西番莲组织培养培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种西番莲组织培养培养基，该培养基包括继代培养基、第一步生根培养基和第二步生根培养基。在培养基的选择上一般采用基本培养基(MS)和生长调节剂的结合，侧重点不一样，具有缩短了继代周期，芽的质量好，得到的苗生根率高，出根能力强，愈伤组织少，叶片深绿色等优点。

【技术实现步骤摘要】
西番莲组织培养培养基
本专利技术涉及组织培养基，尤其涉及一种西番莲组织培养培养基。
技术介绍
西番莲(学名:Passiflora caerulea L.)是一种芳香可口的水果，有“果汁之王”的美誉，为多年生常绿攀缘木质藤本植物，株态优美，四季常青，叶型奇特，花色鲜艳，气味芬芳，果实甜酸可口，果实芳香，食用果瓤，酸甜可口。风味浓郁，芳香怡人。西番莲原产于巴西,后来在南美、南非、东南亚各国、澳洲和南太平洋各地区都有种植。由于西番莲的果实形似鸡蛋，果汁色泽如鸡蛋黄并具有菠萝、番石榴、香蕉、芒果、草毒、西瓜、酸梅、甘蔗和桃李等多种水果的的风味，所以又有鸡蛋果、百香果之称。西番莲全身都是宝，据测定，西番莲果实含有超过135种以上的芳香物质，据化学分析测定，西番莲果内维生素A、B、C含量丰富，还含有磷、钙、钾、铁和17种氨基酸、历5种的化合物，营养和药用价值很高。其整、根、叶可以入药，有消炎、止痛、活血强身、降脂降血压等功效，果皮可以加工成饲料。西番莲果汁中有165种化合物，最适于加工成果汁，或与其它水果(如芒果、菠萝、番石榴、柑橙和苹果等)加工混配成混合果汁，可以显著地提高这些水果汁的口感与香味；西番莲果汁构成特殊香味，有养颜美容、去除疲劳、防衰老、抗高血压的疗效。具有很高的营养价值、经济价值和观赏价值。西番莲以种子繁育的植株性别表现较迟，用种子繁育实生苗很大程度影响了生产。另外，采用扦插、嫁接等常规的无性繁殖技术成活率又低，不适合西番莲的快速繁殖。因此，通过组培技术快速繁 殖西番莲株性一致的优良种苗倍受关注。大量研究表明，西番莲利用组培快繁技术育苗是非常理想的途径，具有保持优良品种的遗传稳定性；生产无病种苗的优点；种苗繁殖迅速等特点。目前，国内已有许多西番莲组培技术研究报道，在生产应用上也初具规模。但是，西番莲品种繁多，不同的品种对培养基的要求不同，一般工厂化生产同时生产几个品种，如果一个品种使用一种培养基，生产操作难度大，成本高，不利于规模化生产。目前继代培养基重点是芽分化，但能用于生根诱导的芽(即有效芽)却很少，且芽的质量也不好，细弱、矮、黄叶；生根培养基配方很多，但是出根不整齐，不稳定，根系愈伤化，数量少等，由于存在以上问题，西番莲组培育苗成本高，工厂化生产比较困难。在培养基的选择上一般采用基本培养基(MS)和生长调节剂的结合，基本培养基一般设1/2MS、MS、3/2MS等3种，生长调节剂选用IBA (吲哚丁酸)和NAA (萘乙酸)两种，但是继代培养基和生根培养基的侧重点不一样，如不区分，得到的苗生根率低，根膨化，愈伤组织多，且叶片黄花等，存在很多不足。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种西番莲组织培养培养基，该培养基包括继代培养基、第一步生根培养基和第二步生根培养基，其中:每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下:(I)大量元素:硝酸钾2450mg/L、硝酸铵2100mg/L、七水硫酸镁450mg/L、磷酸二氢钾 350mg/L、氯化钙 450mg/L ；(2)微量元素:一水硫酸锰22.0mg/L、七水硫酸锌8.2mg/L、硼酸5.5mg/L、二水钥酸钠0.025mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、钠盐35.5mg/L、七水硫酸亚铁 26.5mg/L、碘化钾 0.75mg/L ；(3)有机物:甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素10.0mg/L、盐酸吡卩多醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇 100.0mg/L ；(4)植物 生长调节剂:6_苄基腺嘌呤0.25-0.35mg/L、萘乙酸0.15-0.25mg/L ；余量为蒸馏水。