一种食品中百草枯和敌草快残留量的测定方法技术

本发明专利技术涉及一种食品中百草枯和敌草快残留量的测定方法。本发明专利技术的样品前处理是用甲醇水溶液提取食品样品中的百草枯和敌草快，并选择C18和PSA分散固相萃取剂对提取液进行净化，最后结合高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱，通过化合物离子的精确质量数实现食品中残留百草枯和敌草快的定性和定量测定。百草枯的平均回收率80.6%～96.8%，相对标准偏差为3.9%～7.1%，定量限10μg/kg；敌草快的回收率80.8%～97.3%，相对标准偏差为3.5%～7.8%，定量限10μg/kg。本发明专利技术能有效降低食品中百草枯和敌草快残留检测中的基质干扰，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点，是对已有QuEChERS方法的补充和改进。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及。本专利技术的样品前处理是用甲醇水溶液提取食品样品中的百草枯和敌草快，并选择C18和PSA分散固相萃取剂对提取液进行净化，最后结合高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱，通过化合物离子的精确质量数实现食品中残留百草枯和敌草快的定性和定量测定。百草枯的平均回收率80.6%～96.8%，相对标准偏差为3.9%～7.1%，定量限10μg/kg；敌草快的回收率80.8%～97.3%，相对标准偏差为3.5%～7.8%，定量限10μg/kg。本专利技术能有效降低食品中百草枯和敌草快残留检测中的基质干扰，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点，是对已有QuEChERS方法的补充和改进。【专利说明】
本专利技术属于农药残留量的测定
，具体地说涉及。
技术介绍
在水果、蔬菜、粮谷等农作物种植过程中，农田杂草对农作物产量和品质产生重要影响。除草剂在农业生产中的使用，不仅节省了大量繁重的除草体力劳动和机械除草作业，更重要的是减少了因草害造成的农产品产量和品质的损失，得到可观的经济效益。但是随着人们对食品安全问题的关注，除草剂残留对人类健康的危害也倍受关注。百草枯(paraquat)化学名1，1，- 二甲基_4，4，-联吡啶阳离子，属于有机杂环类季铵盐除草剂。作为广谱性除草剂应用广泛，2011年百草枯销售额在全球除草剂销售中排名第2。百草枯对人畜具有较强的毒性作用，摄入后对生物体的还原-氧化活性影响很大，对肺、心、肝、肾等都有害，目前百草枯中毒尚无有效治疗方法。我国、国际食品法典委员会(CAC)、美国、欧盟和日本等国家对百草枯均制定了残留限量标准，在水果、蔬菜、鱼、肉等多种食品中的最大残留限量0.01?3.5mg/kg。敌草快(diquat)化学名1，1，_乙撑_4，4，_联吡啶阳离子属于有机杂环类非选择性除草剂。用于马铃薯、棉花、大豆、玉米、高粱、亚麻、向日葵等作物催枯，当作物成熟时残余绿色部分和杂草迅速枯干，可以提早收割；用于农田杂草防除:夏玉米免耕除草、果园杂草生长旺盛期进行杂草叶面处理。敌草快对属于中等毒性除草剂，对皮肤和眼睛有刺激作用。我国、美国、欧盟和日本等国家对敌草快均制定了残留限量标准，在水果、蔬菜、鱼、肉等多种食品中的最大残留限量0.05?2mg/kg。QuEChERS方法作为新发展起来的样品前处理技术，是代表快速、简单、价廉、高效、稳定和安全(Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe)的样品前处理方法。具有回收率高，分析农药范围广，处理速度快，溶剂使用量少，操作简便等优点。目前国际广泛认可使用的QuEChERS方法有欧盟制定的EN15662和美国官方分析化学师协会的A0AC2007.01标准方法。2个方法都包括提取、净化2个步骤:1用乙腈或含1%乙酸的乙腈提取样品，通过加入缓冲盐混合物进行盐析萃取实现乙腈和样品所在水相的液-液分离；2用分散固相萃取剂和无水硫酸镁对提取溶液净化，分散固相萃取剂依据样品基质和待测化合物的性质，可选择PSA、GCB、C18EC等。但都必须加入无水硫酸镁以除去中乙腈中残留的水分。但是百草枯和敌草快属于强极性季铵盐类化合物，极易溶于用水，难以用乙腈从水相中萃取，因此无法采用现有QuEChERS方法进行样品前处理。通常百草枯及敌草快前处理采用固相萃取柱净化，方法较复杂，回收率低，对操作人员要求较高；或不经净化直接检测，基质干扰大，对仪器污染严重。因此寻求和建立适应百草枯和敌草快残留检测的QuEChERS前处理方法是非常必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，以弥补现有技术的不足。本专利技术的另一目的是提供一种样品前处理方法，以弥补现有国际广泛认可使用的QuEChERS方法无法用于百草枯和敌草快残留检测的不足。本专利技术的样品前处理是对已有QuEChERS方法的补充和改进，由于百草枯和敌草快极易溶于水的特性，现有QuEChERS方法用乙腈或含I %乙酸的乙腈从水相中盐析萃取的提取方法无法实用，本专利技术选用甲醇水溶液为提取溶剂从样品中直接提取，保证了百草枯的提取效率。