产生和使用用于治疗或美容用途的细胞系，如干细胞系的方法。在一个实施方式中，使用所述细胞系来治疗广泛的退行性疾病和代谢紊乱，包括但不限于肥胖、糖尿病、高血压和心气虚。还描述了使用此类细胞系来筛选化合物的方法，所述化合物在调节多种过程中发挥作用。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】产生和使用用于治疗或美容用途的细胞系，如干细胞系的方法。在一个实施方式中，使用所述细胞系来治疗广泛的退行性疾病和代谢紊乱，包括但不限于肥胖、糖尿病、高血压和心气虚。还描述了使用此类细胞系来筛选化合物的方法，所述化合物在调节多种过程中发挥作用。【专利说明】
本专利技术涉及细胞培养领域并且更具体地涉及干细胞的培养和应用。相关申请本申请要求2011年6月29日提交的美国临时申请61/502，508、2012年I月18日提交的美国临时申请61/632，122和2012年I月25日提交的美国临时申请61/632，516的优先权及权益，这些申请的每一个的整体都通过引用并入本文。
技术介绍
棕色脂肪(褐色脂肪)是在人体中发现的两类脂肪组织之一。在胚胎发生过程中，棕色脂肪来源于中胚层的分化。棕色脂肪通过提供能够提供热的代谢组织而参与发育和稳态。棕色脂肪协助调节代谢和非颤抖性产热(nonshivering thermogenesis)。另外,棕色脂肪在调节代谢上比白色脂肪组织发挥更大的作用。棕色脂肪占人类新生儿体重的5%，并且少于成年人体重的1%。棕色脂肪的代谢活性随着身体质量指数(体重指数)的增加而降低。类似地，棕色脂肪的代谢活性随着身体脂肪百分率增加而降低。已经鉴别且分离了许多组织中的干细胞，并且已经分离、扩增了白色脂肪组织的干细胞并且证明它们具有功能性治疗特性。迄今为止，还没有在棕色脂肪组织中鉴别出干细胞群的群体。
技术实现思路
所描述的是产生(develop)用于治疗或美容(化妆，cosmetic)用途的细胞系的方法，例如干细胞系。例如，所述细胞系可以用来治疗广泛的退行性(变性，degenerative)疾病和代谢紊乱，包括但不限于肥胖、糖尿病、高血压和心气虚(cardiac deficiency)。还描述的是使用此类细胞系来筛选化合物和基因的方法，所述化合物在调节多种过程中发挥作用，所述过程例如但不限于甲基化作用、体内稳态，所述基因参与在体内调节代谢、产热、活化和/或维持棕色和白色脂肪水平。在一方面，本专利技术的特征在于一种产生干细胞的方法。在一个实施方式中，其步骤包括:获得棕色脂肪组织；从该棕色脂肪组织中分离出干细胞；以及在不包含动物产品(animal product)的培养基中培养该干细胞,从而产生干细胞。在另一个实施方式中，所述棕色脂肪组织是来自获自受试者的样品。在另一个实施方式中，所述干细胞对于下列细胞表面标记物的一种或多种是阳性的:CD63、CD90、HLA ABC、CD105、CD73、CD166、CD9、CD44。在另一个实施方式中，所述干细胞对于下列细胞表面标记物的一种或多种是阴性的:CD34、⑶19、⑶86、HLA DR、Lin、⑶106、⑶80、⑶117。在又一个实施方式中，所述干细胞是自体的(autogeneic)。在另一个实施方式中，所述干细胞是异体的(异源的，allogeneic)。在另一个实施方式中，所述培养基包括不含酚红的低葡萄糖DMEM、0.5-20%人血小板裂解液、IXNEAAUX GlutamaxUX庆大霉素和1000单位的肝素。在另一方面，本专利技术的特征在于一种产生干细胞、祖细胞或分化细胞(如活化的棕色脂肪的脂肪细胞(例如，表达UCP-1和/或PRDM16的棕色脂肪的脂肪细胞))的细胞提取物的方法以及将这种提取物给予至受试者体内的脂肪沉着体(脂肪沉积，fat d印osit)从而治疗肥胖的方法。本专利技术的另一方面是一种在受试者中治疗肥胖的方法。在一个实施方式中，该方法包括步骤:从受试者中取出棕色脂肪；和将该棕色脂肪给予至该受试者的脂肪沉着体中，从而在该受试者中治疗肥胖。在一个实施方式中，该脂肪沉着体是白色脂肪沉着体。在另一个实施方式中，该脂肪沉着体是棕色脂肪沉着体。