin)的提取、分离方法。本方法以酢浆草科植物杨桃Averrhoa carambola L.的干燥根(又称阳桃根、羊桃根、洋桃根)为原料,经一定浓度乙醇或水提取，合并提取液，浓缩，浓缩液分别用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，将相同溶剂的萃取液合并，分别浓缩；取正丁醇萃取液用3~5倍量不同比例的三氯甲烷-甲醇溶液在开放硅胶柱及室温条件下洗脱，合并成分相同的洗脱液、浓缩；浓缩液再用3~5倍量不同比例的石油醚-乙酸乙酯，乙酸乙酯-甲醇溶液在开放硅胶柱及室温条件下依次洗脱，将成分相同的洗脱液合并，浓缩；经葡聚糖凝胶柱LH-20纯化，即得野樱苷(Prunasin)化合物。具体操作步骤如下:I)将杨桃根粉碎成粗粉或最粗粉，加6~9倍量的50~80 %乙醇，浸泡0.5~2小时，常压下直接加热回流提取，提取I~3次，滤过，合并提取液，于50~80°C C减压回收乙醇。2)或将杨桃根粉碎成粗粉或最粗粉，加6~9倍量的水，浸泡0.5~2小时，常压下直接加热回流提取，同法提取I~3次，滤过，合并提取液，浓缩。3)分别将步骤I)、步骤2)浓缩液分别用I~4倍量的环己烷、乙酸乙酯、正丁醇在室温条件下，依次萃取I~3次；在室温条件下，将相同溶剂的萃取液分别合并、浓缩。取正丁醇萃取液用3~5倍量不同比例的三氯甲烷-甲醇溶液在开放硅胶柱及室温条件下洗脱，合并成分相同的洗脱液、浓缩；浓缩液再用3~5倍量不同比例的石油醚-乙酸乙酯，乙酸乙酯-甲醇溶液在开放硅胶柱及室温条件下依次洗脱，将成分相同的洗脱液合并，浓缩；经葡聚糖凝胶柱LH-20纯化，即得野樱苷(Prunasin)单体化合物，其分子式为C14H17NO6，结构式如下。【权利要求】1.，其特征是:以酢浆草科植物杨桃Averrhoacarambola L.的干燥根(又称阳桃根、羊桃根、洋桃根)为原料，经一定浓度乙醇或水加热回流提取，浓缩，经环己烷、三氯甲烷、正丁醇萃取后，将正丁醇萃取液用开放硅胶柱、葡聚糖凝胶柱LH-20柱层析的方法，分离得到野樱苷(Prunasin)单体化合物，具体操作步骤如下: 1)将杨桃根(阳桃根、羊桃根、洋桃根)粉碎成粗粉或最粗粉，加6~9倍量的50~80%乙醇，浸泡0.5~2小时，常压下直接加热回流提取，提取I~3次，滤过，合并提取液，于50~80°C减压回收乙醇； 2)或将杨桃根(阳桃根、羊桃根、洋桃根)粉碎成粗粉或最粗粉，加6~9倍量的水，浸泡0.5~2小时，常压下直接加热回流提取，同法提取I~3次，滤过，合并本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种杨桃根中野樱苷的提取、分离方法，其特征是：以酢浆草科植物杨桃Averrhoacarambola L.的干燥根(又称阳桃根、羊桃根、洋桃根)为原料，经一定浓度乙醇或水加热回流提取，浓缩，经环己烷、三氯甲烷、正丁醇萃取后，将正丁醇萃取液用开放硅胶柱、葡聚糖凝胶柱LH‑20柱层析的方法，分离得到野樱苷(Prunasin)单体化合物，具体操作步骤如下：1)将杨桃根(阳桃根、羊桃根、洋桃根)粉碎成粗粉或最粗粉，加6～9倍量的50～80％乙醇，浸泡0.5～2小时，常压下直接加热回流提取，提取1～3次，滤过，合并提取液，于50～80℃减压回收乙醇；2)或将杨桃根(阳桃根、羊桃根、洋桃根)粉碎成粗粉或最粗粉，加6～9倍量的水，浸泡0.5～2小时，常压下直接加热回流提取，同法提取1～3次，滤过，合并提取液，浓缩；3)分别将步骤1)、步骤2)浓缩液分别用1～4倍量的环己烷、乙酸乙酯、正丁醇在室温条件下，依次萃取1～3次；在室温条件下，将相同溶剂的萃取液合并、浓缩；取正丁醇萃取液用3～5倍量不同比例的三氯甲烷‑甲醇溶液，在开放硅胶柱及室温条件下洗脱，合并成分相同的洗脱液、浓缩；浓缩液再用3～5倍量不同比例的石油醚‑乙酸乙酯，乙酸乙酯‑甲醇溶液在开放硅胶柱及室温条件下依次洗脱，将成分相同的洗脱液合并，浓缩；经葡聚糖凝胶柱LH‑20纯化，即得野樱苷(Prunasin)化合物。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄仁彬，温庆伟，林兴，郑妮，郭又嘉，陈兆霓，金德克，徐小惠，阮文福，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：广西;45