本发明专利技术公开了一种烟花苷的制备方法及其应用。本发明专利技术提供的制备方法包括如下步骤：（1）取含烟花苷的药材或提取物用含水有机溶剂提取，得提取液；（2）提取液经浓缩、过滤，得滤液；（3）滤液经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~100%乙醇溶液洗脱，得洗脱液；（4）洗脱液浓缩至适量，用正丁醇萃取；或先用极性小的有机溶剂萃取，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液；（5）正丁醇萃取液浓缩至适量，用碱水萃取，收集水层部分，调PH值至3-6，适当浓缩，经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~100%乙醇溶液洗脱，洗脱液得到的提取物再经自制C18柱和/或制备HPLC分离，即得。本发明专利技术制备得到的烟花苷可作为对照品用于肠炎宁制剂的含量测定。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种烟花苷的制备方法及其应用。本专利技术提供的制备方法包括如下步骤：（1）取含烟花苷的药材或提取物用含水有机溶剂提取，得提取液；（2）提取液经浓缩、过滤，得滤液；（3）滤液经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~100%乙醇溶液洗脱，得洗脱液；（4）洗脱液浓缩至适量，用正丁醇萃取；或先用极性小的有机溶剂萃取，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液；（5）正丁醇萃取液浓缩至适量，用碱水萃取，收集水层部分，调PH值至3-6，适当浓缩，经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~100%乙醇溶液洗脱，洗脱液得到的提取物再经自制C18柱和/或制备HPLC分离，即得。本专利技术制备得到的烟花苷可作为对照品用于肠炎宁制剂的含量测定。【专利说明】一种烟花苷的制备方法及其应用
本专利技术涉及中药领域，特别涉及一种烟花苷的制备方法及其应用。
技术介绍
收载于2010年版《中华人民共和国药典》的肠炎宁糖浆和肠炎宁片具有清热利湿、行气的功效，用于急、慢性胃肠炎，腹湾，细菌性痢疾，小儿消化不良等，临床应用广泛、疗效确切。近几年，国家食品药品监督管理局又新批准了肠炎宁丸、肠炎宁颗粒、肠炎宁胶囊、肠炎宁咀嚼片等剂型。目前已有报道中，肠炎宁制剂质量检测指标成分为东莨菪内酯、没食子酸和鸡屎藤苷甲酯，而肠炎宁制剂中含量较高的黄酮类成分没有明确的检测指标成分。 申请人:采用HPLC法，并以槲皮素、山奈酚和芦丁等3种常见的黄酮类成分对照品作为对照，对肠炎宁制剂进行了分析，发现由于药材是采用水提，所以肠炎宁制剂中槲皮素和山奈酚的含量较低；肠炎宁制剂色谱图中与芦丁对照品色谱峰保留时间相同的地方有色谱峰，但分离度较差，而且峰纯度检测显示该色谱峰中包含了其它成分。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种烟花苷的制备方法，本专利技术制备得到的烟花苷可作为肠炎宁制剂含量测定用的对照品。本专利技术提供的烟花苷的制备方法，包括如下步骤:(I)取含烟花苷的药材或提取物用含水有机溶剂提取，得提取液；(2)提取液经浓缩、过滤，得滤液；(3)滤液经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~100%甲醇或乙醇溶液洗脱，得洗脱液；(4)洗脱液经浓缩，用正丁醇萃取；或先用极性小的有机溶剂萃取，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液；(5)正丁醇萃取液经浓缩，用碱水萃取，收集水层部分，调PH值至3-6，浓缩，经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~100%甲醇或乙醇溶液洗脱，洗脱液得到的提取物再经自制C18柱和/或制备HPLC分离，即得。本专利技术优选的烟花苷的制备方法，包括如下步骤:(I)取含烟花苷的药材或提取物用30%~100%甲醇或乙醇溶液提取，得提取液；(2)提取液经浓缩、过滤，得滤液；(3)滤液经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~50%甲醇或乙醇溶液洗脱，得洗脱液；(4)洗脱液经浓缩，先用乙酸乙酯萃取弃去，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液； (5)正丁醇萃取液经浓缩，用碱水萃取，收集水层部分，调PH值至4-5，浓缩，浓缩液经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~50%甲醇或乙醇溶液洗脱，洗脱液得到的提取物再经自制C18柱和/或制备HPLC，以体积比例为20:80~40:60的甲醇-水混合溶液洗脱，即得。