一种裸花紫珠中总酚的含量测定方法技术

本发明专利技术涉及一种裸花紫珠中总酚的含量测定方法。本发明专利技术采用分光光度法对裸花紫珠中总酚的含量进行测定，有助于对裸花紫珠药材、提取物及其制剂的定量控制。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及。本专利技术采用分光光度法对裸花紫珠中总酚的含量进行测定，有助于对裸花紫珠药材、提取物及其制剂的定量控制。【专利说明】
本专利技术涉及中药领域，具体涉及裸花紫珠中总酚含量测定方法。
技术介绍
裸花紫珠iCallicarpa nudiflora Hook, et Am.)为马鞭草科(Verbenaceae)紫珠属植物，主产于我国海南、广东、广西，是海南的道地药材，具有收敛、止血、镇痛、消炎等功效。现有上市品种如裸花紫珠片、裸花紫珠胶囊、裸花紫珠栓等制剂，目前多以总黄酮为质量控制标准，《广西植物》2012年11期《七种紫珠属植物水提物中总黄酮、总酚酸及其抗氧化活性的测定》记载了总酚的含量测定方法，但本专利技术提供的总酚含量测定方法，对提取条件和含量测定方法等方法学考察进一步研究，优化了相关参数，进一步提高了质量标准。
技术实现思路
本专利技术的目的是建立一种准确、可靠的裸花紫珠药材、提取物中总酚的含量测定方法。本专利技术所述的裸花紫珠中总酚的含量测定方法包括下列步骤: (1).供试品溶液的制备: 取裸花紫珠药材适量，用醇溶剂或酮溶剂超声提取，提取液离心，以上清液为供试品溶液； (2).标准曲线的制作:精密称取没食子酸约IOmg作为对照品，置10ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为I mg/ml的对照品储备液；精密移取I ml对照品储备液置于10 ml容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.1 mg/ml的对照品溶液；再分别精密吸取对照品溶液置于5ml量瓶中配制成梯度的标准溶液，加入显色剂显色，以50%甲醇为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下，分别测定吸光度，以没食子酸含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得没食子酸含量测定标准曲线； (3).样品溶液总酚的含量测定:精密量取0.1ml步骤(1)所述的供试品溶液，加入显色剂显色，以相应试剂为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下测定吸光度值，根据该吸光度值，由标准曲线得对应的浓度，该浓度值即为供试品溶液总酚的含量； (4).药材中含量的计算:根据步骤(3)所得的供试品溶液中总酚的含量，换算出裸花紫珠药材中总酚的含量。其中，步骤(1)供试品溶液的制备可优选为:醇溶剂为40-60%的甲醇或乙醇，酮溶剂为40~60%丙酮，超声提取的液料比为120: 1-250:1，离心速率为1000(Tl5000r/min，提取时间0.5^1.5h ;可进一步优选为50%的丙酮超声提取，提取时间为I小时，液料比为250:1，提取液以10000r/min离心，离心I min后，精密量取上清液l_5ml置25ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，制成供试品溶液。本专利技术所述的一种裸花紫珠提取物中总酚的含量测定方法，包括如下步骤:(1).供试品溶液的制备: 精密称取0.01~0.05g裸花紫珠提取物粉末，置25ml量瓶中，加50%甲醇l(T20ml超声溶解，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，所得滤液制成供试品溶液； (2).标准曲线的制作:精密称取没食子酸约IOmg作为对照品，置10ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为I mg/ml的对照品储备液；精密移取I ml对照品储备液置于10 ml容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.1 mg/ml的对照品溶液；再分别精密吸取对照品溶液置于5ml量瓶中配制成梯度的标准溶液，加入显色剂显色，以50%甲醇为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下，分别测定吸光度，以没食子酸含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得没食子酸含量测定标准曲线； (3).样品溶液总酚的含量测定:精密量取0.1ml步骤(1)所述的供试品溶液，加入显色剂显色，以相应试剂为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下测定吸光度值，根据该吸光度值，由标准曲线得对应的浓度，该浓度值即为供试品溶液总酚的含量； (4).提取物中含量的计算:根据步骤(3)所得的供试品溶液中总酚的含量，换算出裸花紫珠提取物中总酚的含量。本专利技术所述的一种裸花紫珠固体制剂中总酚的含量测定方法，其特征在于包括如下步骤: (1).