一株根瘤菌及其应用制造技术

一株根瘤菌及其应用，它涉及一株根瘤菌及其应用。本发明专利技术目的是为了解决现有大豆接种的根瘤菌在长期连作的条件下竞争结瘤能力和固氮酶活性差的问题，本发明专利技术一株根瘤菌，它为海伦慢生根瘤菌（Bradyrhizobium hailunense）S-S20131G64，已于保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2014年1月10日，保藏编号为CGMCC No.8693。本发明专利技术的应用是指在长期大豆连作的土壤上的应用。本发明专利技术的根瘤菌具有高效结瘤的特性，能够提高大豆生物量，改善大豆氮素营养，适用于黑龙江省长期大豆连作土壤区。本发明专利技术应用于农业领域。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】一株根瘤菌及其应用，它涉及一株根瘤菌及其应用。本专利技术目的是为了解决现有大豆接种的根瘤菌在长期连作的条件下竞争结瘤能力和固氮酶活性差的问题，本专利技术一株根瘤菌，它为海伦慢生根瘤菌（Bradyrhizobium?hailunense）S-S20131G64，已于保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2014年1月10日，保藏编号为CGMCC?No.8693。本专利技术的应用是指在长期大豆连作的土壤上的应用。本专利技术的根瘤菌具有高效结瘤的特性，能够提高大豆生物量，改善大豆氮素营养，适用于黑龙江省长期大豆连作土壤区。本专利技术应用于农业领域。【专利说明】一株根瘤菌及其应用
本专利技术涉及一株根瘤菌及其应用。
技术介绍
我国是大豆生产和消费大国，由于人口的不断怎加导致大豆的消费量也在不断地增长，供需矛盾十分紧张。为了满足人们对大豆产品的需求，农民不得不在有限的耕地上连续种植大豆，目前大豆连作面积已达35%以上,而大豆又是典型的不耐连作的作物,长期的连作会导致大豆结瘤、固氮能力下降、生长发育受阻，多种病虫害连年发生、产量和品质下降，甚至绝产。目前用于大豆接种的根瘤菌大多来自于非长期连作条件下分离的根瘤菌，其抗逆能力、定殖能力、竞争结瘤能力、固氮酶活性等都不理想，影响了大豆的生产。因此筛选出能够在长期大豆连作土壤上与大豆根系建立有效共生关系的高效根瘤菌对于大豆生产具有重要的作用。
技术实现思路
本专利技术目的是为了解决现有大豆接种的根瘤菌在长期连作的条件下竞争结瘤能力和固氮酶活性差的问题，而提供一株根瘤菌及其应用。本专利技术一株根瘤菌，它为海伦慢生根瘤菌(Bradyrhizobium hai Iunense )S-S20131G64，已于保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路I号院3号，保藏日期为2014年I月9日，保藏编号为CGMCC N0.8693。本专利技术一株根瘤菌的应用是指根瘤菌在长期大豆连作的土壤上的应用。本专利技术从黑龙江海伦农业生态实验站长期大豆连作实验地选取地上部生长旺盛的大豆植株分离筛选出一株根瘤菌，菌落为圆形，乳白色半透明，粘质较多，边缘整齐，菌落表面光滑，培养5-7d后菌落直径达0.8-2.0mm。挑取菌苔涂片，油镜下观察，根瘤菌为(0.5-0.8)X (1.1-0.3) μπι的小杆菌。内含β -羟基丁酸，即折射强的似空洞的颗粒或使菌体呈环节状革兰氏阴性(G-)，无芽孢，菌体单个或成对。对本专利技术所分离的菌株的recA序列进行测序，将获得的recA基因序列输入GenBank，通过Blastn程序对数据库中的所有序列进行比较分析，结果发现本专利技术的recA基因序列与慢生根瘤菌属的已有模式菌株具有较高的相似性，其中与B.1iaoningense的序列相似性为95.5%，从而确定分离出来的根瘤固氮菌S-S20131G64为慢生根瘤菌属的新菌株系，并命名为海伦慢生根瘤菌(Bradyrhizobium hailunense) S-S20131G64。本专利技术具有如下有益效果:1.本专利技术的根瘤固氮株系S-S20131G64具有高效结瘤的特性，接种该根瘤菌至少能够提高大豆生物量20-32%，可用于生产实践中；2.通过接种本专利技术的根瘤固氮株系S-S20131G64，能够改善大豆氮素营养，从而达到大豆高产且培肥土壤的目的；3.本专利技术的根瘤固氮菌株系S-S20131G64适用于黑龙江省长期大豆连作土壤区，作为大豆常规栽培的措施之一。