体内外循环筛选法构建胰腺癌吉西他滨耐药细胞株模型的方法技术

本发明专利技术公开了一种体内外循环筛选法构建胰腺癌吉西他滨耐药细胞株模型的方法，包括如下步骤：(1)细胞培养；(2)皮下移植；(3)胰腺癌模型组的构建；(4)化学治疗模型的构建；(5)取材；(6)采用酶消化法进行瘤体源性原代细胞培养；(7)循环筛选，从而获得耐药细胞株。采用体外细胞培养、体内诱导，重复循环筛选的方法，获得的耐药细胞具有与原代细胞相同的遗传特征，是理想的实验平台。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种体内外循环筛选法构建胰腺癌吉西他滨耐药细胞株模型的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)细胞培养：培养人胰腺癌细胞株PANC‑1，制成单细胞悬液；(2)皮下移植：将1‑10×106细胞悬液接种到裸鼠的右侧颈背部皮下，待长成0.5‑1.5cm3大小后处死裸鼠，将实体瘤取出，去除包膜和坏死组织，剪成0.5‑1.5mm3大小的瘤块，备用；(3)胰腺癌模型组的构建：麻醉裸鼠，剪开胰腺被膜，将步骤(2)的瘤块植入胰尾近脾门处，缝合胰腺被膜，分层缝合肌层及皮肤；(4)化学治疗模型的构建：胰腺癌裸鼠胰腺原位移植后7天开始，注射抗肿瘤药物，每周1次腹腔注射，共4次，第35天处死；(5)取材：处死后收集肿瘤病灶，通过病理切片筛选肿瘤组织；(6)将组织剪碎，采用酶消化法进行瘤体源性原代细胞培养；(7)循环筛选：将步骤(6)的原代培养细胞重复步骤(2)‑(6)1次‑4次，从而获得耐药细胞株。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱锦辉，劳昕元，
申请(专利权)人：朱锦辉，
类型：发明
国别省市：浙江;33