用于人乳头状瘤病毒的疫苗及其使用方法技术

本发明专利技术公开改进的抗-HPV免疫原和编码它们的核酸分子。所公开的免疫原包括具有共有序列HPV6、HPV11、HPV33以及HPV58E6和E7的那些免疫原。本文公开药物组合物、包含其的重组疫苗和活减毒疫苗，还公开在个体中诱导针对HPV的免疫应答的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于人乳头状瘤病毒的疫苗及其使用方法
本专利技术涉及改进的人乳头状瘤病毒(HPV)疫苗、用于诱导免疫应答的改进的方法、以及用于针对HPV来预防性和/或治疗性免疫个体的改进的方法。
技术介绍
乳头状瘤病毒是小DNA病毒，其包含至多7个早期基因和2个晚期基因。通常，乳头状瘤病毒早期基因表示为E1-E7，并且乳头状瘤病毒晚期基因表示为L1和L2。若干个物种的动物可被乳头状瘤病毒家族的成员感染。人乳头状瘤病毒(HPV)感染是常见的，并且可发生性传播。基于DNA序列的同源性，HPV已经分成56种或更多种类型。16和18型HPV(其引起上皮异常增生和其它病变)通常和下列情况有关：癌症风险增加，特别是子宫颈、阴道、阴门以及肛管的原位和侵入性癌瘤。在全世界将近88%的子宫颈癌是HPV亚型16、18、45、31、33、52以及58所造成的结果。此外，各种研究已揭示HPV6和HPV11存在于大多数发生的复发性呼吸道乳头状瘤病中。尽管已知了HPV6和HPV11与生殖器疣的相关性并且在小百分比的子宫颈癌病例中发现了它们，但已经在2.6%至5.2%的所有情况的低级子宫颈病变中发现了HPV6和HPV11。此外，HPV6和HPV11现已发现与大约20%的现被视为子宫颈癌先兆的低级鳞状上皮内病变，包括2级和3级子宫颈上皮内瘤形成和轻度子宫颈发育不良有关。更多的研究已揭示了两种血清型与各种形式的耳鼻喉科疾病，包括生殖器疣、复发性呼吸道乳头状瘤病、肺癌、扁桃体癌、喉癌、以及头颈部本来良性肿瘤的其它恶性转化和发育不良的相关性。此研究的发现结果揭示了使用共有序列DNA疫苗来对抗HPV6和HPV11的光明前景。DNA疫苗相对于更加传统的疫苗接种法具有许多概念上的优点，如活减毒病毒和重组蛋白基疫苗。DNA疫苗安全、稳定、容易生产并且在临床试验的人中具有良好耐受性，这表明质粒整合的迹象微乎其微[Martin,T.等,PlasmidDNAmalariavaccine:thepotentialforgenomicintegrationafterintramuscularinjection.HumGeneTher,1999.10(5):第759-68页；Nichols,W.W.等,PotentialDNAvaccineintegrationintohostcellgenome.AnnNYAcadSci,1995.772:第30-9页]。另外，DNA疫苗非常适于反复施用，因为疫苗的效果实际上不受到对于载体预先存在的抗体滴度的影响[Chattergoon,M.、J.Boyer以及D.B.Weiner,Geneticimmunization:anewerainvaccinesandimmunetherapeutics.FASEBJ,1997.11(10):第753-63页]。然而，在移至较大动物时，临床采用DNA疫苗的一个主要障碍是平台免疫原性的降低[Liu,M.A.和J.B.Ulmer,HumanclinicaltrialsofplasmidDNAvaccines.AdvGenet,2005.55:第25-40页]。DNA疫苗免疫原工程化中的近期技术进展如密码子优化、RNA优化和添加免疫球蛋白前导序列已经提高了DNA疫苗的表达和免疫原性[Andre,S.等,IncreasedimmuneresponseelicitedbyDNAvaccinationwithasyntheticgp120sequencewithoptimizedcodonusage.JVirol,1998.72(2):第1497-503页；Deml,L.等,MultipleeffectsofcodonusageoptimizationonexpressionandimmunogenicityofDNAcandidatevaccinesencodingthehumanimmunodeficiencyvirustype1Gagprotein.JVirol,2001.75(22):第10991-1001页；Laddy,D.J.等,Immunogenicityofnovelconsensus-basedDNAvaccinesagainstavianinfluenza.Vaccine,2007.25(16):第2984-9页；Frelin,L.