一种共聚焦光学扫描仪制造技术

本发明专利技术涉及一种共聚焦光学扫描仪，特别涉及使用CCD、EMCCD、CMOS和sCOMS等面阵检测器作为检测单元的、应用于生物荧光显微成像的共聚焦光学扫描仪。本共聚焦光学扫描仪的主要特征是：微透镜阵列的微透镜与针孔阵列的针孔一一对应，针孔阵列位于微透镜的焦平面；照明样品的激发光和样品发射的荧光经过针孔阵列上的同一个针孔；针孔阵列的针孔呈等距矩阵排列，所有针孔在样品上形成的照明点具有相同的移动速度；扫描振镜具有两个反射面，通过其往复旋转来实现对样品的扫描成像。因此，该共聚焦光学扫描仪具有扫描速度快、零杂散光背景噪声、照明强度均一等优点、易于与检测器曝光同步控制。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种共聚焦光学扫描仪，特别涉及使用CCD、EMCCD、CMOS和sCOMS等面阵检测器作为检测单元的、应用于生物荧光显微成像的共聚焦光学扫描仪。本共聚焦光学扫描仪的主要特征是：微透镜阵列的微透镜与针孔阵列的针孔一一对应，针孔阵列位于微透镜的焦平面；照明样品的激发光和样品发射的荧光经过针孔阵列上的同一个针孔；针孔阵列的针孔呈等距矩阵排列，所有针孔在样品上形成的照明点具有相同的移动速度；扫描振镜具有两个反射面，通过其往复旋转来实现对样品的扫描成像。因此，该共聚焦光学扫描仪具有扫描速度快、零杂散光背景噪声、照明强度均一等优点、易于与检测器曝光同步控制。【专利说明】一种共聚焦光学扫描仪
本专利技术涉及一种多针孔共聚焦光学扫描仪，特别涉及使用CCD、EMCCD, CMOS和sCOMS等面阵检测器作为检测单元的、应用于显微成像的多针孔共聚焦光学扫描仪。本专利技术主要应用于生物医学显微成像领域，也可用于材料研究和集成电路芯片检测成像。
技术介绍
随着细胞生物学研究的深入，荧光显微镜成像的应用越来越普遍，共聚焦显微成像更是受到广泛的重视。但是，目前的共聚焦成像系统有各种无法克服问题，使系统的性能难以进一步提闻:1.单针孔激光共聚焦光学扫描仪的成像速度普遍比较低，在典型的1024X1024像素成像条件下，成像速度小于I赫兹；而且单针孔激光扫描共聚焦显微镜使用光电倍增管作为检测元件，光电转换效率不高，只有30 %所有的量子效率。2.转盘共聚焦光学扫描仪利用高速旋转的转盘来驱动等距螺旋排列的针孔扫描对样品。尽管其具有1000赫兹的扫描速度，但位于转盘内径的针孔比位于转盘外径的针孔具有更慢的旋转速度，使得各个针孔对样品的照明时间长短不一，造成照明强度不均匀。而高速旋转的转盘不能实时调节转速，使得对样品的照明与检测器的曝光不能完全同步，给图像带来明暗相间的扫描线，降低了图像质量。3.滑块共聚焦扫描仪利用往复滑动的滑块来取得多个针孔扫描样品，由于目前的技术限制无法实现高速扫描，扫描速度最快只有20赫兹。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对目前各种共聚焦光学扫描仪存在的不足之处进行改进，如单点共聚焦激光扫描仪扫描速度慢、灵敏度低；转盘共聚焦扫描仪有亮暗相间的扫描线干扰、照明强度不均一；滑块共聚焦扫描仪扫描速度慢等问题，提供一种新的多针孔共聚焦光学扫描仪，配合荧光显微镜和面阵检测器组成共聚焦成像系统，从而高速地获取高质量的共聚焦图像。本专利技术的目的是通过以下的技术方案实现的:如图1所示，本专利技术提供一种多针孔共聚焦光学扫描仪，主要包括:光源I ;激发滤色片2 ;照明透镜组3 ;微透镜阵列4，其上排列了微透镜4a ;二色分光镜5 ;针孔阵列6，其上排列了针孔6a ;延迟透镜组7 ;扫描振镜8，有第一反射面8a和第二反射面8b ;截止光阑9，分为透光部分9a和不透光部分9b ;全反镜组10 ;成像透镜组11 ;发射滤色片12 ;控制器13 ;其特征在于:所述光源I使用激光、发光二极管、汞灯、氙灯和金属卤化物灯中的任意一种或多种作为光源；所述激发滤色片2的作用在于，透过所述光源I发射的部分波长的光、反射其它波长的光，得到用于照明样品的激发光；所述照明透镜组3的作用在于，使所述光源I发射并透过所述激发滤色片2的激发光形成平行光束；所述微透镜阵列4位于所述照明透镜组3，并垂直于所述平行光束，其上排列了多个透光的、具有相等焦距的所述微透镜4a，其余部分不透光；所述微透镜4a是圆形或多边形，如三角形、方形、矩形、四边形、五边形和六边形等；所述微透镜是菲涅耳透镜、曲面反射镜、微型凸透镜型微透镜中的一种或多种，且具有相等的焦距；所述二色分光镜5位于所述微透镜阵列4和所述针孔阵列6之间，与所述平行光束有45度夹角；所述针孔阵列6放置在所述二色分光镜5之后，垂直于所述平行光束，并且位于所述微透镜4a的所述二色分光镜5 —侧的焦平面上；所述针孔阵列6上排列了多个透光的所述针孔6a，其余部分不透光；所述针孔6a是圆形或多边形，如三角形、方形、矩形、四边形、五边形和六边形等；所述针孔6a为圆形时,所述针孔6a的大小r定义为所述圆形的半径；所述针孔6a为多边形时，所述针孔6a的大小r定义为所述多边形的内切圆的半径；所述针孔6a的大小r由显微镜19的物镜15的数值孔径NA、放大倍率Ml、所述延迟透镜组7的放大倍率M2和所述样品16发射荧光的波长λ决定:r = 0.61Χ λ+ΝΑΧΜ1ΧΜ2如图8所示，所述针孔阵列6上的所述针孔6a按照以下规则排列:当所述扫描振镜8旋转时,所述照明点在所述样品16上移动的方向定义为扫描方向；将平行于所述扫描方向的所述针孔6a的排列定义为行；将垂直于所述扫描方向的所述针孔6a的排列定义为列；每一行的所述针孔6a的数量相等，每一列的所述针孔6a的数量相等，且每一行至少有一个所述针孔6a ;穿过所述针孔6a的中心画平行于所述扫描方向的直线，相邻的两条直线的距离为相邻两行所述针孔6a的行间距，称为I ;穿过所述针孔6a的中心画垂直于扫描方向的直线，相邻的两条直线的距离为相邻两列所述针孔6a的列间距，称为J ;同一行的相邻两个所述针孔6a的中心距离定义为K ;同一列的相邻两个所述针孔6a的中心距离定义为L ;所述针孔6a的排列使1、J、K和L与所述针孔6a的大小r有以下等式关系:O < I ^ 2rL = nX I,K2 = η2 X L2-12J2 = L2-12η为改变所述针孔6a间距离的系数，I < n ^ 20 ；如图9所示，所述微透镜4a和所述针孔6a有相同的排列，经过所述二色分光镜5形成一一对应关系，即所述平行光束被所述微透镜4a分束、汇聚，汇聚的焦点位于所述二色分光镜5后的所述针孔6a的中心；所述平行光束分束透过所述针孔6a后形成多个点光源；所述延迟透镜组7对所述针孔阵列6成像，像平面与所述物镜15对所述样品16成像的像平面重合，使所述点光源在所述样品16上形成与所述针孔6a—一对应的照明点；所述扫描振镜8围绕固定转轴往复旋转，有两个反射面，即第一反射面8a和第二反射面8b ;第一反射面8a和第二反射面8b是平面反射或凹面反射；当所述第一反射面8a和第二反射面8b是凹面反射时，有相等或不等的焦距；所述截止光阑9位于所述样品16经过所述物镜15成像的像平面，分为所述透光部分9a和所述不透光部分9b ；所述全反镜组10是平面反射或凹面反射；所述成像透镜组11对所述针孔阵列6成像，像平面位于面阵检测器20的感光芯片14上；所述发射滤色片12的作用在于，透过所述样品16发射的特定波长的荧光，反射其它波长的光；所述控制器13的作用在于:控制所述扫描振镜8的旋转位置、旋转周期，并与所述面阵检测器20进行信号通讯，实现所述扫描振镜8的旋转与所述面阵检测器20的曝光同步控制。本专利技术的优点如下:1、本专利技术由扫描振镜驱动扫描，配合使用CCD、EMCCD、CMOS和sCOMS等高灵敏度面阵检测器，可实现高速、高灵敏度的共聚焦光学成像。2、本专利技术为单一针孔阵列，激发光与荧光经过同一个针孔阵列，安装调节简单。3、本专利技术使用微透镜阵列和针孔阵列双阵列结构，微透镜和针孔一一对应，光源利用率高，无杂散光背景噪声。4、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种共聚焦光学扫描仪，通过有两个反射面的扫描振镜反射由光源发射并透过针孔阵列的光，照明位于显微镜物镜焦平面的样品，并通过所述扫描振镜的旋转对所述样品进行扫描，最后由面阵检测器记录所述样品发射并透过所述针孔阵列的荧光，完成共聚焦成像，其特征在于：有一个所述针孔阵列，其上排列了多个透光的针孔，其余部分不透光；所述针孔将所述光源发射的光束分成多个点光源，并经过所述扫描振镜的第一反射面反射，在位于所述显微镜物镜焦平面的所述样品上形成多个与所述针孔一一对应的照明点，同时照明所述样品；所述样品发射的荧光经过所述显微镜物镜后，被所述扫描振镜的第一反射面反射透过所述针孔，再经过所述扫描振镜的第二反射面反射，在所述面阵检测器的感光芯片上形成多个图像点；所述扫描振镜旋转，使所述照明点以相同的速度在所述样品上移动，实现对所述样品完全的、均匀的照明；同时使所述图像点在所述面阵检测器的感光芯片上移动，得到完整的所述样品的荧光图像，完成共聚焦成像。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赖博，
申请(专利权)人：赖博，
类型：发明
国别省市：广西;45