在另一方面，本专利技术的特征在于一种鉴别(识别)参与代谢调节、棕色脂肪活化和/或维持的化合物的方法，包括使由本文中所描述的方法产生的自体干细胞、祖细胞或分化细胞接触测试化合物；在该测试化合物的存在下，测定该干细胞、祖细胞或分化细胞的某些基因(如 PRD-16myf-5UCP-l、CYCl、NDUFAl1、NDUFAl3, CMT1A、EL0VL3、D102、LHX8、C0X8A、CYFIP2、CIDEA、Cox8b、Glut4)的代谢活性、产热和/或活化的水平；以及将在存在该测试化合物下的所述干细胞、祖细胞或分化细胞的代谢活性、产热和/或基因活性的水平与在不存在该测试化合物下的所述干细胞、祖细胞或分化细胞的代谢活性、产热和/或基因活性的水平进行比较，其中，在存在该测试化合物下的代谢活性、产热和/或基因活性的水平与在不存在该测试化合物下的代谢活性、产热和/或基因活性的水平不同则鉴别出:所述测试化合物为参与代谢调节或棕色脂肪活化、产热和/或维持(maintenance)的化合物。在又一方面，本专利技术涉及一种在受试者中治疗代谢紊乱的方法。在一个实施方式中，该方法包括步骤:从供体中取出干细胞；在不含动物产品的培养基中将该干细胞分化为棕色脂肪细胞；以及将 该棕色脂肪细胞给予至受试者中的脂肪沉着体中，从而在该受试者中治疗代谢紊乱。在另一个实施方式中，该代谢紊乱选自由肥胖(obesity)、向心性肥胖(中心型肥胖，central obesity)、糖尿病、高血压症(过度紧张，hypertension)、心气虚(cardiac deficiency)、缺血性心脏病、高血压、甘油三酯血脂异常、HDL血脂异常、胆固醇血脂异常、空腹血糖升高(elevated fasting plasma glucose)、瘦素调节异常(瘦素失调，leptin dysregulation)和脂肪调节异常(脂肪失调，adipon dysregulation)组成的组。在又一个实施方式中，该棕色脂肪细胞是通过皮下注射来给予的。在又一个实施方式中，该棕色脂肪细胞是通过系统性注射(systemic injection)来给予的。在另一个实施方式中，该培养基含有选自由胰岛素、地塞米松、异丁基甲基黄嘌呤和吲哚美辛组成的组的分化剂(differentiation agent)。本专利技术的又一方面是一种鉴别参与代谢调节的化合物的方法。在一个实施方式中，该方法包括步骤:从棕色脂肪组织中分离出干细胞；在不含动物产品的培养基中培养该干细胞；使该干细胞与测试化合物接触；在该测试化合物的存在下，测定该干细胞的代谢活性水平；以及将在存在该测试化合物下的该干细胞的代谢活性水平与在不存在该测试化合物下该干细胞的代谢活性水平进行比较，其中，在存在该测试化合物下的代谢活性水平与在不存在该测试化合物下的代谢活性水平不同则鉴别出:该测试化合物为参与代谢调节的化合物。在一个实施方式中，该测定步骤包括测量脂肪形成(脂肪生成，adipogenesis)。在另一个实施方式中，该方法进一步包括检测PRDM16、BMP7、UCP1、UCP2或MYF5中的一个或多个的水平。在又一个实施方式中，该测试化合物选自由蛋白质、抗体、肽、突变型蛋白(mutein)、多核苷酸、核酸适体(nucleic acid aptamer)和小分子组成的组。本专利技术的一个方面涉及将干细胞分化为棕色脂肪细胞。在一个实施本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种产生干细胞的方法，包括：获得棕色脂肪组织；从所述棕色脂肪组织中分离干细胞；以及在不含动物产品的培养基中培养所述干细胞，从而产生干细胞。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：弗朗西斯科·哈维尔·席尔瓦，马克·魏因雷布，阿米特·N·帕特尔，戴维·A·布尔，
申请(专利权)人：生物修复疗法有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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