一种从新鲜茶叶中提取单体EGCG的方法技术

本发明专利技术公开了一种从新鲜茶叶中提取单体EGCG的方法，属于天然产物化学技术领域，具体包括以下步骤：S1.浸泡；S2.离心；S3.一次吸附；S4.MVR浓缩；S5.CF过滤；S6.二次吸附；S7.浓缩；S8.漂洗；S9.脱水；S10干燥；S11.除铁。本发明专利技术采用新鲜茶叶为原料，克服了传统工艺中采用干茶叶粉碎过筛后在高温下浸提时易糊化、不易过滤的缺点，以纯化水做介质直接分离出EGCG单体，减少了一些脂溶性农药的浸出，在纯化工艺中采用LX-8树脂吸附EGCG，HZ818树脂吸附咖啡因，结晶、漂洗、干燥得到EGCG单体，产品类白色至白色粉末，含量达99%左右。该法具有操作简单、分离效率高、成本低、生产周期短，生产的产品纯度高的优点，适用于工厂化大规模生产。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种从新鲜茶叶中提取单体EGCG的方法，属于天然产物化学
，具体包括以下步骤：S1.浸泡；S2.离心；S3.一次吸附；S4.MVR浓缩；S5.CF过滤；S6.二次吸附；S7.浓缩；S8.漂洗；S9.脱水；S10干燥；S11.除铁。本专利技术采用新鲜茶叶为原料，克服了传统工艺中采用干茶叶粉碎过筛后在高温下浸提时易糊化、不易过滤的缺点，以纯化水做介质直接分离出EGCG单体，减少了一些脂溶性农药的浸出，在纯化工艺中采用LX-8树脂吸附EGCG，HZ818树脂吸附咖啡因，结晶、漂洗、干燥得到EGCG单体，产品类白色至白色粉末，含量达99%左右。该法具有操作简单、分离效率高、成本低、生产周期短，生产的产品纯度高的优点，适用于工厂化大规模生产。【专利说明】一种从新鲜茶叶中提取单体EGCG的方法
本专利技术属于天然产物化学
，具体涉及一种从新鲜茶叶中提取单体EGCG的方法。
技术介绍
EGCG，即表没食子儿茶素没食子酸酯，是从绿茶中提取的一种成分，它是绿茶主要的活性和水溶性成分，占绿茶毛重的9-13%，EGCG是绿茶茶多酚的主要组成成分，也是绿茶儿茶素类的主成分，它占绿茶儿茶素类总量的10-15%，儿茶素类包括:没食子酸儿茶素(Gallocatechin, GC)、表没食子酸儿茶素(Epigallocatechin，ECG)、表没食子酸儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子酸儿茶素(EGC)和表儿茶素(EC)等，其中抗氧化活性依次为EC< ECG < EGC < EGCG。因为具有特殊的立体化学机构，EGCG是绿茶中最有效的抗氧化多酚，具有非常强的抗氧化、抗癌、抗突变等活性。抗氧化活性至少是维生素C的100多倍，是维生素E的25倍，能够保护细胞和DNA受损害，这种损害相信与癌症、心脏疾病和其它重大疾病有关，EGCG的这些功效归结于它们对氧自由基的清除能力。EGCG在抗癌和心血管疾病方面担当了重要的角色。此外，它也用作肿瘤多药耐药性的逆转剂，能够改善癌细胞对化疗的敏感性并减轻对心脏的毒性。许多研究表明EGCG具有抗自由基DNA损害，抗辐射和紫外线，阻止油脂过氧化，减少血清中低密度胆固醇、超低密度胆固醇和甘油三酯的含量，干扰癌细胞生存所需的信号传递，抑制饮食中的致癌物质，与肠、肝和肺中的其它酶和抗氧化剂作用共同阻止某些致癌物质的活力，清除自由基，抵御污染、日晒和吸烟的影响，防治皮肤老化和起皱。目前分离儿茶素的方法一般分为两步:首先从茶末中提取含有儿茶素的茶多酚粗制品；其次从粗提取物中纯化分离儿茶素组分。若要得到儿茶素中的各种单体组分，则需进一步经过柱色谱法、半制备高效液相色谱法(HPLC)纯化或者其它仪器方法纯化。由于儿茶素各组分的化学结构与性质十分相近，采用一般的方法很难分离，根据资料分析，目前分离制备儿茶素单体的方法主要有以下几种:(I)柱层析分离法该方法是将茶多酚粗品经一定的溶剂溶解后，上柱分离，用洗脱剂洗脱，收集儿茶素。柱层析的关键是柱填料与洗脱剂的选择。国内外报道的柱填料有三大类型:吸附型柱、离子交换柱、凝胶柱。这种分离方法繁琐、费时、产品纯度不高、还有溶剂残留。(2)高效液相(HPLC)制备色谱法制备型HPLC主要用于分离纯化出儿茶素的单体组分。工艺流程是粗品经葡聚糖凝胶SephadexLH-20柱分离纯化出儿茶素混合物，一般以不同梯度的丙酮水溶液作洗脱剂，分离得到酯型儿茶素和非酯型儿茶素两组流分，再经HPLC制备柱分离纯化，采用甲醇/水为洗脱剂，进一步纯化得到儿茶素单体组分，所得儿茶素产品纯度较高，但存在成本高，周期长、后期溶剂难以完全`除尽等缺点。(3 )高速逆流色谱法(HSCCC )高速逆流色谱法是80年代发展起来的新技术，其特点是高速运转产生的重力场使固定相能在分离柱中实现高的保留，从而大大提高了分离能力，该法属仪器分离法，溶剂系统中各溶剂在分液漏斗中混合后，上层为固定相，灌入色谱分离柱；下层为流动相，将粗品溶解成5-10%的溶液。当流动相流经色谱柱时，儿茶素各组分得到分离。这种分离方法是在两相之间进行的，克服了使用固体吸附材料造成的样品不可逆吸附或降解的缺点，样品可最大限度的得以回收。但该方法成本高，制备量小，不适宜工厂化大规模生产。