本专利技术更优选的烟花苷的制备方法，包括如下步骤:(I)取含烟花苷的药材或提取物，用30%~75%乙醇溶液提取，得提取液；(2)提取液经浓缩、过滤，得滤液；(3)滤液经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%乙醇溶液洗脱，得洗脱液；(4)洗脱液经浓缩，先用乙酸乙酯萃取弃去，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液；(5)正丁醇萃取液经浓缩，用5%碳酸钠溶液萃取，收集水层部分，调PH值至4-5，浓缩，经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30 %乙醇溶液洗脱，洗脱液得到的提取物再经自制C18柱和/或制备HPLC，以体积比例为20:80~40:60甲醇-水混合溶液洗脱，即得。本专利技术提供的烟花苷可作为肠炎宁制剂含量测定用的对照品。本专利技术所述的肠炎宁制剂为肠炎宁口服液、肠炎宁糖浆、肠炎宁胶囊、肠炎宁颗粒、肠炎宁片、肠炎宁咀嚼片或肠炎宁丸中的任意一种。本专利技术创新之处在于:通过HPLC法对肠炎宁制剂进行色谱分析，并利用光谱分析和峰纯度检测技术筛选出分离度和峰纯度都较好的黄酮类成分色谱峰，然后对其进行分离、鉴定，最终分离鉴定得到其中一个黄酮类成分烟花苷。通过对烟花苷含量测定方法学考察表明，采用HPLC法测定肠炎宁制剂中的烟花苷简便、快速、准确、重复性好，有助于更好的控制肠炎宁制剂的质量 。本专利技术制备得到的烟花苷经标定纯度大于98%，可作为肠炎宁制剂含量测定用的对照品。下面将通过一些实验例对本专利技术作进一步说明。实验例I肠炎宁制剂黄酮类成分对照品的研究1、肠炎宁制剂中待分离目标成分的筛选(I)色谱条件=DikmaC18色谱柱(250mmX4.6mm, 5 μ m);流动相:0.3%冰醋酸水溶液一乙腈(梯度洗脱，Omin比例为85:15,60min比例为65:35);检测波长为350nm。(2)供试品溶液的制备:取肠炎宁颗粒粉末约4.0g，加入60%甲醇100ml，超声(功率250W，频率33KHz)处理30分钟，放冷，过滤，滤液浓缩至约30ml，过滤，经聚酰胺柱吸附，依次用水和60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，浓缩至适量，滤过，取续滤液，即得。(3)检测及结果:取供试品溶液20μ 1，按(I)项下色谱条件进样分析，经过对峰高较高且分离度较好的色谱峰进行光谱分析和峰纯度检测，确定出峰时间为18分钟左右的黄酮类成分为待分离成分。2、提取分离取生产上用于生产肠炎宁颗粒的稠膏1kg，加30 %乙醇10L，超声，静置，过滤，滤液浓缩至5L，过滤，经聚酰胺柱吸附，依次用水、30%乙醇和60%乙醇洗脱，经HPLC分析，待分离成分主要存在于30%乙醇洗脱部分，30 %乙醇洗脱部分回收乙醇并减压浓缩至1L，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，经HPLC分析，待分离成分主要存在于正丁醇萃取液中，正丁醇萃取液浓缩至500ml，用5%碳酸钠溶液3000ml分3次萃取，经HPLC分析，待分离成分主要存在于水层部分，水层部分用酸调PH值至4~5，浓缩至2500ml，经聚酰胺柱吸附，依次用水和30%乙醇洗脱，收集30%乙醇洗脱部分，浓缩至乙醇含量少于10%，经自制YMGC18H3柱吸附，依次用10%甲醇、30%甲醇和50%甲醇洗脱，经HPLC分析，待分离成分主要存在于30%甲醇洗脱部分，30%甲醇洗脱部分减压浓缩后，用少量35%甲醇溶解，再经制备HPLC，甲醇-水(35:65)洗脱，得目标成分。3、结构鉴定目标成分:黄色针状结晶，盐酸镁粉反应及Molish反应均呈阳性。UV(MeOH)nm:329，268。1H-Nmr(Dmso-CI6JoomHz) δ:7.97 (2Η, d, J = 8.7Ηζ, Η-2 '，6 ' ) ,6.87 (2Η,d, J = 8.7Ηζ, Η-3 ' ,5 ' )，6.40 (1Η, brs, Η_8)，6.19 (1Η, brs, Η_6)，5.30 (1Η, d, J =7.4Ηζ, H — I " )，5.24(1Η, brs, H-1 " ' )。13C—NMR(100MHzDMS0_d6) δ:177.9(C_4)，164.2 (C-7)本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种烟花苷的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤： （1）取含烟花苷的药材或提取物用含水有机溶剂提取，得提取液； （2）提取液经浓缩、过滤，得滤液； （3）滤液经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~100%甲醇或乙醇溶液洗脱，得洗脱液； （4）洗脱液经浓缩，用正丁醇萃取；或先用极性小的有机溶剂萃取，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液； （5）正丁醇萃取液经浓缩，用碱水萃取，收集水层部分，调PH值至3‑6，浓缩，经聚酰胺柱吸附，水洗弃去，30%~100%甲醇或乙醇溶液洗脱，洗脱液得到的提取物再经自制C18柱和/或制备HPLC分离，即得。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吴孔松，吴朝阳，吴安明，
申请(专利权)人：江西天施康中药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江西;36
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。