本发明专利技术公开了一种红桂木组织培养培养基,该培养基包括继代培养基和生根培养基。首次采用组织培养的方式进行种苗无性繁殖,该技术比通过种子繁殖更快,可达到规模化生产的要求,而且能有效保持种苗的优良遗传性状,保证了种苗的品质和质量。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及组织培养基,尤其涉及一种红桂木组织培养培养基。
技术介绍
红桂木(Artocarpus nitidus ssp.Lingnanensis(Merr.)Jarr.)又名狗果树、大叶胭脂、胭脂木等,属桑科桂木属常绿乔木,喜高温多湿气候,较耐旱,主要分布于广东中部至西南部、广西、海南、福建南部。其种子富含红桂木凝集素,可用于疾病检测治疗,临床应用潜力很大;果酸甜可口,可生津止渴,开胃化痰,消食敛气,药用价值颇高。木材坚硬,纹理通直,可供建筑、家具及器具等用。红桂木树形优美,枝叶繁茂,树干通直,抗污染及抗火性较强,适应性亦强,绿化效果好,苗木供不应求,特别是中大径级苗木更为匮乏,是一种应用前景广阔的优良乡土树种。红桂木常用种子播种育苗,繁殖较慢,满足不了市场的需求,通过组织培养育苗则能提高繁殖速度,保证苗木质量,达到规模化生产的要求。有关红桂木树的组培育苗技术方面的研究目前还未见有报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足,提供一种红桂木组织培养培养基,该培养基包括继代培养基和生根培养基,其中:每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下:(1)大量元素:硝酸钾1260mg/L、硝酸铵1320mg/L、二水氯化钙440mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L;(2)微量元素:四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L;(3)有机物:肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、半胱氨酸15mg/L;(4)植物生长调节剂:6-苄基腺嘌呤0.3-1.0mg/L、萘乙酸0.1-0.2mg/L;余量为蒸馏水。每升(L)生根培养基的组分及各组分的含量如下:(1)大量元素:硝酸钾475mg/L、硝酸铵412.5mg/L、二水氯化钙110mg/L、七水硫酸镁92.5mg/L、磷酸二氢钾42.5mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L;(2)微量元素:四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L;(3)有机物:肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/;(4)植物生长调节剂:ABT6号0.4-0.6mg/L、吲哚乙酸0.1-0.3mg/L;余量为蒸馏水。本专利技术红桂木组织培养基中的继代、生根培养基的配制方法为:1母液的配制与保存1.1为便于取样,宜先配制各种母液,分为大量元素母液、微量元素母液、有机物母液和各种植物生长调节剂母液。蔗糖、琼脂不宜配成母液,需要时直接称样;1.2大量元素母液浓度成100倍溶液,有机物、微量元素母液配成200倍溶液,植物生长调节试剂母液的浓度配成1mg/ml;1.3母液选用无菌的蒸馏水、去离子水或超纯水配制,大量生产时用煮沸过的水;1.4配制大量元素母液时,每个组分应单独溶解,后按氮、钙、镁、磷的顺序逐个混合,否则容易引起沉淀;1.5微量元素、有机物、植物生长调节剂母液应用棕色瓶装好并置于冰箱中保存;1.6母液配制后应及时使用,贮存时间不宜超过1个月;1.7发现母液有沉淀,或有微生物生长,或有藻类生长,应废弃不用。2培养基的配制2.1依照培养基配方,按比例量取各种母液;2.2在定量容器内放入准备配制培养基总量的约1/2以上的纯净水,并加入适量的糖,然后边搅拌边逐一加入所需量的母液;2.3琼脂可加热熔化后加入,如有搅拌设备时也可直接加入琼脂粉,然后用纯净水补足所需配制培养基的总量,搅拌均匀即可;2.4培养基中的糖,在大量组培苗生产中,一般可用市售白糖,但最好是用蔗糖而不要用甜菜糖;2.5用1.0摩尔/升的盐酸或1.0摩尔/升的氢氧化钠调节培养基的pH值至5.8;2.6配制好的培养基要尽快分装到培养容器中,以免培养基凝固或变稠而难以分装;2.7分装培养基时应注意避免培养基粘在瓶口上,如果粘有培养基,在盖瓶盖或瓶塞前必须用干净纱布擦净瓶口。3培养基消毒灭菌3.1将分装好的培养基装于高压灭菌锅内消毒;3.2加热初期,当消毒锅消毒室的气压达0.05Mpa时,打开冷凝阀,排尽消毒室内冷空气;3.3当消毒室内气压达到0.11Mpa、温度达121℃时,开始计时,保持温度与压力消毒15-20分钟;3.4关闭加热电源开关,按慢排气方式排放热气,待消毒室内的气压降至大气压时打开消毒锅盖或门,取出培养基;3.5培养基应置于空气少流动和少灰尘的干净环境冷却,否则在降温进气过程中导致霉菌孢子进入培养器皿,产生霉菌污染。