供试品溶液的制备: 取裸花紫珠固体制剂，精密称取0.05、.1g内部药物，粉碎，置25ml量瓶中，加50%甲醇l(T20ml超声溶解，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，所得滤液制成供试品溶液； (2).标准曲线的制作:精密称取没食子酸约IOmg作为对照品，置10ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为I mg/ml的对照品储备液；精密移取I ml对照品储备液置于10 ml容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.1 mg/ml的对照品溶液；再分别精密吸取对照品溶液置于5ml量瓶中配制成梯度的标准溶液，加入显色剂显色，以50%甲醇为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下，分别测定吸光度，以没食子酸含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得没食子酸含量测定标准曲线； (3).样品溶液总酚的含量测定:精密量取0.1ml步骤(1)所述的供试品溶液，加入显色剂显色，相应试剂为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下测定吸光度值，根据该吸光度值，由标准曲线得对应的浓度，该浓度值即为供试品溶液总酚的含量； (4).制剂中含量的计算:根据步骤(3)所得的供试品溶液中总酚的含量，换算出裸花紫珠制剂中总酚的含量。本专利技术所述的一种裸花紫珠液体制剂中总酚的含量测定方法，其特征在于包括如下步骤: (1).供试品溶液的制备: 精密量取l-5ml裸花紫珠液体制剂，置25ml量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，所得滤液制成供试品溶液； (2).标准曲线的制作:精密称取没食子酸约IOmg作为对照品，置10ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为I mg/ml的对照品储备液；精密移取I ml对照品储备液置于10 ml容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.1 mg/ml的对照品溶液；再分别精密吸取对照品溶液置于5ml量瓶中配制成梯度的标准溶液，加入显色剂显色，以50%甲醇为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下，分别测定吸光度，以没食子酸含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得没食子酸含量测定标准曲线； (3).样品溶液总酚的含量测定:精密量取0.1ml步骤(1)所述的供试品溶液，加入显色剂显色，相应试剂为空白对照，照紫外-可见分光光度法，在760nm波长下测定吸光度值，根据该吸光度值，由标准曲线得对应的浓度，该浓度值即为供试品溶液总酚的含量； (4).制剂中含量的计算:根据步骤(3)所得的供试品溶液中总酚的含量，换算出裸花紫珠制剂中总酚的含量。本专利技术中上述的含量测定方法中所述的显色剂为0.45、.6ml的Folin-酚试液和1.2~2.1mlNa2CO3溶液，反应温度为40~45°C，反应时间为l(Tl5min，显色时间为45~60min，显色温度为2(T30°C，Na2CO3溶液质量浓度为5.0%~7.5% ;显色剂及浓度、用量可进一步优选为0本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种裸花紫珠中总酚的含量测定方法，其特征在于包括如下步骤：(1).供试品溶液的制备：取裸花紫珠药材适量，用醇溶剂或酮溶剂超声提取，提取液离心，以上清液为供试品溶液；(2).标准曲线的制作：精密称取没食子酸约10mg作为对照品，置10 ml容量瓶中加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为1 mg/ml的对照品储备液；精密移取1 ml对照品储备液置于10 ml容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.1 mg/ml的对照品溶液；再分别精密吸取对照品溶液于5ml量瓶中配制成梯度的标准溶液，加入显色剂显色，以50%甲醇为空白对照，照紫外‑可见分光光度法，在760nm波长下，分别测定吸光度，以没食子酸含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得没食子酸含量测定标准曲线；(3).样品溶液总酚的含量测定：精密量取0.1ml步骤（1）所述的供试品溶液，加入显色剂显色，以相应试剂为空白对照，照紫外‑可见分光光度法，在760nm波长下测定吸光度值，根据该吸光度值，由标准曲线得对应的浓度，该浓度值即为供试品溶液总酚的含量；(4).药材中含量的计算：根据步骤（3）所得的供试品溶液中总酚的含量，换算出裸花紫珠药材中总酚的含量。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李典鹏，袁莉，黄胜，颜小捷，卢凤来，潘争红，谷陟欣，徐向平，陈珍贵，
申请(专利权)人：九芝堂股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43