一组酮胺氧化酶及其编码基因和应用制造技术

本发明专利技术公开了一组酮胺氧化酶及其编码基因和应用。本发明专利技术提供的酮胺氧化酶是如下（a）至（p）中的任意一种：（a）序列3第1至438位组成的蛋白质；（b）序列3所示蛋白质；（c）序列5第1至438位组成的蛋白质；（d）序列5所示蛋白质；（e）序列7第1至438位组成的蛋白质；（f）序列7所示蛋白质；（g）序列9第1至438位组成的蛋白质；（h）序列9所示蛋白质；（i）序列11第1至438位组成的蛋白质；（j）序列11所示蛋白质；（k）序列13第1至438位组成的蛋白质；（l）序列13所示蛋白质；（m）序列15第1至438位组成的蛋白质；（n）序列15所示蛋白质；（o）序列17第1至438位组成的蛋白质；（p）序列17所示蛋白质。与现有的酮胺氧化酶相比，本发明专利技术提供的各个酮胺氧化酶的酶活性大大提高，具有重大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一组酮胺氧化酶及其编码基因和应用。本专利技术提供的酮胺氧化酶是如下（a）至（p）中的任意一种：（a）序列3第1至438位组成的蛋白质；（b）序列3所示蛋白质；（c）序列5第1至438位组成的蛋白质；（d）序列5所示蛋白质；（e）序列7第1至438位组成的蛋白质；（f）序列7所示蛋白质；（g）序列9第1至438位组成的蛋白质；（h）序列9所示蛋白质；（i）序列11第1至438位组成的蛋白质；（j）序列11所示蛋白质；（k）序列13第1至438位组成的蛋白质；（l）序列13所示蛋白质；（m）序列15第1至438位组成的蛋白质；（n）序列15所示蛋白质；（o）序列17第1至438位组成的蛋白质；（p）序列17所示蛋白质。与现有的酮胺氧化酶相比，本专利技术提供的各个酮胺氧化酶的酶活性大大提高，具有重大的应用价值。【专利说明】—组酮胺氧化酶及其编码基因和应用
本专利技术涉及一组酮胺氧化酶及其编码基因和应用。
技术介绍
美拉德反应，又称为非酶催化糖基化反应，是一类自然界常见的反应。还原糖(最常见的是葡萄糖)与氨基化合物在常温或是高温下发生反应，生成Amadori产物，并进一步交联得到高级糖基化终产物以及类黑素类物质。该反应在食品的加工和储存过程中发挥着重要的作用，对食品的色泽，风味和营养成分等都有重要的影响。近年来的研究发现，在生物体内也存在美拉德反应，反应的产物与人类的衰老，糖尿病并发症等病症有密切的关系，从而受到广泛的关注。酮胺氧化酶( fructosylamine oxidases,缩写为FAOXs)是一类存在于微生物体内的去糖基化酶，可以催化降解Amadori产物，通常生成氨基化合物、葡糖醛酮和过氧化氢。在该酶发现之初，最先应用于糖尿病的检测，目前基于FAOXs的检测已经成为糖尿病检测和诊断中的一项“金指标”。同时，这类蛋白酶在食品质量控制，洗涤剂添加剂以及糖尿病治疗等方面也展现出了巨大的应用前景。但是，目前已知的酮胺氧化酶都只能作用于小分子底物，如糖基化氨基酸或是糖基化二肽，这也极大地限制了该酶的应用。来源于烟曲霉Aspergillus fumigatus 的酮胺氧化酶 AmadoriaseII于1997年首次被分离，可以直接作用于一种较大分子量的底物糖基化金刚烷胺(fructosyl-adamantanamine)。该酶的晶体结构在2008年被报道，晶体结构显示，在该酶表面有两个柔性的Loop区域(氨基酸残基序列自N末端第58-66位的残基区域以及第110-119位的残基区域)，位于底物通道入口附近，在底物结合过程起到重要作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一组酮胺氧化酶及其编码基因和应用。本专利技术提供了一组酮胺氧化酶，是如下(a)至(P)中的任意一种:(a)由序列表中序列3自N末端第I至438位氨基酸残基组成的蛋白质；(b)由序列表中序列3所示的氨基酸残基组成的蛋白质；(c)由序列表中序列5自N末端第I至438位氣基酸残基组成的蛋白质；(d)由序列表中序列5所不的氣基酸残基组成的蛋白质；Ce)由序列表中序列7自N末端第I至438位氣基酸残基组成的蛋白质；(f)由序列表中序列7所不的氣基酸残基组成的蛋白质；(g)由序列表中序列9自N末端第I至438位氣基酸残基组成的蛋白质；(h)由序列表中序列9所示的氨基酸残基组成的蛋白质；(i)由序列表中序列11自N末端第I至438位氣基酸残基组成的蛋白质；(j)由序列表中序列11所不的氣基酸残基组成的蛋白质；(k)由序列表中序列13自N末端第I至438位氣基酸残基组成的蛋白质；(I)由序列表中序列13所示的氨基酸残基组成的蛋白质；(m)由序列表中序列15自N末端第I至438位氣基酸残基组成的蛋白质；(η)由序列表中序列15所不的氣基酸残基组成的蛋白质；(ο)由序列表中序列17自N末端第I至438位氨基酸残基组成的蛋白质；(P)由序列表中序列17所不的氣基酸残基组成的蛋白质。