【专利附图】【附图说明】图1为根瘤菌S-S20131G64在YMA培养基上的菌落形态；图2为根瘤菌S-S20131G64在革兰氏染色后在显微镜下的观察图像；图3为根瘤菌S-S20131G64的recA部分序列分析系统发育树状图。【具体实施方式】本专利技术技术方案不局限于以下所列举【具体实施方式】，还包括各【具体实施方式】间的任意组合。【具体实施方式】一:本实施方式一株根瘤菌为海伦慢生根瘤菌(Bradyrhizobiumhai lunense) S-S20131G64,已于保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路I号院3号，保藏日期为2014年I月9日，保藏编号为CGMCC N0.8693。本实施方式的海伦慢生根瘤菌(Bradyrhizobium hai lunense) S-S20131G64应用在长期大豆连作的土壤上。本实施方式从黑龙江海伦农业生态实验站长期大豆连作实验地选取地上部生长旺盛的大豆植株分离筛选出一株根瘤菌，菌落为圆形，乳白色半透明，粘质较多，边缘整齐，菌落表面光滑，培养5-7d后菌落直径达0.8-2.0mm。挑取菌苔涂片，油镜下观察，根瘤菌为(0.5-0.8)X (1.1-0.3) μπι的小杆菌。内含β -羟基丁酸，即折射强的似空洞的颗粒或使菌体呈环节状革兰氏阴性(G-)，无芽孢，菌体单个或成对。对本专利技术所分离的菌株的recA序列进行测序，将获得的recA基因序列输入GenBank，通过Blastn程序对数据库中的所有序列进行比较分析，结果发现本专利技术的recA基因序列与慢生根瘤菌属的已有模式菌株具有较高的相似性，其中与B.1iaoningense的序列相似性为95.5%，从而确定分离出来的根瘤固氮菌S-S20131G64为慢生根瘤菌属的新菌株系，并命名为海伦慢生根瘤菌(Bradyrhizobium hai lunense) S-S20131G64。本实施方式具有如下有益效果:1.本实施方式的根瘤固氮株系S-S20131G64具有高效结瘤的特性，接种该根瘤菌至少能够提高大豆生物量20-32%，可用于生产实践中；2.通过接种本实施方式的根瘤固氮株系S-S20131G64，能够改善大豆氮素营养，从而达到大豆高产且培肥土壤的目的；【具体实施方式】二:本实施方式一株根瘤菌的应用是指根瘤菌在长期大豆连作的土壤上的应用。本实施方式的根瘤固氮菌株系S-S20131G64适用于黑龙江省长期大豆连作土壤区，作为大豆常规栽培的措施之一。【具体实施方式】三:本实施方式根瘤菌S-S20131G64的分离按以下步骤进行:一、从黑龙江海伦农业生态实验站长期大豆连作实验地选取地上部生长旺盛的大豆植株，观察其根部着生的根瘤，摘取颜色为粉红色的根瘤置于小采样瓶中，瓶子底部放入无水硫酸钠作为干燥剂。二、将采取的根瘤带回实验室后，用无菌水清洗三次，使用3%次氯酸钠消毒5min,并用无菌水洗涤消过毒的根瘤7次，保留最后一次的洗涤水用于YMA平板涂布检测根瘤消毒彻底与否。三、 用无菌的镊子，将单个的消毒洗涤的瘤子转移到无菌的EP管内，并用灭菌的枪头捣碎瘤子，然后，直接用该枪头在YMA培养基平板上划线。YMA培养基平板在28°C恒温培养箱内倒置培养，每日观察，直至长出单菌落，选择边缘整齐，乳白色半透明的单菌落接种到YMA固体培养基上。根瘤菌S-S20131G64在YMA培养基上的菌落形态(如图1所示):菌落为圆形，乳白色半透明，粘质较多，边缘整齐，菌落表面光滑，培养5-7d后菌落直径达0.8-2.0mm0挑取菌苔涂片，油镜下观察，根瘤菌为(0.5-0.8)X (1.1-0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株根瘤菌，其特征在于它为海伦慢生根瘤菌（Bradyrhizobium hailunense）S‑S20131G64，已保藏中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2014年1月9日，保藏编号为CGMCC No.8693。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：严君，韩晓增，冀照君，郭爱雪，
申请(专利权)人：中国科学院东北地理与农业生态研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23