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一种等离子纳米金二聚体用于细胞内基因表达调控的方法技术

技术编号:10264181 阅读:161 留言:0更新日期:2014-07-30 10:58
一种等离子纳米金二聚体用于细胞内基因表达调控的方法,属于材料化学技术领域。本发明专利技术包括金纳米粒子修饰穿膜肽,金纳米粒子与调控序列的偶联,双功能纳米金二聚体组装,纳米金二聚体对细胞内基因的调控,细胞内基因调控的表征。本发明专利技术选择金纳米粒子作为激元,将具有能调控survivin基因的反义核苷酸修饰在单一的金纳米粒子上,再将其与连接有穿膜肽的粒子进行组装,使其能够高效快速的发挥细胞内基因调控的作用。本发明专利技术提供了具有细胞内基因调控作用的纳米金二聚体组装方法,得到了结构均一,性能优越的纳米金二聚体结构。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种等离子纳米金二聚体用于细胞内基因表达调控的方法,其特征在于步骤如下:(1)金纳米粒子修饰穿膜肽:将柠檬酸还原法合成的金纳米粒子与巯基聚乙二醇PEG 5000、穿膜肽TAT和DNA1混匀,24h后得到表面修饰有穿膜肽的Au‑TAT‑DNA1复合体;(2)金纳米粒子与调控序列的偶联:将金纳米粒子与survivin基因的反义核苷酸anti‑DNA和DNA2偶联,得到表面修饰有调控序列的Au‑anti‑DNA‑DNA2复合体;(3)双功能纳米金二聚体组装:将步骤(1)得到的Au‑TAT‑DNA1复合体和步骤(2)得到的Au‑anti‑DNA‑DNA2复合体混匀,得到双功能纳米金二聚体组装结构;(4)纳米金二聚体对细胞内基因的调控:将步骤(3)中得到的双功能纳米金二聚体组装结构与细胞共同孵育3h后,用胰蛋白酶消化细胞,得到纳米金二聚体调控后的细胞悬液;(5)细胞内基因调控的表征:将步骤(4)获得的细胞悬液中的总RNA提取出来,再将其反转录为cDNA,用荧光定量PCR检测survivin基因在体内的表达量,并与内参基因β‑actin相比较,计算其相对表达量,相对表达量=survivin基因表达量/β‑actin基因表达量。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:胥传来孙茂忠匡华徐丽广马伟刘丽强宋珊珊吴晓玲
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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