一种同时测定茶鲜叶中有机磷类及拟除虫菊酯类农药残留量的分析方法，其特征在于：茶鲜叶试样用含体积分数为1%乙酸的乙腈溶液超声提取，再用适量PSA、C18和GCB混合填料净化，上清液氮吹浓缩至近干，分别用丙酮和正己烷溶解定容，DB-1701和HP-5石英毛细管柱程序升温分离，GC/FPD和GC/μECD检测，最后用基质外标法定量。通过试验确证，该方法线性范围宽，检测灵敏度、准确度及精密度等技术指标均满足残留分析的要求，并且前处理操作简单、方便快速，为同时测定茶鲜叶中有机磷及拟除虫菊酯类农药残留的分析研究提供了可靠的手段。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】一种，其特征在于：茶鲜叶试样用含体积分数为1%乙酸的乙腈溶液超声提取，再用适量PSA、C18和GCB混合填料净化，上清液氮吹浓缩至近干，分别用丙酮和正己烷溶解定容，DB-1701和HP-5石英毛细管柱程序升温分离，GC/FPD和GC/μECD检测，最后用基质外标法定量。通过试验确证，该方法线性范围宽，检测灵敏度、准确度及精密度等技术指标均满足残留分析的要求，并且前处理操作简单、方便快速，为同时测定茶鲜叶中有机磷及拟除虫菊酯类农药残留的分析研究提供了可靠的手段。【专利说明】
本专利技术涉及农药残留量的分析方法领域，具体涉及一种，该分析方法是采用改进的QuEChERS法对茶鲜叶进行提取、净化，再用气相色谱法对有机磷和拟除虫菊酯类农药进行检测，以达到快速、简便、可靠的目的。
技术介绍
茶叶是世界三大植物饮料之一，因其独特的口感和具有抗癌、防突变、清除自由基、延缓衰老等保健功效越来越受到人们的青睐。我国是茶叶生产大国也是出口大国，施用农药是保证茶叶产量，控制其生长过程中免受病虫害威胁的最有效的手段，有机磷类农药(英文名称:Organophosphorus pesticides)和拟除虫菊酯类农药(英文名称:Pyrethroidpesticides)因广谱、高效、成本低、用量少被广泛应用于茶叶病虫害的防治工作。但是已有研究证实这两类农药会对人体的神经系统产生毒害作用，部分品种具有致癌、致畸、致突变作用以及一定的蓄积性，过量使用有可能在人体内累积，造成慢性蓄积中毒。因此，关于有机磷和拟除虫菊酯两类农药在茶叶中的残留一直是人们关注的焦点问题。国际上许多国家、特别是欧盟和日本制定了苛刻的农药残留限量法规，以限制茶叶中农药的最大残留限量(MRL)。我国国家标准GB2763-2012《食品中农药最大残留限量》规定了茶叶中25种农药的MRL，《中华人民共和国农业部公告第199号》规定了 21种农药禁止或限制在茶叶中使用。欧盟在2008年3月I日发布了新的农药残留限量标准法规(EC)Nol49/2008，更新了茶叶中农药残留的MRL，新法规涉及茶叶农药残留现行限量标准221项，临时性限量标准171项，共392项，且90%以上的农药采用方法检出限作为MRL。日本于2006年5月29日正式实施食品中农业化学品“肯定列表制度”，该制度中与茶叶有关的农药残留限量标准达251项，且大多数农药的MRL要求不大于0.lmg/kg，对未设定限量标准的农药全部则执行“一律标准”，即含量不得超过0.01mg/kg，且全部采用“干茶法”进行检测。这在很大程度上限制了我国茶叶的出口，同时对茶叶中农药残留的检测也提出了更高的要求。近年来，有关茶叶中农药残留的分析方法已有不少研究报道，但主要集中在成茶上，对茶鲜叶中的残留研究的不多。茶鲜叶作为茶叶加工的原料，是决定茶叶品质的物质基础，它的质量好坏直接关系到茶叶品质的优劣。因此，直接测定茶鲜叶中的农药残留量具有重要的现实意义，不但可以实现茶叶农药的源头控制，有效引导农民正确地对茶园用药，提高饮茶安全性，而且可以减少农药不合理地使用对茶园土壤环境造成污染。由于茶鲜叶比成茶含有更多的水分、色素、水溶性灰分、茶多酚等干扰物质，更容易造成提取净化困难，因此现有的测定茶叶中有机磷类及菊酯类农药的检测方法，不适用于茶鲜叶基质的测定。国内虽有一些关于茶鲜叶农残的研究工作报道，但仅涉及六六六、滴滴涕等有机氯农药以及少数几种菊酯类农药的检测，对有机磷等其它类型农药的检测方法研究较少。同时分析茶鲜叶中多种有机磷类及菊酯类农药的残留分析方法更是鲜有报道。而且在茶鲜叶农药残留提取过程中，现有的报道主要运用传统的振荡提取、均质提取、液液萃取等方法，净化手段针对不同的目标农药多采用浓硫酸磺化法和柱层析净化法。这些前处理方法消耗有机溶剂多、样品通量小、应用范围有限、操作繁琐、耗费时间、成本高，对于多类多残留不是简单或有效的方法。