在净化步骤，因为提取溶剂主要是水，所以现有方法加入无水硫酸镁除以去除提取液中残余水分的方法并不可行，因此本专利技术仅使用分散固相萃取剂对提取液进行净化，而不加入无水硫酸镁，且分散固相萃取剂只能选择C18和PSA。因此，本专利技术的检测，其前处理是首先用甲醇水溶液提取食品样品中的百草枯和敌草快，再选择C18和PSA分散固相萃取剂对提取液进行净化，最后结合高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(LC-Q T0F)，通过化合物离子的精确质量数实现准确定性和定量分析，以弥补现有技术中对百草枯和敌草快残留检测无法使用QuEChERS方法前处理的技术缺陷，达到提高LC-Q TOF检测的灵敏度，实现食品中百草枯残留的准确分析。本专利技术的测定方法包括如下步骤:(I)提取称取均质化的食品样品于具塞塑料离心管中，加甲醇水溶液涡旋振荡，离心；(2)净化移取(I)获得的上清液于塑料离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，吸取上清液过0.22 μ m滤膜，所得样品液待测定；(3)配制基质标准工作溶液将空白样品按上述步骤(I)、(2)处理，用该空白样品基质溶液在10?1000 μ g/L范围内配制百草枯和敌草快系列浓度标准工作液；(4)液相色谱一四极杆飞行时间串联质谱(LC-Q T0F)测定a)定量测定:将步骤(3)中的各浓度基质标准工作液进行LC-Q TOF测定，以各浓度基质标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)得到的样品液注入LC-Q TOF进行测定，测得样品液中目标化合物的色谱峰面积，代入标准曲线，得到样品液中目标化合物含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中目标化合物残留量。b)定性测定:检测步骤(2)得到的样品液中目标化合物，若其准分子离子色谱峰保留时间与基质标准工作溶液一致；且其准确质量数与浓度相当基质标准溶液中目标化合物的准确质量数的相对标准偏差不超过5ppm时，则判断该样品中存在目标化合物；若上述两个条件不能同时满足，则判断不含目标化合物。上述步骤(2)中优选甲醇水溶液的体积浓度是20%。。上述步骤(2)中基质分散固相萃取剂由C18和PSA组成，每毫升提取液中C18和PSA加入量分别为50mg。上述步骤(4)中液相色谱的流动相为A:甲醇和流动相B:含0.1%甲酸-5mmol/L甲酸铵水溶液，采用A:B体积比20:80等度洗脱，流速:0.2mL/min。上述步骤(4)中液相色谱的色谱柱为亲水色谱柱(HILIC)。上述步骤(4)中质谱检测使用电喷雾源(ESI)正离子模式，毛细管电压为+4000V，雾化气压力为275.8kPa，干燥气为氮气，干燥气温度为350°C，干燥气流速为10.0L/min，参比离子 m/zl21.050873 与 m/z922.009798，扫描范围 50_1100m/z。上述步骤(4)中质谱检测使用一级全扫描模式，百草枯准分子离子的准确分子量186.1159，敌草快准分子离子的准确分子量184.3322。上述步骤(I)和(2)中的涡旋振荡时间是lmin。上述步骤(I)和(2)中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种食品中百草枯和敌草快残留量的测定方法,其特征在于包括如下步骤：（1）提取称取均质化的食品样品于具塞塑料离心管中，加甲醇水溶液涡旋振荡，离心；（2）净化移取上述步骤（1）获得的上清液于塑料离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，吸取上清液过0.22μm滤膜，所得样品液待测定；（3）配制基质标准工作溶液将空白样品按上述步骤（1）、（2）处理，用该空白样品基质溶液在10～1000μg/L范围内配制百草枯和敌草快系列浓度标准工作液；（4）液相色谱??四极杆飞行时间串联质谱测定a)定量测定：将步骤（3）中的各浓度基质标准工作液进行LC?Q?TOF测定，以各浓度基质标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤（2）得到的样品液注入LC?Q?TOF进行测定，测得样品液中百草枯和敌草快的色谱峰面积，代入标准曲线，得到样品液中百草枯和敌草快含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中百草枯和敌草快残留量；b)定性测定：检测步骤（2）得到的样品液中目标化合物，若其准分子离子色谱峰保留时间与基质标准工作溶液一致；且其准确质量数与浓度相当基质标准溶液中目标化合物的准确质量数的相对标准偏差不超过5ppm时，则判断该样品中存在目标化合物；若上述两个条件不能同时满足，则判断不含目标化合物。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘靖靖，王境堂，吴振兴，
申请(专利权)人：刘靖靖，
类型：发明
国别省市：