用于扩增核酸的试剂容器及其制备方法、存储试剂的方法和用于核酸分析的微流体系统技术方案

本发明专利技术提供能在较长一段时间内维持试剂稳定性的试剂容器，用于制备所述试剂容器的方法，存储试剂的方法，以及用于进行细胞结合、裂解、核酸提取和扩增的微流体系统。因此，该容器中所存储的试剂能在反应中维持其活性以及其稳定性。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供能在较长一段时间内维持试剂稳定性的试剂容器，用于制备所述试剂容器的方法，存储试剂的方法，以及用于进行细胞结合、裂解、核酸提取和扩增的微流体系统。因此，该容器中所存储的试剂能在反应中维持其活性以及其稳定性。【专利说明】用于扩增核酸的试剂容器及其制备方法、存储试剂的方法和用于核酸分析的微流体系统对相关申请的交叉引用本申请要求2012年12月3日向韩国知识产权局提交的韩国专利申请N0.10-2012-0139266和2013年3月20日向韩国知识产权局提交的韩国专利申请N0.10-2013-0029921的权益，其公开内容通过引用完整并入本文。专利
本公开涉及用于扩增核酸的试剂容器及其制备方法，存储试剂的方法，和用于进行细胞结合、裂解、核酸提取、以及扩增的微流体系统。专利技术背景在操作遗传材料的实验的几乎每一过程中用作测定法的聚合酶链式反应(PCR)是一种扩增所要检测的特定靶遗传材料的方法。可以通过PCR从少量遗传材料扩增出大量相同的遗传材料，由此可以扩增人遗传材料并用于诊断各种遗传疾病。而且，PCR可以应用于细菌、病毒或真菌的遗传材料并用在传染性疾病的诊断中。此外，由于用户对安全性、便利性和床边即时检验(immediate point of caretesting, POCT)的要求，诊断用装置已逐渐变得小型化和自动化。这类小型化和自动化的诊断用装置使用固体试剂(即冻干的试剂)而非液体试剂，因为液体试剂难以存储且由于其与固体试剂相比稳定性不太可靠。同时，固体试剂由于保存期限更长也更安全，并且可以凭借较小的试剂容器体积而缩小产品本身的大小。 已经进行了对制备固体形式的PCR试剂或PCR预混合物的研究。同时，为了准确鉴定出样品中具体的脱氧核糖核酸(DNA)的存在和DNA的量，在对实际样品的纯化/提取后需要一种充分扩增核酸的方法来测量核酸。可以实施从生物学样品捕获细胞的过程、经细胞裂解提取核酸的过程以及将核酸与PCR试剂混合的过程来实施PCR。专利技术概述本专利技术提供了用于扩增核酸的试剂容器。本专利技术提供了能够在单个装置中操作一系列过程的微流体系统，所述一系列过程是指:捕获样品中的细胞、通过裂解所捕获的细胞来提取核酸、以及进行核酸扩增反应。本专利技术提供了制备用于扩增核酸的试剂容器的方法。本专利技术提供了使用所述试剂容器存储用于扩增核酸的试剂的方法。附图简述这些和/或其它方面将通过下文对实施方案连同所附随的附图的描述变得明白且更容易领会，其中:图1为前视图，其例示依照本专利技术构思的一个实施方案的试剂容器；图2为平面图，其例示依照本专利技术构思的一个实施方案的试剂容器；图3至4为平面图，图5至6为前视图，它们例示依照本专利技术构思的实施方案中包含一个例示性连接部的试剂容器；图7为前视图，其例示依照本专利技术构思的一个实施方案安装于再水合室上的试剂容器；图8和9例示对照组I和实验组I各自的稳定性； 图10和11例示对照组3和实验组3依赖于核酸浓度的稳定性；图12为方块图，其例示依照本专利技术构思的一个实施方案的微流体系统的示意性结构；图13为流程图，其例示在依照本专利技术构思的一个实施方案的微流体系统中实施的一系列过程；图14为透视图，其例示依照本专利技术构思的一个实施方案的微流体系统的示意性外观；图15为例示构成图14的微流体系统的各组件的分解透视图；图16为例示图14的微流体系统的平面图；图17A例示用于形成PCR室的空间的凹槽模式(pattern)，所述PCR室在图14中微流体系统的流体流部分的底部表面上形成；图17B是沿着图17A中的线A-A所取的横截面图；图18例示在图14中微流体系统流体流部分的顶部表面上形成的针型入口和出Π ； 图19A为例示再水合盖结构的平面图；图19B为沿图19A中的线A-A所取的横截面图；图19C为沿图19A中的线B-B所取的横截面图；图20A为平面图,其例示再水合盖和流体流部分组合的状态；图20B为沿图20A中的线A-A所取的横截面图；图20C为例示图20B的具体部分的放大图；图21A为平面图，其例示桥盖和流体流部分组合的状态；图2IB为沿图2IA中线A-A所取的横截面图；图21C为例示图21B的具体部分的放大图；图22A至22C例示安装有试剂供应装置的导向件(guide part)的具体结构；图23A至23C例示试剂供应装置的外部结构；图24A至24T为平面图，其例示依照图13的流程图实施操作的过程，其中有依照本专利技术构思的一个实施方案的微流体系统中流体移动所需要的阀操作；和图25和26图示对照组2和实验组2各自的稳定性。专利技术详述更多的方面会在下文说明书中列出一部分，另外的部分能从说明书中明显看出，或能通过实践本文的实施方案而知晓。如本文中使用的，术语“和/或”包括一个或多个相关列出项目的任一种组合和所有组合。诸如“至少一个/种”之类的表述位于一列要素之前时，修饰整列要素而并不修饰该列中的单个要素。依照本专利技术构思的一个方面，试剂容器包含第一孔(well)，其存储具有核苷酸或核酸组分的第一试剂，包含第二孔，其存储具有反应缓冲液的第二试剂，其中所述第一和第二试剂用于扩增核酸。对于试剂容器，核苷酸或核酸组分可以包含核苷酸、脱氧核苷酸或核糖核苷三磷酸；和引物；以及任选地探针。所述第一试剂还可以包含酶。第一和/或第二孔的截面图的形状可以变化。形状可以是圆形、双圆形、椭圆形、或多边形的，如在矩形或五边形的情况中。第一和/或第二孔的大小可以在微升范围内。例如，孔的大小在约I至约IOul的范围内，例如在约I至约9ul、约I至约8ul、约I至约7ul、约I至约6ul、约I至约5ul、约I至约4ul、约I至约3ul、或约I至约2ul体积的范围内。所述试剂容器还可以包含与第一孔连接的第一开口(aperture)和与第二孔连接的第二开口。第一开口可以排列为不与第一孔实质性分开的，或者可以在流体交换中连接。第二开口可以排列为不与第二孔实质性分开的，或者可以在流体交换中连接。第一和第二开口可以充当所述试剂容器的进口和/或出口。第一和第二开口可以放置在所述试剂容器的上部。此外，第一和/或第二开口的上部可以是打开的。对于试剂容器，所述试剂容器可以安装于再水合室上。由此，所述试剂容器可以充当盖，即试剂容器可以是再水合室盖。第一和第二开口可以与再水合室在流体交换中连接。试剂容器将颠倒安装于再水合室上，由此所述开口的打开的上部与再水合室的外部表面接触，因此形成一个通道。所述再水合室可以用在用于核酸分析的装置或微流体系统中。所述核酸分析可以包括PCR。所述试剂容器还可以包含将第一孔与第二孔彼此连接的连接部。连接部可以是凹槽、通道、壁、或膜。所述凹槽可以具有开放的上部。所述通道中还可以包含阀，且所述阀可以是开放或关闭的。本 领域普通技术人员可以适宜地选出可开放且可关闭的阀。所述壁可以由与第一和第二孔接触的共用侧壁限定，且壁的高度可以低于第一和第二孔的高度。所述膜可以是易脆的。所述膜可以因注射到试剂容器中的流体的压力而被容易地破坏。所述膜还可以是有孔(porous)的。在所述试剂容器中形成多个突出部，且所述第一孔和第二孔可以是在多个突出部上以预定的形状凹进的并且彼此分开的两个子凹槽。第一孔和第二孔的一个侧面具有曲线形状并且在其本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种试剂容器，其包含：存储有第一试剂的第一孔，所述第一试剂包含核苷酸或核酸组分，和存储有第二试剂的第二孔，所述第二试剂包含反应缓冲液，其中所述第一试剂和第二试剂用于扩增核酸。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑盛旭，池圣敏，李树官，权圣弘，金俊镐，南宫桷，朴珍星，黄奎渊，
申请(专利权)人：三星电子株式会社，
类型：发明
国别省市：韩国;KR