4培养基储藏4.1培养基应尽量现配现用;4.2可在空气干净且不流动的环境短时间储藏培养基,但储藏超过1个月的培养基应废弃不用。本专利技术红桂木组织培养的方法为:1.无菌芽的获取胭脂树果实为肉质果,7-8月份成熟,当果实由青色转为黄色带红,果肉变软时采摘,将果实揉搓,用清水洗净后得种子,并将其及时置于阴凉处晾干,剥去外壳。在超净台上用75%酒精浸泡消毒10s,无菌水漂洗2-3次,再用0.1%升汞溶液消毒15min,无菌水漂洗5次。将经消毒处理的种子接种在诱导培养基上进行初始培养,诱导种子发芽以获取无菌材料。外植体初次培养时,需全暗培养10天左右,再放到弱光下进行培养,大约经过20天左右的种子开始萌芽,然后再移至见光的地方培养。2.芽的增殖培养将诱导获得的无菌芽接种至继代培养基上进行芽的继代增殖,一般40天继代一次,继代材料均放在培养室内培养,培养室温度为(25±2)℃,光照12h.d-1,光照度2000lx。3.生根的诱导芽条长至约2-3cm时,将较健壮的芽苗由丛生芽上单个切下转至生根培养基上诱导生根,其余芽苗转至继代培养基上继续进行增殖培养。生根培养需要在弱光本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种红桂木组织培养的培养基配方,该培养基包括继代培养基和生根培养基,其特征在于:每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下:(1)大量元素:硝酸钾1260mg/L、硝酸铵1320mg/L、二水氯化钙440mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L;(2)微量元素:四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L;(3)有机物:肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、半胱氨酸15mg/L;(4)植物生长调节剂:6?苄基腺嘌呤0.3?1.0mg/L、萘乙酸0.1?0.2mg/L;余量为蒸馏水;每升(L)生根培养基的组分及各组分的含量如下:(1)大量元素:硝酸钾475mg/L、硝酸铵412.5mg/L、二水氯化钙110mg/L、七水硫酸镁92.5mg/L、磷酸二氢钾41mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L;(2)微量元素:四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L;(3)有机物:肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/;(4)植物生长调节剂:ABT6号0.4?0.6mg/L、吲哚乙酸0.1?0.3mg/L;余量为蒸馏水。...
【技术特征摘要】
1.一种红桂木组织培养的培养基配方,该培养基包括继代培养基和
生根培养基,其特征在于:
每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下:
(1)大量元素:硝酸钾1260mg/L、硝酸铵1320mg/L、二水氯化钙
440mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、七水硫酸亚铁
27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L;
(2)微量元素:四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸
6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、
六水氯化钴0.025mg/L;
(3)有机物:肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5
mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、半胱氨酸15mg/L;
(4)植物生长调节剂:6-苄基腺嘌呤0.3-1.0mg/L、萘...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈丽文,何贵整,时群,陈乃明,荣薏,梁刚,蔡林,张树明,吴红英,巫明忠,樊东函,
申请(专利权)人:钦州市林业科学研究所,
类型:发明
国别省市:
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