等,CodonoptimizationandmRNAamplificationeffectivelyenhancestheimmunogenicityofthehepatitisCvirusnonstructural3/4Agene.GeneTher,2004.11(6):第522-33页]，以及质粒递送系统方面的近期开发的技术如电穿孔[Hirao,L.A.等,Intradermal/subcutaneousimmunizationbyelectroporationimprovesplasmidvaccinedeliveryandpotencyinpigsandrhesusmacaques.Vaccine,2008.26(3):第440-8页；Luckay,A.等,EffectofplasmidDNAvaccinedesignandinvivoelectroporationontheresultingvaccine-specificimmuneresponsesinrhesusmacaques.JVirol,2007.81(10):第5257-69页；Ahlen,G.等,InvivoelectroporationenhancestheimmunogenicityofhepatitisCvirusnonstructural3/4ADNAbyincreasedlocalDNAuptake,proteinexpression,inflammation,andinfiltrationofCD3+Tcells.JImmunol,2007.179(7):第4741-53页]。另外，研究表明相比于单独的天然抗原，共有免疫原的使用能够增加细胞免疫应答的宽度[Yan.,J.等,EnhancedcellularimmuneresponseselicitedbyanengineeredHIV-1subtypeBconsensus-basedenvelopeDNAvaccine.MolTher,2007.15(2):第411-21页；Rolland,M.等,Reconstructionandfunctionofancestralcenter-of-treehumanimmunodeficiencyvirustype1proteins.JVirol,2007.81(16):第8507-14]。仍存在对于改进的疫苗和预防与治疗HPV感染、尤其是引起子宫颈癌和/或肺癌、扁桃体癌以及喉癌的感染的方法的需要。
技术实现思路
专利技术概述本专利技术的方面包括核酸分子，所述核酸分子包含编码HPV抗原的选自由以下各项组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1、SEQIDNO:3、SEQIDNO:5、SEQIDNO:7；其具有90%同源性的片段；及其组合。在一些方面，所述核酸分子包括包含选自由以下各项组成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种核酸分子，其包含：编码HPV抗原的选自由以下各项组成的组的核苷酸序列：SEQ ID NO:1；SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:5；SEQ ID NO:7；其具有90%同源性的片段；及其组合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种核酸分子，其由以下组成：编码HPV抗原的选自由以下各项组成的组的核苷酸序列：SEQIDNO:1；缺少IgE前导序列SEQIDNO:9的SEQIDNO:1。2.如权利要求1所述的核酸分子，其由以下组成：SEQIDNO:1。3.一种核酸分子，其由选自由以下各项组成的组的核苷酸序列组成：编码SEQIDNO:2的核苷酸序列；编码缺少IgE肽SEQIDNO:10的SEQIDNO:2的核苷酸序列。4.如权利要求3所述的核酸分子，其由以下组成：编码SEQIDNO:2的核苷酸序列。5.如权利要求1至4中任一项所述的核酸分子，其中所述分子是质粒。6.一种药物组合物，其包含如权利要求1至5中任一项所述的核酸分子。7.包含如权利要求1至5中任一项所述的核酸分子的组合物在制备用于在个体中诱导针对HPV的免疫应答的药物中的用途。8.如权利要求7所述的用途，其进一步包括将所述核酸分子通过电穿孔引入至所述个体体内。9.一种重组疫苗，其包含如权利要求1至5中任一项所述的核酸分子。10.如权利要求9所述的重组疫...

【专利技术属性】
技术研发人员：大卫·B·韦纳，严健，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚大学理事会，
类型：发明
国别省市：美国;US