具有广谱抑菌活性的放线菌及其筛选方法技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，具体而言，特别涉及具有广谱抑菌活性的放线菌及其筛选方法。一种具有广谱抑菌活性的放线菌，该菌属于链霉菌属（Streptomyces sp.），其保藏编号为：CGMCC No.7278。一种具有广谱抑菌活性的放线菌的筛选方法，包括：从待分离的土壤样品中得到培养的放线菌；利用平板对峙法、抑菌圈法或十字交叉法从所述培养的放线菌中筛选得到拮抗靶标菌的放线菌。本发明专利技术所提供的具有广谱抑菌活性的放线菌及其筛选方法，通过抑制病原菌生长繁殖的作用对植物病害起到防治的作用，该方法较传统的化学农药防治植物病害的防线相比，其防治效果显著，对土壤无污染，利于无公害、绿色产品的生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物
，具体而言，特别涉及具有广谱抑菌活性的放线菌及其筛选方法。 
技术介绍
植物的病害是由多种病原菌导致的，例如，桃树根癌病(亦称冠瘿病)是由根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)引起的一种世界范围的植物细菌肿瘤病害，我国各地桃树栽培区均有发生，在有的地区，发病率高达100%；植株一旦染病，很难治愈，轻则衰弱黄叶，重则死树；李干腐病是危害枝干和果实的重要病害，是李栽植成活率低和幼树死亡的重要原因，该病原菌为李干腐病菌（Polvporus hirsutus），除危害李树外，还危害梨、柑橘、核果类果树、一部分干果树种，以及杨、柳、刺槐等多种林木；草莓灰霉病是由灰霉病病菌（Botrytiscinerea）导致的，常造成花及果实腐烂，感病品种的病果率在30%左右，严重的可达60%以上，对草霉产量、品质影响很大。 目前，对植物病害最常用措施化学农药防治，例如，利用涂抹石硫合剂或70%甲基硫菌灵可湿性粉剂100倍液等于树干的方法防治李干腐病；利用在移栽或育苗整地前用65%甲霉灵可湿性粉剂400倍液，或50%多霉灵可湿性粉剂600倍液，或50%敌菌灵可湿性粉剂400倍液，或45%特克多悬乳剂600倍液，对棚膜、土壤及墙壁等表面喷雾，进行消毒灭菌预防草莓灰霉病等。 但是，目前，这些用化学农药防治植物病害的方法，防治效果不理想，并且使用化学农药防治植物病害会污染土壤环境，不利于无公害和绿色果品生产。 
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种具有广谱抑菌活性的放线菌及其筛选方法，以解决上述的问题。 本专利技术的实施例中提供了一种具有广谱抑菌活性的放线菌及其筛选方法，该菌为Streptomycetace F3,其保藏编号为：CGMCC No.7278；保藏地点为：中国，北京；中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为：2013年3月5号；该菌属于链霉菌属；该菌的筛选方法包括，A)从待分离的样品中得到培养的放线菌；B)利用平板对峙法、抑菌圈法或十字交叉法从所述培养的放线菌中筛选得到拮抗靶标菌的放线菌。 本专利技术上述实施例的具有广谱抑菌活性的放线菌及其筛选方法，该菌为Streptomycetace F3,其保藏编号为：CGMCC No.7278；是从桃根癌病树根土中，筛选出的具有抗氰作用的放线菌，该菌属于链霉菌属，在实验室条件下，对于多种导致植物病害的病原菌，例如，根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)、李干腐病菌（Polvporus hirsutus）、灰霉病病菌（Botrytiscinerea），有明显的抑制效果；可以作为一种很好的抑菌微生物，用于杀死或者抑制导致植物发生病害的多种病原菌；进而对植物起到防护病害的作用，在具体的操作中，可将筛选得到的放线菌的发酵液喷撒在植株的病害部位；或者可以放线菌活体菌株或发酵液为有效成分制成抑菌肥料，并将抑菌肥料施加到植株的根部土壤中，进而形成以病原菌为靶标，通过抑制病原菌生长繁殖的作用对植物病害起到防治的作用，该方 法较传统的化学农药防治植物病害的防线相比，其防治效果显著，对土壤无污染，利于无公害、绿色产品的生产。 附图说明图1示出了本专利技术实施例1的放线菌的筛选方法； 图2-图5示出了本专利技术实施例2的放线菌对于李干腐病病菌的抑制效果图； 其中，图2表示用Streptomycetace F3发酵液浸泡李枝条；图3表示用水浸泡李枝条；图4表示用Streptomycetace F3浸泡后接病原菌李枝条；图5表示用水浸泡后接病原菌李枝条； 图6-图9示出了本专利技术实施例2的放线菌对于草莓灰霉病菌的抑制效果图； 其中，图6表示用Streptomycetace F3发酵液浸泡草莓；图7表示用Streptomycetace F3发酵液浸泡草莓后接灰霉孢子悬浮液；图8表示用水浸泡草莓；图9表示用水泡草莓后接灰霉孢子悬浮液。 具体实施方式下面通过具体的实施例子并结合附图对本专利技术做进一步的详细描述。 本专利技术实施例一提供的一种具有广谱抑菌活性的放线菌，该菌为Streptomyces sp.，已于2013年3月5号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位的地址是：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏编号为CGMCC No.7278；其分类命名为：链霉菌（Streptomyces sp.）。通过 实验数据表明，Streptomyces sp.对李干腐病病菌Polvporus hirsutus、灰霉病病菌Botrytiscinerea茄褐纹拟茎点霉Phomopsis vexans、黑根霉Rhizopus nigricans、马铃薯干腐病病菌Fusarium caerulem(Libert)Sacc.