徐定邦专利技术

徐定邦共有32项专利

  • 垂直板琼脂凝胶,其特征在于所说的琼脂凝胶板厚小于2mm,板面(1)直立,其上沿面(3)上有多个深度为5-10mm的点样孔(2)。
  • 一种多层电泳凝胶,其特征在于各层凝胶由聚丙烯酰胺和琼脂糖两种组分构成,或由不同浓度的聚丙烯酰胺凝胶、或不同浓度的琼脂糖凝胶所构成。
  • 本发明是一种分子生物学技术,即一种改进了PCR反应参数和目标产物电泳条带检测程序的定量聚合酶链反应方法。其特点是聚合酶链反应的正、反引物的最终浓度为1-100uM。反应中正、反引物的解链温度为85-92℃,PCR反应的引物长度可为25-...
  • 一种同源引物的聚合酶链式反应方法,依次包括如下步骤:    (1)模板变性;    (2)引物退火;    (3)DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链;    (4)按步骤(1)-(3)循环进行扩增反应;    其特征在于,正、反引物...
  • 一种万能引物的聚合酶链式反应方法,依次包括如下步骤:    (1)模板变性;    (2)引物退火;    (3)DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链;    (4)按步骤(1)-(3)循环进行扩增反应;    其特征在于,所用引物包...
  • 本发明属于分子生物学技术,即一种以聚合酶链式反应为基础的基因定量方法。本发明PCR接续转录反应方法分二步进行。第一步为先作比通常循环数少5-10个循环数的低循环数PCR,当扩增产物呈直线累积、PCR平坡出现前结束反应。由于在PCR一个引...
  • 本发明提供一种用限制性核酸内切酶水解的基因组DNA作模板的PCR方法及其反应液,以克服标准PCR方法在扩增目标基因产物的同时往往伴随形成非专一产物、抑制目标产物形成的缺陷。通过选择对目标扩增顺序无切点的1-5种内切酶,特别是识别4-6碱...
  • 本发明提供嵌套聚合酶链式反应方法及其在核酸检测中的应用,通过控制PCR循环不同阶段的退火和变性温度,即在第一阶段中,退火温度为60-80℃,第二阶段变性温度为65-87℃,第一阶段和第二阶段之间有2-4个循环的过渡阶段,此阶段变性温度与...
  • 本发明涉及一种多重引物的聚合酶链式反应方法及其反应液和在制备微生物检测试剂中的应用,特别涉及在PCR过程中采用92-97℃和65-87℃两种变性温度分别进行最初2或3个循环和其他后续循环,克服了现有的针对同一DNA链的多重PCR中正反引...
  • 本发明提供用于PCR和RT-PCR全预混试剂组合物,包括研究用全预混PCR和一管法RT-PCR试剂,以及临床核酸检测用全预混PCR和一管法RT-PCR试剂。特别地,全预混试剂含30-65%(v/v)的甘油,优选40-55%(v/v)。研...
  • 本发明提供使用唯一引物来完成PCR或RT-PCR的方法及其应用,整个反应的引物为唯一的根据模板DNA链顺序特征而设计的寡聚核苷酸链,引物3端6-12个碱基与模板顺序完全互补,而5端则采用柔性设计。突破了经典PCR理论中使用一对引物完成扩...
  • 本发明涉及一种含高浓度甘油的聚合酶链式反应的方法及其反应液和应用,特别地,采用在原有的PCR反应液中添加5-45%(V/V)甘油的高甘油配方,大大突破了现有的反应液甘油浓度,并且提供相应的提高首次变性温度至95℃-98℃、降低循环中变性...
  • 本发明涉及一种一管式反转录聚合酶链式反应方法及其在提高RT-PCR和多重RT-PCR反应专一性中的应用,特别涉及缩短反转录反应时间至0.5-15分钟、扩展常温反转录酶MMLV和AMV的反转录步骤的反应温度范围为4-37℃或50-75℃和...
  • 本发明提供一种检测变异序列的聚合酶链式反应方法,其步骤依次包括:    (1)DNA模板变性解链;    (2)引物与模板退火;    (3)在DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链;    按步骤(1)-(3)循环进行合成反应,其特征...
  • 一种无需分离DNA的RNA检测试剂,其组分包括:四种dNTP、反转录酶、反转录引物、耐热DNA聚合酶、正反PCR引物,其特征在于反转录引物和PCR反引物为同一引物并且与目标基因顺序有2-15个碱基错配。
  • 本发明提供一种用超短引物或含若干错配碱基引物检测碱基突变的单管嵌套式聚合酶链式反应方法,即利用长度为6-14碱基的超短引物或含若干错配碱基通常长度引物进行等位专一扩增,使“野生型等位专一引物”完全失去与突变型模板结合的能力,使“突变型等...
  • 一种单管一步三引物反转录聚合酶链式反应方法,其RT-PCR反应液含一对PCR引物和一个位置在PCR反引物下游的反转录引物,PCR引物被包埋在石蜡等固体颗粒内置于反应液中,反转录时不与反应液接触,进入扩增阶段石蜡熔化引物被释放到溶液中。同...
  • 一种将扩增所需试剂成份的一部份用高融点微晶石蜡或有类似特性的固体包埋或阻隔的聚合酶链式反应方法。PCR前阶段变性温度低于石蜡的融点,被包埋或阻隔的试剂不参与反应,反应中途一个循环或反应后期的变性温度高于石蜡的融点,被包埋或阻隔的试剂释放...
  • 一种含耐热限制性核酸内切酶的聚合酶链式反应方法和相应的试剂盒。选择引物对的位置使扩增产物不含有所述的耐热限制性核酸内切酶识别顺序,或根据既定的扩增产物的限制性内切酶图谱选择含不同内切酶组合的试剂盒。本发明可在不增加保温或其他步骤的情况下...
  • 一种单管原位嵌套式聚合酶链式反应方法及其在核酸检测中的应用。反应液含内套引物和外套引物,内套引物与目标基因顺序有错配或在5’端带一段非基因专一顺序。内套引物与原始模板的最高允许退火温度低于第一轮反应的退火温度,而内套引物与匹配模板的解链...