每升(L)第一步生根培养基的组分及各组分的含量如下:(I)大量元素:硝酸钾2100mg/L、硝酸铵1824mg/L、七水硫酸镁352mg/L、磷酸二氢钾 222mg/L、氯化钙 490mg/L ；(2)微量元素:一水硫酸锰22.0mg/L、七水硫酸锌8.2mg/L、硼酸5.5mg/L、二水钥酸钠0.025mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、钠盐35.5mg/L、七水硫酸亚铁 26.5mg/L、碘化钾 0.75mg/L ；(3)有机物:甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素10.0mg/L、盐酸吡卩多醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇 100.0mg/L ；(4)植物生长调节剂:萘乙酸0.1-0.2mg/L、吲哚丁酸1.5-2.5mg/L ；(5)其他添加物:活性炭2.0-3.0mg/L ；余量为蒸馏水。每升(L)第二步生根培养基的组分及各组分的含量如下:(I)大量元素:硝酸钾1050mg/L、硝酸铵912mg/L、七水硫酸镁176mg/L、磷酸二氢钾 11111^/1、氯化|丐 245mg/L ；(2)微量元素:一水硫酸锰22.0mg/L、七水硫酸锌8.2mg/L、硼酸5.5mg/L、二水钥酸钠0.025mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、钠盐35.5mg/L、七水硫酸亚铁 26.5mg/L、碘化钾 0.75mg/L ；(3)有机物:甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素10.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇 100.0mg/L ；(4)植物生长调节剂:吲哚丁酸0.1-0.2mg/L ；(5)其他添加物:活性炭3.0-4.0mg/L ；余量为蒸馏水。本专利技术西番莲培养基中的继代培养基的配制方法为:(I)配制大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、植物生产调节剂母液；(2)根据培养基配制量依次量取各种母液，即混合母液；(3)称量白糖和琼脂，其中白糖30g/L，琼脂3.0g/L ；(4)加热白糖和琼脂至完全溶解；(5)然后加入量好的混合母液，用水定容，搅拌均匀；(6)用NaOH和HCl调试培养基的PH值至5.8 ；(7)调好PH值的培养基趁热分装到培养瓶，盖上瓶盖，拧紧；(8)把培养基放入高温高压灭菌锅，在121.6°C,0.1MPa下灭菌20分钟；(9)灭菌后的培养基静置冷却至凝固，此时的培养基可以使用。本专利技术西番莲组织培养培养基中的第一步生根培养基的配制方法为:(I)配制大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、植物生产调节剂母液、活性炭;(2)根据培养基配制量依次量取各种母液，即混合母液；(3)称量白糖和琼脂，其中白糖15g/L，琼脂3.2g/L ；(4)加热白糖和琼脂至完全溶解；(5)然后加入量好的混合母液，用水定容，搅拌均匀；(6)用NaOH和HCl调试培养基的PH值至5.8 ；(7)调好PH值的培养基趁热分装到培养瓶，盖上瓶盖，拧紧；(8)把培养基放入高温高压灭菌锅，在121.6°C,0.1MPa下灭菌20分钟；(9)灭菌后的培养基静置冷却至凝固，此时的培养基可以使用。本专利技术西番莲组 织培养培养基中的第二步生根培养基的配制方法为:(I)配制大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、活性炭；(2)根据培养基配制量依次量取各种母液，即混合母液；(3)称量白糖和琼脂，其中白糖15g/L,琼脂3.4g/L ；(4)加热白糖和琼脂至完全溶解；(5)然后加入量好的混合母液，用水定容，搅拌均匀；(6)用NaOH和HCl本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种西番莲组织培养培养基，该培养基包括继代培养基、第一步生根培养基和第二步生根培养基，其特征在于： 每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下： (1)大量元素：硝酸钾2450mg/L、硝酸铵2100mg/L、七水硫酸镁450mg/L、磷酸二氢钾350mg/L、氯化钙450mg/L； (2)微量元素：一水硫酸锰22.0mg/L、七水硫酸锌8.2mg/L、硼酸5.5mg/L、二水钼酸钠0.025mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、钠盐35.5mg/L、七水硫酸亚铁26.5mg/L、碘化钾0.75mg/L； (3)有机物：甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素10.