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种从新鲜茶叶中提取单体EGCG的方法，该法具有操作简单、分离效率高、成本低、生产周期短，生产的产品纯度高的优点。本专利技术的目的通过以下技术方案来实现:一种从新鲜茶叶中提取单体EGCG的方法，它包括以下步骤:S1.浸泡:将新鲜茶叶置于浸提器中，加入纯化水恒温浸泡1.8~2.5h，将浸提器中的混合液过18~24目筛，得滤液；其中，所述恒温浸泡温度为65~100°C ；S2.离心:将滤液置于温度为30~50°C、压强为0.1~0.3MPa的环境下离心50~70s,弃去沉淀,离心液用于下步操作；其中,所述离心机的转速为6500~7000转/min ；S3.一次吸附:将步骤S2所得离心液上样于LX-8树脂，吸附离心液中的EGCG，用70~75%的乙醇洗脱，收集固形物含量为4~6%的洗脱液；S4.MVR浓缩:将收集到的洗脱液加至MVR浓缩器中浓缩100~140min，浓缩温度为60~75 °C，得浓缩液；S5.CF过滤:采用CF过滤器对浓缩液进行过滤，至固形物含量3~5% ;其中，操作温度为35~45°C，操作压强为0.1~0.3MPa，滤膜孔径为0.02 μ m ;S6.二次吸附:将步骤S5所得固形物含量为3~5%的滤液上样于HZ818树脂，吸附滤液中的咖啡因，收集流出液；S7.浓缩:先采用截留分子量为100的反渗透膜浓缩步骤S6收集到的流出液，浓缩至固形物含量> 20%，膜浓缩温度为35~45°C ;再将浓缩液加热至温度> 75°C，蒸发浓缩至固形物含量≤50%,冷却析出晶体；S8.漂洗:将步骤S7所得晶体用温度≤250C的纯净水漂洗2~3次；S9.脱水:将漂洗后的晶体置于转速为1500~1700转/min离心机中离心13~18min,脱去多余水分；S10.干燥:将脱水后的晶体置于温度为60~70°C的微波下干燥，至水分≤5.0% ；Sll.除铁:将干燥后的固体用粉碎机粉碎，过50~90目筛，用磁铁吸附除铁，除铁后将粉末混合均匀，再次过筛、磁铁吸附除铁，所得粉末即为高纯度EGCG。进一步地，步骤SI中所述新鲜茶叶与纯化水的重量比为1:5~8。进一步地，步骤S3和S6中所述洗脱速度为1.8~2.4m3/h。进一步地，步骤Sll中所述磁铁的磁力为10000~15000高斯。本专利技术具有以下优点:本专利技术采用新鲜茶叶为原料，克服了传统工艺中采用干茶叶粉碎过筛后在高温下浸提时易糊化、不易过滤的缺点，以纯化水做介质直接分离出EGCG单体，减少了一些脂溶性农药的浸出，在纯化工艺中采用了两次树脂吸附，第一次吸附采用LX-8树脂，吸附滤液中的EGCG，第二次吸附采用HZ818树脂，吸附滤液中的咖啡因，结晶、漂洗、干燥得到EGCG单体，产品类白色至白色粉末，含量达99%左右。该法具有操作简单、分离效率高、成本低、生产周期短，生产的产品纯度高的优点，适用于工本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从新鲜茶叶中提取单体EGCG的方法，其特征在于，它包括以下步骤：S1.?浸泡：将新鲜茶叶置于浸提器中，加入纯化水恒温浸泡1.8～2.5h，将浸提器中的混合液过18～24目筛，得滤液；其中，所述恒温浸泡温度为65～100℃；S2.?离心：将滤液置于温度为30～50℃、压强为0.1～0.3MPa的环境下离心50～70s，弃去沉淀，离心液用于下步操作；其中，所述离心机的转速为6500～7000转/min；S3.?一次吸附：将步骤S2所得离心液上样于LX?8树脂，吸附离心液中的EGCG，用70～75%的乙醇洗脱，收集固形物含量为4～6%的洗脱液；S4.?MVR浓缩：将收集到的洗脱液加至MVR蒸发器中浓缩100～140min，浓缩温度为60～75℃，得浓缩液；S5.?CF过滤：采用CF过滤器对浓缩液进行过滤，至固形物含量3～5%；其中，操作温度为35～45℃，操作压强为0.1～0.3MPa，滤膜孔径为0.02μm；S6.?二次吸附：将步骤S5所得固形物含量为3～5%的滤液上样于HZ818树脂，吸附滤液中的咖啡因，收集流出液；S7.?浓缩：先采用截留分子量为100的反渗透膜浓缩步骤S6收集到的流出液，浓缩至固形物含量≥20%，膜浓缩温度为35～45℃；再将浓缩液加热至温度≥75℃，蒸发浓缩至固形物含量≥50%，冷却析出晶体；S8.?漂洗：将步骤S7所得晶体用温度≤25℃的纯净水漂洗2～3次；S9.?脱水：将漂洗后的晶体置于转速为1500～1700转/min离心机中离心13～18min，脱去多余水分；S10.?干燥：将脱水后的晶体置于温度为60～70℃的微波下干燥，至水分≤5.0%；S11.?除铁：将干燥后的固体用粉碎机粉碎，过50～90目筛，用磁铁吸附除铁，除铁后将粉末混合均匀，再次过筛、磁铁吸附除铁，所得粉末即为高纯度EGCG。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：顾峰，
申请(专利权)人：成都华高生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：