技术实现思路
本专利技术提供一种，其目的在于解决现有的测定茶叶中有机磷类及菊酯类农药的检测方法耗时长、操作繁琐、消耗有机溶剂多以及检测结果不够稳定可靠的问题。为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案是:一种，所述分析方法有两部分组成:第一部分，用气相色谱法分别建立已知梯度浓度的被测的有机磷农药和拟除虫菊酯农药的标准曲线；所述标准曲线的建立由以下步骤组成:第一步，制备空白基质提取液，制备方法由以下步骤组成:(I)称取5.0g经测定不含被测的有机磷农药和拟除虫菊酯农药的空白茶鲜叶样品，置于50mL离心管中，再向离心管中加入IOmL含体积分数为I %乙酸的乙腈溶液，混匀，超声提取10?15min,再加入2g无水乙酸钠和Ig无水硫酸镁,润旋1.5min?2.5min,然后，以9000r/min的转速离心3.5min?4.5min，取上清液即为待净化的空白基质提取液；(2)另取一支IOmL离心管,加入0.15g C18、0.15g N-丙基乙二胺、0.12g石墨化碳黑和0.3g无水硫酸镁,加入4mL所述待净化的空白基质提取液,润旋1.5min?2.5min,以9000r/min的转速离心4.5min?5.5min ;离心后移取2份上清液至2支刻度试管中，每份上清液为1.5mL,再在50?60°C水浴下将每份上清液用氮气缓慢吹至50?70 μ L ;再在其中一份上清液中加入丙酮以定容至0.75mL，过有机系滤膜后，得到用于配制有机磷农药的空白基质提取液，另一份上清液中加入正己烷以定容至0.75mL，过有机系滤膜后，得到拟除虫菊酯农药的空白基质提取液；第二步，以所述第一步中得到的空白基质提取液为溶剂分别配制有机磷农药的基质混合标准工作溶液和拟除虫菊酯农药的基质混合标准工作溶液，其中，所述有机磷农药是指敌敌畏、乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、三唑磷，所述拟除虫菊酯农药是指甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯；所述有机磷农药的基质混合标准工作溶液中各有机磷农药的浓度范围以及所述拟除虫菊酯农药的基质混合标准工作溶液中各拟除虫菊酯农药的浓度范围为:【权利要求】1.一种，其特征在于:所述分析方法有两部分组成: 第一部分，用气相色谱法分别建立已知梯度浓度的被测的有机磷农药和拟除虫菊酯农药的标准曲线；所述标准曲线的建立由以下步骤组成: 第一步，制备空白基质提取液，制备方法由以下步骤组成: (1)称取5.0 g经测定不含被测的有机磷农药和拟除虫菊酯农药的空白茶鲜叶样品，置于50 mL离心管中，再向离心管中加入10 mL含体积分数为1%乙酸的乙腈溶液，混匀，超声提取10~15 min,再加入2 g无水乙酸钠和I g无水硫酸镁，润旋1.5min~2.5min,然后，以9000 r/min的转速离心3.5mirT4.5min，取上清液即为待净化的空白基质提取液； (2)另取一支10mL离心管,加入0.15g C18、0.15g N-丙基乙二胺、0.12 g石墨化碳黑和0.3g无水硫酸镁，加入4mL所述待净化的空白基质提取液，涡旋1.5mirT2.5min,以9000r/min的转速离心4.5mirT5.5min ;离心后移取2份上清液至2支刻度试管中，每份上清液本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种同时测定茶鲜叶中有机磷类及拟除虫菊酯类农药残留量的分析方法，其特征在于：所述分析方法有两部分组成：第一部分，用气相色谱法分别建立已知梯度浓度的被测的有机磷农药和拟除虫菊酯农药的标准曲线；所述标准曲线的建立由以下步骤组成：第一步，制备空白基质提取液，制备方法由以下步骤组成：（1）称取5.0 g经测定不含被测的有机磷农药和拟除虫菊酯农药的空白茶鲜叶样品，置于50 mL离心管中，再向离心管中加入10 mL含体积分数为1%乙酸的乙腈溶液，混匀，超声提取10～15 min，再加入2 g无水乙酸钠和1 g无水硫酸镁，涡旋1.5min~2.5min，然后，以9000 r/min的转速离心3.5min~4.5min，取上清液即为待净化的空白基质提取液；（2）另取一支10 mL离心管，加入0.15g C18、0.15g N‑丙基乙二胺、0.12 g 石墨化碳黑和0.3g无水硫酸镁，加入4mL所述待净化的空白基质提取液，涡旋1.5min~2.5min，以9000 r/min的转速离心4.5min~5.5min；离心后移取2份上清液至2支刻度试管中，每份上清液为1.5 mL，再在50～60℃水浴下将每份上清液用氮气缓慢吹至50~70μL；再在其中一份上清液中加入丙酮以定容至0. 