编码所述酮胺氧化酶的基因也属于本专利技术的保护范围。所述基因为如下I)至26)中任一所述的DNA分子:1)编码区如序列表中序列4自5’末端第I至1314位核苷酸所示的DNA分子；2)编码区如序列表中序列4自5’末端第I至1344位核苷酸所示的DNA分子；3)编码区如序列表中序列4所示的DNA分子；4)编码区如序列表中序列6自5’末端第I至1314位核苷酸所示的DNA分子；5)编码区如序列表中序列6自5’末端第I至1344位核苷酸所不的DNA分子；6)编码区如序列表中序列6所不的DNA分子；7)编码区如序列表中序列8自5’末端第I至1314位核苷酸所示的DNA分子；8)编码区如序列表中序列8自5’末端第I至1344位核苷酸所示的DNA分子；9)编码区如序列表中序列8所示的DNA分子；10)编码区如序列表中序列10自5’末端第I至1314位核苷酸所示的DNA分子；11)编码区如序列表中序列10自5’末端第I至1344位核苷酸所示的DNA分子；12)编码区如序列表中序列10所示的DNA分子；13)编码区如序列表中序列12自5’末端第I至1314位核苷酸所示的DNA分子；14)编码区如序列表中序列12自5’末端第I至1344位核苷酸所示的DNA分子；15)编码区如序列表中序列12所示的DNA分子；16)编码区如序列表中序列14自5’末端第I至1314位核苷酸所示的DNA分子；17)编码区如序列表中序列14自5’末端第I至1344位核苷酸所示的DNA分子；18)编码区如序列表中序列14所示的DNA分子；19)编码区如序列表中序列16自5’末端第I至1314位核苷酸所示的DNA分子；20)编码区如序列表中序列16自5’末端第I至1344位核苷酸所示的DNA分子；21)编码区如序列表中序列16所示的DNA分子；22)编码区如序列表中序列18自5’末端第I至1314位核苷酸所示的DNA分子；23)编码区如序列表中序列18自5’末端第I至1344位核苷酸所不的DNA分子；24)编码区如序列表中序列18所不的DNA分子；25)在严格条件下与I)至24)中任一限定的DNA序 列杂交且编码所述蛋白质的DNA分子；26)与I)至24)中任一限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。上述严格条件可为在6 X SSC, 0.5%SDS 的溶液中，在 65。C 下杂交，然后用 2XSSC、0.1%SDS 和 I X SSC,0.1%SDS各洗膜一次。含有所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌均属于本专利技术的保护范围。可用现有的表达载体构建含有所述基因的重组表达载体。所述表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端。使用所述基因构建重组表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型启动子或组成型启动子，它们可单独使用或与其它启动子结合使用；此外，使用本专利技术的基因构建重组表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白质，是如下（a）至（p）中的任意一种：（a）由序列表中序列3自N末端第1至438位氨基酸残基组成的蛋白质；（b）由序列表中序列3所示的氨基酸残基组成的蛋白质；（c）由序列表中序列5自N末端第1至438位氨基酸残基组成的蛋白质；（d）由序列表中序列5所示的氨基酸残基组成的蛋白质；（e）由序列表中序列7自N末端第1至438位氨基酸残基组成的蛋白质；（f）由序列表中序列7所示的氨基酸残基组成的蛋白质；（g）由序列表中序列9自N末端第1至438位氨基酸残基组成的蛋白质；（h）由序列表中序列9所示的氨基酸残基组成的蛋白质；（i）由序列表中序列11自N末端第1至438位氨基酸残基组成的蛋白质；（j）由序列表中序列11所示的氨基酸残基组成的蛋白质；（k）由序列表中序列13自N末端第1至438位氨基酸残基组成的蛋白质；（l）由序列表中序列13所示的氨基酸残基组成的蛋白质；（m）由序列表中序列15自N末端第1至438位氨基酸残基组成的蛋白质；（n）由序列表中序列15所示的氨基酸残基组成的蛋白质；（o）由序列表中序列17自N末端第1至438位氨基酸残基组成的蛋白质；（p）由序列表中序列17所示的氨基酸残基组成的蛋白质。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：林章凛，钱昱，郑静，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：北京;11