一种可溶解凝血酶纳米颗粒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于生物医药领域，公开了一种可溶解凝血酶纳米颗粒及其制备方法和应用。该可溶解凝血酶纳米颗粒具有核壳结构，核为凝血酶，壳为由水溶性直链淀粉-聚赖氨酸的阳离子交联形成的纳米粒子。该核壳结构有利于保持凝血酶的生物活性，在室温下稳定保存，具有缓释功能，药物作用时间长，进入体内不容易被降解，经济安全。本发明专利技术优选纳米粒子的粒径为150～250nm，可更好地保持凝血酶的生物活性，进一步提高纳米凝血酶的稳定性及缓释功能。而为了更好地提高纳米凝血酶的稳定性及缓释功能，纳米凝血酶的包封率优选为50～75%。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种可溶解凝血酶纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：（1）通过点击化学合成直链淀粉?聚赖氨酸纳米颗粒；（2）将直链淀粉?聚赖氨酸纳米颗粒加入到乙酸水溶液中，搅拌至完全溶解，形成直链淀粉?聚赖氨酸乙酸水溶液；（3）将凝血酶加入至pH6.0～8.0缓冲液中，搅拌溶解，形成凝血酶缓冲溶液；（4）将凝血酶缓冲溶液加入到直链淀粉?聚赖氨酸乙酸水溶液中，加入交联剂至质量浓度为0.01～0.10%，升温至30～50℃，以100～800转/分钟的速度搅拌20～60分钟，将其倾倒入至液体石蜡中，搅拌，再加入分散剂至质量浓度为1～10%，以300～1500转/分钟的速度高速搅拌2～8小时进行乳化，得到乳化液；（5）向步骤（4）所得乳化液中加入交联剂至交联剂质量浓度为0.5～5.0%，搅拌20～60分钟，使其分散均匀，置于30～50℃水浴中进行交联8～12小时，将产物冷却至室温，取出，进行过滤；（6）过滤物用丙酮洗涤，使得丙酮表面无漂浮油斑，即得凝胶状半透明纳米微粒；再以乙醇洗涤脱水，即得固态纳米微球；（7）将固态纳米微球在10～40℃温度下真空干燥，得到可溶解凝血酶纳米颗粒。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈汝福，庄宝雄，
申请(专利权)人：中山大学孙逸仙纪念医院，
类型：发明
国别省市：