75 mL，过有机系滤膜后，得到用于配制有机磷农药的空白基质提取液，另一份上清液中加入正己烷以定容至0. 75 mL，过有机系滤膜后，得到拟除虫菊酯农药的空白基质提取液；第二步，以所述第一步中得到的空白基质提取液为溶剂分别配制有机磷农药的基质混合标准工作溶液和拟除虫菊酯农药的基质混合标准工作溶液，其中，所述有机磷农药是指敌敌畏、乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、三唑磷，所述拟除虫菊酯农药是指甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯；所述有机磷农药的基质混合标准工作溶液中各有机磷农药的浓度范围以及所述拟除虫菊酯农药的基质混合标准工作溶液中各拟除虫菊酯农药的浓度范围为：第三步，用气相色谱法测定所述有机磷农药的基质混合标准工作溶液和拟除虫菊酯农药的基质混合标准工作溶液中各农药组分的色谱峰保留时间和色谱峰面积，以色谱峰保留时间定性，然后以质量浓度为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标绘制出有机磷农药和拟除虫菊酯农药的标准曲线；其中，测定有机磷农药的色谱条件为：色谱柱：型号为DB‑1701的毛细管色谱柱，规格为30m×0.32mm×0.25μm；进样量：1.0μL，不分流进样；进样口温度：220℃，隔垫吹扫3mL/min；柱温：初始温度90℃，保持1min，20℃/min升至200℃，保持9min，30℃/min升至245℃，保持8min；载气：高纯氮气，纯度≥99.999%；恒流模式，流速3mL/min；检测器：火焰光度检测器；检测器温度：245℃；氢气：流量为75 mL/min；空气：流量为100 mL/min；尾吹气：高纯氮气，流量为60mL/min； 测定拟除虫菊酯农药的色谱条件为：色谱柱：型号为HP‑5的毛细管色谱柱，规格为30m×0.32mm×0.25μm；进样量：1.0μL，不分流进样；进样口温度：220℃，隔垫吹扫3mL/min；柱温：初始温度80℃，保持0.3min，30℃/min升至180℃，保持5min，20℃/min升至260℃，保持23min：载气：高纯氮气，纯度≥99.999%；恒流模式，流速1mL/min；检测器：微池电子捕获检测器；检测器温度：300℃；尾吹气：高纯氮气，60mL/min； 第二部分，测定茶鲜叶样品中所述第一部分中的7种有机磷农药和7种拟除虫菊酯农药残留量，分析方法包括以下步骤：第一步，对茶鲜叶样品进行提取；称取已粉碎的茶鲜叶样品，置于50 mL离心管中，再加入含体积分数为1%乙酸的乙腈溶液，其中，所述茶鲜叶样品与所述乙腈溶液的投入比为向每0.5g茶鲜叶样品中投入1mL乙腈溶液，混匀，超声提取10～15 min；再加入无水乙酸钠和无水硫酸镁，其中，所述茶鲜叶样品、无水乙酸钠以及无水硫酸镁三者的质量比为5:2:1，涡旋1.5min~2.5min，以9000 r/min的转速离心3.5min~4.5min，取上清液即为待净化的茶鲜叶样品提取液；第二步，对所述待净化的茶鲜叶样品提取液进行净化；另取一支10 mL离心管，加入C18、N‑丙基乙二胺、石墨化碳黑和无水硫酸镁，加入所述待净化的茶鲜叶样品提取液，其中，投入的C18、N‑丙基乙二胺、石墨化碳黑以及无水硫酸镁在待净化的茶鲜叶样品提取液中的含量分别为37.5mg/mL、37.5mg/mL、30 mg/mL以及75mg/mL，涡旋1.5min~2.5min，以9000 r/min的转速离心4.5min~5.5min；离心后移取2份上清液至2支刻度试管中...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘腾飞，董明辉，杨代凤，谢修庆，蒋宝南，邓金花，张丽，顾俊荣，陆皓茜，李军，钱辉，
申请(专利权)人：江苏太湖地区农业科学研究所，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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