包含脂肪分解酶变体的组合物和方法技术

本发明专利技术提供脂肪分解酶变体。具体地讲，本发明专利技术提供与亲本脂肪分解酶相比具有一个或者多个修饰从而具有至少一种改进的性质的脂肪分解酶变体。另外，本发明专利技术提供包含本发明专利技术的脂肪分解酶变体的组合物。本发明专利技术还提供使用包含本发明专利技术的脂肪分解酶变体的组合物进行清洁的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术提供脂肪分解酶变体。具体地讲，本专利技术提供与亲本脂肪分解酶相比具有一个或者多个修饰从而具有至少一种改进的性质的脂肪分解酶变体。另外，本专利技术提供包含本专利技术的脂肪分解酶变体的组合物。本专利技术还提供使用包含本专利技术的脂肪分解酶变体的组合物进行清洁的方法。【专利说明】相关专利申请的交叉引用本专利申请要求2011年8月31日提交的美国临时申请N0.61/529，811的权益，该临时申请以引用方式并入本文。
技术介绍
包括脂肪酶和角质酶在内的脂肪分解酶已被应用于洗涤清洁组合物中以去除油性污溃。脂肪分解酶发挥作用的一个机制是将甘油三酯水解而产生脂肪酸。然而，清洁组合物中存在的表面活性剂和其它组分常常会抑制这些酶，干扰其除去油溃的能力。因此，对于可在清洁组合物的苛刻环境中起作用的脂肪分解酶存在需求。
技术实现思路
本专利技术提供改进的脂肪分解酶，尤其是可用于洗涤剂组合物的脂肪分解酶。具体地讲，本专利技术提供与亲本脂肪分解酶相比具有一个或者多个修饰(如置换)的脂肪分解酶变体。这可通过以如下方式对该酶作出改进来实现:改进洗涤性能、该酶在洗涤剂组合物中的稳定性、该酶的热稳定性、底物水解、表达和/或修饰的电荷/疏水性状况，这些方面可改进该酶在洗涤循环中的有效性。本专利技术提供特别适合于并可用于多种清洁应用的变体脂肪分解酶，包括但不限于变体脂肪酶脂肪分解酶。本专利技术还提供使用本专利技术的脂肪分解酶变体进行清洁的方法。在一个实施例中，本专利技术是一种包含对亲本脂肪分解酶作出的氨基酸修饰的脂肪分解酶变体或其活性片段，其中该修饰在该脂肪分解酶变体的高产位置(productiveposition)处，其中在该高产位置处测试的修饰中的至少75%满足以下标准中的至少一项:a)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.9，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.0 ;b)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.8，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.2 ;c)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.5，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.5 ;并且其中该高产位置选自 1、9、13、18、19、23、25、26、28、32、33、46、47、48、61、64、89、90、92、105、113、114、157、183、204、234、245、246、249和253，其中该脂肪酶变体的氨基酸位置是通过与SEQ ID NO:4中所示的褐色嗜热裂孢菌 (Thermobifida fusca)脂肪酶2的氨基酸序列的对应关系进行编号。在一个实施例中，本专利技术是一种包含对亲本脂肪分解酶作出的氨基酸修饰的脂肪分解酶变体或其活性片段，其中该修饰在该脂肪分解酶变体的高产位置处，其中在该高产位置处测试的修饰中的至少40%但小于75%满足以下标准中的至少一项:a)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、PH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.9，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.0 ；b)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、PH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PD大于或等于PI值0.8，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.2 ；c)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PD大于或等于PI值0.5，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.5 ;并且其中该高产位置选自3、12、24、30、35、49、60、63、65、72、73、87、95、98、108、109、110、112、117、121、122、131、142、151、163、165、174、175、177、182、187、194、195、212、213、232、238、248 和 256，其中该脂肪酶变体的氨基酸位置是通过与SEQ ID N0:4中所示的褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)脂肪酶2的氨基酸序列的对应关系进行编号。在一个实施例中，本专利技术是一种包含对亲本脂肪分解酶作出的氨基酸修饰的脂肪分解酶变体或其活性片段，其中该修饰在该脂肪分解酶变体的高产位置处，其中在该高产位置处测试的修饰中的至少15%但小于40%满足以下标准中的至少一项:a)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、PH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.9，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.0 ；b)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂 稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.8，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.2 ；c)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、PH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PD大于或等于PI值0.5，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.5 ;并且其中该高产位置选自4、5、11、14、17、21、22、31、43、50、53、57、62、68、74、78、82、83、85、88、101、102、106、107、116、124、126、136、138、141、149、152、153、158、178、190、197、202、207、209、216、219 和 250，其中该脂肪酶变体的氨基酸位置是通过与SEQ ID NO:4中所示的褐色嗜热裂孢菌(Thermobifidafusca)脂肪酶2的氨基酸序列的对应关系进行编号。在一个实施例中，本专利技术是一种包含对亲本脂肪分解酶作出的氨基酸修饰的脂肪分解酶变体或其活性片段，其中该修饰在该脂肪分解酶变体的高产位置处，其中在该高产位置处测试的修饰中的至少一个修饰但小于15%满足以下标准中的至少一项:a)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pHIO下的CS-61微样本活性、pH8或pHIO下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于P本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含对亲本脂肪分解酶作出的氨基酸修饰的脂肪分解酶变体或其活性片段，其中所述修饰在所述脂肪分解酶变体的高产位置处，其中在所述高产位置处测试的修饰中的至少75%满足以下标准中的至少一项：a)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pH10下的CS‑61微样本活性、pH8或pH10下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.9，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.0；b)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pH10下的CS‑61微样本活性、pH8或pH10下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.8，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.2；c)这样的位置，其中相对于非经修饰的位置而言，在表达、pH8或pH10下的CS‑61微样本活性、pH8或pH10下对PNO底物的活性、洗涤剂稳定性或者热稳定性方面的最低性能指数(PI)大于或等于PI值0.5，并且其中这些方面中的任何一个的PI值大于或等于1.5；并且其中所述高产位置选自1、9、13、18、19、23、25、26、28、32、33、46、47、48、61、64、89、90、92、105、113、114、157、183、204、234、245、246、249和253，其中所述脂肪酶变体的氨基酸位置是通过与SEQ ID NO:4中所示的褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)脂肪酶2的氨基酸序列的对应关系进行编号。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·A·埃斯特尔，L·B·詹森，K·M·克拉格，R·梅耶达尔，S·普莱斯鲁斯，
申请(专利权)人：丹尼斯科美国公司，
类型：发明
国别省市：美国;US