、白菜黑斑病菌Alternaria brassicae、大丽轮枝菌Verticillium dahlia、银杏叶枯病病菌Alternaria tenuis Ness、胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides Penz.、金银木假尾孢叶斑病菌Pseudocercospora lonicericola(Yamam.)Deighton、桃褐腐病菌Monilinia fructicola、棉花红点病病菌Fusarium monihforme、葡萄痂圆孢菌Sphaceloma ampelinum de Bary、菜豆炭疽病病菌Colletotrichum lindemuthianum、尖孢镰刀菌Fusarium oxysporium、巴西毛壳菌Chaetomium brasiliense、枝孢芽枝菌Cladosporium cladosporioides、丁香假单胞菌流泪致病变种Pseudomonas syringae pv.lachrymans、大肠杆菌Escherichai Coli、油菜黄单胞菌疤斑致病变种X.campestris pv.vesicatoria、胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种Erwinia carotovora supsp.Carolovora、油菜黄单胞菌油菜致病变种X.campestris pv.Campestris、丁香假单胞菌番茄致病变种Pseudomonas syringae pv.tomato、根癌农杆菌Agrobacterium tumefacien/或发根农杆菌Agrobacterium rhizogene均有明显的抑制作用。 本专利技术实施例一还提供了放线菌的筛选方法，请参考图1，包括，步骤101：从待分离的土壤样品中得到培养的放线菌；步骤102：利用平板对峙法、抑菌圈法或十字交叉法从所述培养的放线菌中筛选得到拮抗靶标菌的放线菌。 病原真菌和细菌均可以作为筛选放线菌的靶标菌，根据使用目的的不同，可以选取不同的靶标菌，例如，可以选取根癌农杆菌作为靶标菌。 Streptomycetace F3作为一种很好的抑菌微生物，其可以杀死或者抑制导致植物发生病害的多种病原菌；进而对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有广谱抑菌活性的放线菌，其特征在于，该菌属于链霉菌属（Streptomyces sp.）,其保藏编号为：CGMCC No.7278。

【技术特征摘要】
1.一种具有广谱抑菌活性的放线菌，其特征在于，该菌属于链霉菌属（Streptomyces sp.）,其保藏编号为：CGMCC No.7278。 
2.供试菌的拮抗剂，其活性成份为链霉菌属（Streptomyces sp.），其特征在于，所述供试菌为： 
李干腐病病菌Polvporus hirsutus、灰霉病病菌Botrytiscinerea茄褐纹拟茎点霉Phomopsis vexans、黑根霉Rhizopus nigricans、马铃薯干腐病病菌Fusarium caerulem(Libert)Sacc.、白菜黑斑病菌Alternaria brassicae、大丽轮枝菌Verticillium dahlia、银杏叶枯病病菌Alternaria tenuis Ness、胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides Penz.、金银木假尾孢叶斑病菌Pseudocercospora lonicericola(Yamam.)Deighton、桃褐腐病菌Monilinia fructicola、棉花红点病病菌Fusarium monihforme、葡萄痂圆孢菌Sphaceloma ampelinum de Bary、菜豆炭疽病病菌Colletotrichum lindemuthianum、尖孢镰刀菌Fusarium oxysporium、巴西毛壳菌Chaetomium brasiliense、枝孢芽枝菌Cladosporium cladosporioides、丁香假单胞菌流泪致病变种Pseudomonas syringae pv.lachrymans、大肠杆菌Escherichai Coli、油菜黄单胞菌疤斑致病变种X.campestris pv.vesicatoria、胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种Erwinia carotovora supsp.Carolovora、油菜黄单胞菌油菜致病变种X.campestris pv.Campestris、丁香假单胞菌番茄致病变种Pseudomonas syringae pv.tomato和根癌农杆菌Agrobacterium tumefacien/或发根农杆菌Agrobacterium rhizogene中的一种或多种。 
3.权利要求1所述的具有广谱抑菌活性的放线菌在防治植物病害中的应用。 
4.一种如权利要求1所述的放线菌的筛选方法，其特征在于，包括： 
从待分离的土壤样品中得到培养的放线菌； 
利用平板对峙法、抑菌圈法或十字交叉法从所述培养的放线菌中筛选得到拮抗靶标菌的放线菌。 
5.根据权利要求4所述的放线菌的筛选方法，其特征在于， 
所述土壤样品为桃树根部土壤； 
所述靶标菌为根癌农杆菌。 
6.根据权利要求4所述的放线菌的筛选方法，其特征在于， 
所述步骤从待分离的土壤样品中得到培养的放线菌，包括：取待分离的土壤样品10g置于磷酸缓冲液中，并得到上清液；将所述上清液分成多份，分别稀释至10-8、10-4和10-2梯度，得到不同浓度的样品悬液；将所述不同浓度的样品悬液分别涂在氰化钾浓度为10mg/L、20mg/L和40mg/L的高氏培养基上，28℃恒温培养，得到培养的放线菌。 
7.权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘志民，马焕普，薛红燕，
申请(专利权)人：北京农学院，
类型：发明
国别省市：北京;11