筛选钙激活氯离子通道抑制剂的细胞模型及筛选方法技术

技术编号:10186177 阅读:256 留言:0更新日期:2014-07-04 17:41
本发明专利技术提供了一种筛选钙激活氯离子通道抑制剂的细胞模型及筛选方法,依次包括如下步骤:(1)构建Anoctamin1或Anocatmin2以及YFP-H148Q/I152L的真核表达载体;(2)将上述两种载体分别稳定转染入FRT细胞中,使FRT细胞共表达YFP-H148Q/I152L和Anoctamin1或Anocatmin2两种蛋白,经过多次有限稀释,获取FRT细胞模型;(3)将FRT细胞模型传代到黑壁透明底的黑壁微孔板中;(4)将待测小分子化合物加入黑壁微孔板中,孵育后加入使细胞内钙离子浓度升高的试剂和高浓度碘离子,通过检测相对荧光强度的变化,可筛选钙激活氯离子通道抑制剂。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种筛选钙激活氯离子通道抑制剂细胞模型,其特征在于是一种共表达Anoctamin1或Anocatmin2和YFP‑H148Q/I152L两种蛋白的FRT细胞,Anoctamin1或Anocatmin2和YFP‑H148Q/I152L两种蛋白分别位于两个不同的真核表达载体,两种真核表达载体的真核抗性不同。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:郝峰
申请(专利权)人:吉林医药学院
类型:发明
国别省市:吉林;22

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