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇100.0mg/L； (4)植物生长调节剂：6‑苄基腺嘌呤0.25‑0.35mg/L、萘乙酸0.15‑0.25mg/L； 余量为蒸馏水； 每升(L)第一步生根培养基的组分及各组分的含量如下： (1)大量元素：硝酸钾2100mg/L、硝酸铵1824mg/L、七水硫酸镁352mg/L、磷酸二氢钾222mg/L、氯化钙490mg/L； (2)微量元素：一水硫酸锰22.0mg/L、七水硫酸锌8.2mg/L、硼酸5.5mg/L、二水钼酸钠0.025mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、钠盐35.5mg/L、七水硫酸亚铁26.5mg/L、碘化钾0.75mg/L； (3)有机物：甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素10.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇100.0mg/L； (4)植物生长调节剂：萘乙酸0.1‑0.2mg/L、吲哚丁酸1.5‑2.5mg/L； (5)其他添加物：活性炭2.0‑3.0mg/L； 余量为蒸馏水； 每升(L)第二步生根培养基的组分及各组分的含量如下： (1)大量元素：硝酸钾1050mg/L、硝酸铵912mg/L、七水硫酸镁176mg/L、磷酸二氢钾111mg/L、氯化钙245mg/L； (2)微量元素：一水硫酸锰22.0mg/L、七水硫酸锌8.2mg/L、硼酸5.5mg/L、二水钼酸钠0.025mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、钠盐35.5mg/L、七水硫酸亚铁26.5mg/L、碘化钾0.75mg/L； (3)有机物：甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素10.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇100.0mg/L； (4)植物生长调节剂：吲哚丁酸0.1‑0.2mg/L； (5)其他添加物：活性炭3.0‑4.0mg/L； 余量为蒸馏水 。...

【技术特征摘要】
1.一种西番莲组织培养培养基，该培养基包括继代培养基、第一步生根培养基和第二步生根培养基，其特征在于: 每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下: (1)大量元素:硝酸钾2450mg/L、硝酸铵2100mg/L、七水硫酸镁450mg/L、磷酸二氢钾350mg/L、氯化钙 450mg/L ； (2)微量元素:一水硫酸锰22.0mg/L、七水硫酸锌8.2mg/L、硼酸5.5mg/L、二水钥酸钠0.025mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、钠盐35.5mg/L、七水硫酸亚铁26.5mg/L、碘化钾 0.75mg/L ； (3)有机物:甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素10.0mg/L、盐酸吡卩多醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇 100.0mg/L ； (4)植物生长调节剂:6_苄基腺嘌呤0.25-0.35mg/L、萘乙酸0.15-0.25mg/L ； 余量为蒸馏水； 每升(L)第一步生根培养基的组分及各组分的含量如下: (1)大量元素:硝酸钾2100mg/L、硝酸铵1824mg/L、七水硫酸镁352mg/L、磷酸二氢钾222mg/L、氯化钙 490mg/L ； (2)微量元素:一水硫酸锰22.0mg/L、七水硫酸锌8.2mg/L、硼酸5.5mg/L、二水钥酸钠0.025mg/L、五水硫酸铜0.025...

【专利技术属性】
技术研发人员：周冠旻，
申请(专利权)人：桂林军供生化技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45